食品中三种γ-氨基丁酸检测方法比较
化学,实验
ww w .hna ar . t c i d iyne
中国乳品工业da r DU T Y ̄yI i N SR
rg@cia un1 e. py h j ran tn no . c
食品中三种氨基丁酸检测方法比较一赵宏飞,宋伟裴家伟张柏林,,(.北农业大学食品科技学院,定河北 0 10;.京林业大学食品科学系,京 10 8 1河保 7 0 1 2北北 0 0 3)
摘要:用高效液相色谱 ( L、良纸层析法和B r e t色法对不同来源介质中的一基丁酸 ( A A)测效果进行了比较应 HP C)改 et l比 h o氨 G B检
研究 .别建立了3方法的GA A检测体系。结果表明, L;定结果准确,分种 B HP C ̄ 4灵敏度高,用范围广;良纸层析法和 B r e t适改 et l ̄ h o g色法操作简单快速 .用于大量样品中G B可 A A的检测进一步地,良纸层析法可用于微生物发酵液等色素含量较少介质中的 G B检测,改 A A 而比色法更适合成分相对单一介质中的G B检测 A A关键词:氨基丁酸( A A;一 G B )高效液相色谱法;良纸层析法; r e t改 Be h l ̄ t o L色法
中图分类号:S 0 . T 273
文献标识码: A
文章编号:0 1 2 3{0 8 1 - 0 1 0 10 - 2 0 2 0 )1 0 5— 5
Com pa ions f t e m e ho a ia e o t a l i of y— Am i rs o hr e t ds val bl f r he nayss nobut i yrca i r m oo e cd fo f d nvi o r nm e s nt
Z HAO Ho g f S n— e, ONG W e, E a we, HA —i i i P I i— i Z NG Bo l J n( .c o oo ce c nd T e hn l y, H e e g iu t r lU nie st,Ba i 71 01 1S ho lofF d S i n e a c o og b iA rc lu a v ri y odng 0 0,Ch na 2. e a t e f i; D p rm nto
F o ce c, c o l f oo ia S in ea dBitc n lg, in o et nv ri, in 0 0 3 Ch n ) o d S in e S h o lgcl ce c
n oe h oo o Bi y Be ig F rsr U ies y Be ig 1 0 8, ia j y t j
Abs r t tac:H PLC,p p r c o a o r p n Be t l pe top t m e r w e e r c m m e e st e ehod O asy t e on e 一 a e hr m t g a hy a d rheots cr ho o ty r e o nd d a hr e m t s t sa h c t ntof
A iouyi ai GA A eiigi o ti sntepe n t l Iwa se a HP C,s dl ue to, s es v n m n b tr c c d( B ) xsn f dma rli rs t rc t sent t L a a t no e a h e a ie h wie s me d wa sni ead y d h t ia c r t n B A n lss c u ae i GA a ay i.Pa rc r ao r p n rheo pe top t m er,a OTIIn m ehod O asy GA A,w e e e s f rGA - pe h om t g a hy a d Be t l ts cr ho o ty S C 1I o t T st sa B r ay o BA n l i r m o fs m pe n prci e a ayssfo al to a lsi a tc .M or o e,pa r c o ao r p y mi htbe u e O dee tt e G ABA on an d i f od m aeil evr pe hr m t g a h g s d t t c h c ti e n o t ras
l e fr e tt n b o h o s p g e t Be t eo p cr p o o t g tb mp o e O d t c BA xsi g i o d maeil wi i - i em n ai r t rl s im n . r l t e to h t mer mi h e e l y d t e e tGA k o e h s y e i n fo tr s t s t n a h r epl h m c lc p ii ec e i a om ost on.
K y wo d: A n b tr c GA A; L p p r ho tg ah; ete t p c o h tme y e rs一 mio u i ai B )HP C; a e r ma rp y B r l e t p oo t y c d( c o h os
r r
0引言 一
目前 .常用的 GABA的检测方法有高效液相色谱 法、效阴离子交换色谱一积分脉冲安培检测法、发高蒸光散射检测技术和薄层扫描法等。这些方法检测精度 虽很高 .大都需要昂贵的仪器 .使用维护繁琐。 但且故很难满足 GAB的日常分析需求。考虑到食品成分复 A
氨基丁酸 (- ( Am io u cai GAB )称氨 n b wn cd, A又
酪酸 .一种非蛋白质天然氨基酸,哺乳动物中枢是为神经系统一种重要的抑制性神经递质鉴于 f一氨基丁
酸具有降低血压、惊厥、防和治疗癫痫、善脑机抗预改能、化肝肾功能、进精子受精能力等多种功能, 活促近年来研究人员加大了对^一氨基丁酸检测及重要生理 v功能的研究….发天然 GABA产品及其功能性食品、开 保健品已成为现今食品及医药领域的研究热点之一。收稿日期: 0 8 0—1 2 0—5 0
杂以及不同食品 GAB A含量差别大等特点 .本文对高效液相色谱 ( L )改良纸层析法和 Bet eo比色法 HP C、 r lt h3适合食品中r种一氨基丁酸检测的方法进行了比较研 究 .在分析各方法的优点及局限性,便帮助研究旨以者根据自身需要来选择适宜的 GA BA ̄测方法 .满足 ,大量样品时 GA BA快速有效检测的需要
基金项目:国家高技术研究发展计划 (6计划 )高活性乳酸菌发酵剂 83“制造关键技术 (06 2 0AA1Z 4 )项目;国家科技基础条件 0 34”“平台”目 (05项 20 DKA 1 0— 2) 2 24 1。
1实验 11材料 .
作者简介:宏飞 (9 2,,赵 1 8一)男硕士研究生,要从事食品生物技术研主究工作通讯作者:柏林张
试剂:一氨基丁酸 ( 9,% ) L > 99,一谷氨酸 ( Gl L— u, AR> 9,苯二甲醛 ( A, 7,醇、氢呋喃 9%)邻 OP>9%)甲四 (谱纯 )正丁醇 (析纯 )冰乙酸 (色,分, AR )其他试剂,
化学,实验
测定方法 Iset nM e o s np c o t d i h均为国产分析纯
试剂
心分离 .清液经 04 1m滤膜过滤后用于测定 GA上 .5 x BA含量。 取上述 1 0 L ̄ 0 D m处理的各待测样品 .分别加入 x预 1 0 ̄的 OP l生剂,合 9 s取 2 L样 0 bL A ̄ i混 0后 0进132纸层析法检测 GABA ..
①米胚芽和糙米制品; Ga ao茶;戊糖乳杆② brn③菌发酵液:将戊糖乳杆菌 P( at aiu e t u该 即 L c bcl p no s o ls s P,菌株平台资源号:5 1 0 0 0 0 0 4 )按 1 1 1 C0 6 0 0 0 4,%接种量 接种于 M R S体培养基中 .7℃培养 1后获得的除 液 3 6h去细胞的发酵液 . 、 12 .仪器
( )理本方法是建立在纸色谱对物质高效分 1原
离以及 GA BA与茚三酮定量反应的基础上的 待有机 溶剂萃 l f ̄GABA后 .可利用分光光度计定量测定 GA—B A。
紫外可见分光光度汁 (析通用 )高效液相色谱普,分析检测仪 . UV2 0紫外可变波长检测器及其他辅 0型助设备13方法 .1 3. . 1 H PLC检测 GAB A
(检测方法。吸取 1 L品,样线距滤纸 2) 0样点 20c,品间距 20c . m样 . m将点样后的滤纸在展开剂中 展开 .风干显色后将与标准品位置一致的斑点剪下 .用洗脱液 ( z:醇 %= 8: )脱测定其吸光 硫酸 3 2洗
( )理 1原
其他多数氨基酸一样, AB G A没有紫
外或荧光吸收,难直接检测 .是,很 .但 GABA经衍生反
度值13 3 Be t eo比色法检测 GABA .. rh l t
应后会形成具有紫外或荧光吸收的物质 .此采用高因效液相色谱法与各种柱前衍生技术相结合可以精确测定微量的 GABA质量浓度迄今报道过的衍生化试
( )理。 r eo方法是利用苯酚和次氯酸钠与 1原 Bet lt h游离氨反应具有极高灵敏度的特点 .测定不同体系来中微量氨及其盐类的含量一般 .∞一氨基酸类反应灵 敏, (而一氨基酸类响应低。于 GAB对 A和常规氨基酸来
剂有很多种,常用的有
邻苯二甲醛 ( A) OP、丹酰氯( ny— ) 24 Da s l C1、,~二硝基氟苯 ( DNB) 2 4 F、,一二硝基氯
苯 ( DCB)异硫氰酸苯酯 ( I )氯甲酸芴甲酯 F、 P TC、 ( M O C)或 6 F一羟基喹啉基一N一羟基琥珀亚氨基甲酸酯 ( AQc I等
讲 .们在 Beteo反应中的灵敏性差别悬殊 . G 它 r lt h而 …… 此处隐藏:9957字,全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……
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