瘦肉精快速检测

瘦肉精快速检测

2011年04月20日11:00 阅读次数：

13 来源：食品安全快速检测网 [字号：大 中 小]

是一类药物，而不是一种特定的物质，是指能够促进瘦肉生长的添加剂。任何能够促进瘦肉生长、抑制肥肉生长的物质都可以叫做“瘦肉精”。 目前，能够实现这种功能的物质是一类叫做β-兴奋剂（β-agonist）的药物，比如在中国造成中毒的克仑特罗（clenbuterol）和美国允许使用的莱克多巴胺/又译雷托巴胺（Ractopamine）。

瘦肉精在上海曾经引发了几百人的中毒。而在台湾，由于从美国进口的猪肉里含有瘦肉精，几乎挑起一场政治争端。由于西方国家一般不消费动物内脏（猪肉一般不含瘦肉精，但内脏特别是肝脏则会残留瘦肉精），因而在美国、加拿大、新西兰等国，瘦肉精这类物质的使用是合法的。其它这样类似药物还有沙丁胺醇（Salbutamol）和特布他林（erbutaline)等，同样能起到“瘦肉”作用、却对人体健康危害过大，因而造成安全隐患。它们也因而在全球遭到禁用。

早在2002年，农业部、卫生部、国家食品药品监督管理局就公告，明令禁止在饲料和动物饮用水中添加盐酸克伦特罗和莱克多巴胺等7种瘦肉精。而据有关专业人士透露，各地在进行瘦肉精检测中基本都只检测盐酸克伦特罗，莱克多巴胺只有个别地方有检测。而正因为如此，一些不法养殖户就选择回避盐酸克伦特罗，改用莱克多巴胺等其他品种的瘦肉精。

为了较彻底排查检测“瘦肉精”，最好检测盐酸克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇三种“瘦肉精”。

排查常用的方法是胶体金卡法，该方法操作方便、快捷，整个检测过程只需几分钟；检测灵敏度高;结果直观；胶体金本身为红色，不需加入发色剂，对人体无害；标记物稳定，携带、储存方便；成本低，无需仪器设备。非常适合于基层执法部门对“瘦肉精”的快速筛查。

胶体金速测卡原理：

胶体金速测卡的检测原理是竞争性免疫层析。将着色标记物与待测抗原的特异性抗体(Ab1)相偶联,沉积在结合区。而检测区处固相化的是待测抗原或待测抗原的类似物。若样品中含有待测抗原,则样品中的抗原和带有标记物的Ab1形成Ag-Ab1复合物。随后在通过固相化有待测抗原或其类似物的检测区时,由于竞争抑制,不再发生反应,检测线处不显色;样品继续前移, Ag- Ab1 复合物被固相化在质控线处的抗Ab1 抗体(Ab2)所结合,形成Ab1- Ag- Ab2 复合物,使质控线显色。

快速检测技术研究中心根据此原理成功研发出盐酸克伦特罗速测卡、莱克多巴胺速测卡和沙丁胺醇速测卡，为基层执法部门对“瘦肉精”的快速筛查提供了简便、快捷、经济、适用的快速检测手段。

瘦肉精快速检测法-盐酸克仑特罗快速检测卡

2011年04月11日16:44 阅读次数：

6 [字号： ]

盐酸克仑特罗（瘦肉精）速测卡使用说明书

【简介】

盐酸克仑特罗（Clenbuterol Hydrochloride，简写Clen）俗称瘦肉精，为一种人工合成的β-肾上腺素能兴奋剂，具有扩张支气管的作用。当人食用含有盐酸克仑特罗（瘦肉精）残留的产品后的中毒症状为心动过速，低血钾，低磷酸盐血症，肌肉震颤，头晕，口干，失眠甚至瘫痪等。国家已经明令禁止盐酸克仑特罗在动物饲养中使用。本试纸用于猪和牛尿液、肉、酱肉及其食用饲料中的盐酸克仑特罗残留的快速筛选检测。

【检测原理】

本试纸采用竞争抑制免疫层析技术的原理来测定动物尿液、组织和饲料中的盐酸克仑特罗。试剂含有被预先固定于膜上检测带（T）的盐酸克仑特罗偶联物和被胶体金标记的抗盐酸克仑特罗单克隆抗体。检测时样品和标记抗体竞争结合偶联物。检测限为3ng/ml（3ppb）。

【样品制备】

1.尿液：样本必须用洁净、干燥不含有任何防腐剂的塑料尿杯或玻璃容器收集。可直接检测，如有浑浊请先离心（3000rpm,5min）取上清。若不能及时检测送检，尿样样本在2-8℃冷藏可以保存48小时。长期保存需冷冻于-20℃，忌反复冻融。

2.肉：装入大约4克碎的肉样本（肉泥）于离心管中（酱猪牛肉加2ml水或PBS），盖紧管盖，在80℃左右的水浴锅中水浴10 分钟；吸取煮出的溶液到1.5ml的离心管中。如有明显黄色浑浊请离心（3000rpm,5min），取上清检测。如果检测牛肉请吸出肉汤离心(3000rpm,5min)，取上清检测。

3.饲料：取1g样品粉末于离心管中，加入5ml水，混匀，置于超声波水浴中超声30min（每10min取出混匀1次），超声提取后冷却至室温，于3000rpm离心5min，取上清液进行测试。

【操作步骤】

1.在进行测试前先仔细阅读使用说明书，使用前将本品和待检样本溶液恢复至室温。

2.从原包装中取出试剂，打开后平放在桌面上，请在1小时内尽快使用。

3.吸取待检样品溶液，缓慢滴加80~100μl(约2~3滴）于加样孔中，加样后开始计时。

4.在5分钟内读取结果，超过5分钟的结果判读无效。

【结果判定】

阳性：位置C显示出红色条带，位置T无条带或颜色非常模糊时判为阳性。

阴性：位置C显示出红色条带，位置T同时出现红色条带时，判为阴性。

无效：位置C不显示出红色条带，则无论位置T显示出红色条带与否，该试纸卡均判为无效。

【贮存及有效期】

冷藏，忌冷冻，有效期12个月。

【注意事项】

1.请按照操作步骤进行测试，操作时请勿触摸试纸显示区。

2.如购买时发现过期，破损，污染，无效的产品，请到购买处更换。

3.本品为一次性产品，请勿重复使用。

4.出现阳性结果，建议用本卡复查一次。

5.自来水、蒸馏水或去离子水不能作为阴性对照。

6.由于样品（尿和饲料）的差异，有的检测线可能偏淡或偏暗，但只要出现条带，就可判定为阴性结果。

7.若需直接检测品，请用PBS或阴性样品配制。

瘦肉精快速检测方法二：酶联免疫(ELISA)法

点击次数：707 发布时间：2011-5-27

一、方案特点：

A、检测原理：

测定的基础是抗原抗体反应。微孔板上包被有针对兔IgG(Clenbuterol抗体)的羊抗体，含有克伦特罗抗原的样品或标准品与酶标记物被加入到小孔中，经过孵育及洗涤步骤后，游离的抗原与抗原酶标记物竞争抗体结合位点，没有结合的抗原酶标记物在清洗步骤中被除去，将显色液加入到孔中并且孵育，结合的酶标记物将无色的发色剂转化为蓝色的产物。加入反应停止液后使颜色由蓝色转为黄色。在450nm处测量，吸光强度与样品的克伦特罗浓度成反比。

B、操作时间： 30分钟左右

C、检测下限： 0.1ppb(微克/公斤)

D、检测对象：猪尿样和血清、饲料、肝脏等组织。

二、检测需要仪器设备配备方案：

序号 设备名称 技术参数 配备数量 1 电子天平 最大称量值：200克；测量精度：0.01克 1台 2 匀浆机 最高转速：12000r/m 1台

容 量：1000ml

定时范围：0～60min(或常开)

电 源：交流220V 50Hz

3 离心机 容量6×20ml；4000转/分；离心力：1435Xg 1台 4 振荡仪 转速范围：起动～360r/min 1台

振 幅:2Omm

装瓶量:试管:￠6×130,100ml×12,200ml×6

定时范围:0～120min(或常开)

电 源:交流220V 50Hz

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