蛋白质的分离纯化

蛋白质的分离纯化

蛋白质的分离与纯化

蛋白质的分离纯化

蛋白质分离纯化的基本流程

蛋白质的抽提

蛋白质的分离纯化

一、材料的选择和预处理

的来确定。

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二、细胞的破碎

（一）机械方法：机械方法：主要通过机械切力的作用使组织细胞破坏。主要通过机械切力的作用使组织细胞破坏。 的刀片），的刀片），玻璃匀浆器（玻璃匀浆器（用于少量材料；用于少量材料；铝、

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（二）物理方法：物理方法：主要通过各种物理因素的作用，主要通过各种物理因素的作用，使组织细胞破碎。

起溶胀，起溶胀，使细胞结构破碎。使细胞结构破碎。超声波法：超声波法：剧震荡破裂，剧震荡破裂，

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（三）化学及生物化学法

细菌细胞壁较厚，细菌细胞壁较厚，

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细胞器的分离

细胞经过破碎后，细胞经过破碎后，即得所需组分葡萄糖-

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三、蛋白质的提取

溶解状态充分地释放出来的天然状态，的天然状态，大部分蛋白质都可溶于水液，酮、

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表面活性剂，表面活性剂，与膜分离。与膜分离。拌等，拌等，

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水溶液提取法

白质的最常用溶剂。白质的最常用溶剂。注意事项

温度：温度：一般采用低温（一般采用低温（4 pH：范围

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有机溶剂提取法

溶液、溶液、稀酸或稀碱中，稀酸或稀碱中，丁醇等有机溶剂提取；丁醇等有机溶剂提取；

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丁醇兼具亲水性，丁醇兼具亲水性，的变性失活。的变性失活。

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表面活性剂的利用

表面活性剂有阴离子型基苯磺酸盐及胆酸盐等（及吐温80子型温和

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对提取物的保护

二异丙基氟磷酸（二异丙基氟磷酸（DFP）用；活性

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四、蛋白质的纯化

必须建立可靠的活性测定的方法 纯化流程