手术室空气采样方法

1、采样时间：消毒后、操作前进行采样。

2、采样方法：

（1）布点：

室内面积≤30 m2，设内、中、外对角线3点，内外点距墙1m；室内面积 >30 m2，设四角及中央5点，四角点距墙1m。

（2）平板暴露法

平板直径9cm、采样高度1.5m，暴露5min。

3、检验方法

平板37℃培养48h。计数菌落数并分离致病菌。

4、平板暴露法结果计算

50000N

细菌总数（cfu/m3）=A×T

A为平板面积（cm2）； T 为暴露时间（min）；N 为平均菌落数（cfu）

5、结果判定

（1）I、II类区域，细菌总数≤10cfu/cm3，并未检出致病菌为消毒合格。

（2）III类区域，细菌总数≤200cfu/cm3，并未检出致病菌为消毒合格。

（3）IV类区域，细菌总数≤500cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。

6、注意事项：采样前关好门窗，在无人走动的情况下，静止10min 进行采样

层流手术室空气日常监测方法：

要求日常实行动态监测，必测项目为平板采样法（沉降法）或采样器法(浮游菌法)检测细菌菌落总数。

（1）回风口动态平板采样法：应在手术开始、手术2小时、手术结束前抽检3-4次。每个回风口中部摆放3个倾斜30℃，Φ90 培养皿，暴露30分钟后，37°C培养24小时。 标准：每皿菌落计数平均值应符合表4标准要求。单皿最大值不应超过平均值3倍。

（2）动态采样器法：浮游菌菌落检测应在手术进行如切皮、缝合、连台手术之间、手术进行4小时等，选择不少于3个程序，测定细菌菌落总数。

标准：I级<30cfu/m3 ；II级<150 cfu/m3；III级<450 cfu/m3；IV级<500 cfu/m3。

（3）其他洁净用房在当天上午10时和下午4时各测1次，在每个回风口中部摆放3个Φ90培养皿，沉降0.5h后在37℃下培养24h。

标准：同回风口动态平板采样法标准。

层流手术室静态（空态）时空气采样方法：

1、采样方法：

（1）当送风口集中布置时，应对手术区和周边区分别检测；当送风口分散布置时，按全室统一布点方法检测。

（2）沉降法采样时，用直径9cm的培养皿，在空气中暴露30min，37℃培养24h，培养皿中的菌落数（cfu）代表空气中沉降下来的细菌数，以个/皿表示。

（3）浮游法采样时，用裂隙采样器在空气中随机采样30min，对采样皿或采样条培养得出的菌落数（cfu），代表空气中浮游下来的细菌数，以个/m3表示。

2、采样高度：

（1）采样点可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上；

（2）在手术区检测时应无手术台；当手术台已固定时，检测高度应在台面之上0.25cm。

3、布点方法：（见表1）

4、采样注意事项：

（1）在100级区域检测时，采样口应对着气流方向；在其他区域检测时，采样口均向上；

（2）采样后的培养基条或培养皿，应37℃条件下培养24h，并计算菌落数，菌落数的平均值均四舍五入选位到小数点后1位；

（3）当采用浮游法测定浮游菌浓度时，细菌浓度测点数应和被测区域的含尘浓度测点数相同，且宜在同一位置上。每次采样应满足表8的最小采样量的要求，每次采样时间不应小于30分钟。

（4）当用沉降法测定沉降菌浓度时，细菌浓度测点数即要不少于含尘浓度测点数，应满足表9规定的最少培养皿数的要求（不含对照皿）。如沉降时间适当延长，则最少要求培养皿数可按比例减少，但不能少于含尘浓度的最少测点数。

（5）不论用何种方法检测细菌浓度，都必须有两次空白对照。第一次用于检测培养皿或培养基条（每批一个对照皿（条））；第2次对操作过程做对照试验（每室或每区将1个对照皿（条），打开后又立即封盖，进行模拟操作）；两次对照结果必须为阴性，整个操作过程应符合无菌操作的要求。

（6）新房验收时，应最后做空气、物表细菌检测。

表1 洁净手术室空气采关布点位置与方法

区域 最少测点数 手术区图示

Ⅰ级 洁净手术室 5点（双对角线布点）

手术区和洁 净辅助用房 8点（每边内2点）

局部100级区

Ⅰ级 周边区

Ⅱ～Ⅲ级 洁净手术 3点（单对角线布点） 集中送风面正投影区 室手术区 6点（长边内2点，短边内1点） 集中送风面正投影区 Ⅱ级 周边区 4点（每边内1点）

Ⅲ级 周边区

Ⅳ级洁净手术室及分散 4点（避开送风口正下方）

布置送风口的洁净室面 2点（避开送风口正下方）

积＞30㎡

面积≤30㎡

注：分布在集中送风面正投影区角的采样点距离邻近两边的距离位0.12米