新疆医科大学教案首页(3)

常用的检查细菌是否对药物耐药的方法有定性测定的纸片扩散法定量测定的稀释法和E-实验法。对某种特定耐药菌株的检测除药物敏感试验外还要附加特殊的酶检测试验、基因检测等方法。 一）药物敏感试验

1、 K-B纸片琼脂扩散法 将含有定量抗菌药物的纸片贴在接种有测试菌的M-H琼脂平板上置35℃孵育16-18小时。用游标卡尺量取纸片周围透明抑菌环的直径，参照NC-CLS标准判断结果。按敏感、中度敏感、耐药报告。

2、稀释法 稀释法所测得的某些抗菌药物抑制检测菌肉眼可见生长的最低浓度称为最小抑制浓度，有肉汤稀释法和琼脂稀释法两类。

3、 E试验 是结合稀释法和扩散法原理和特点设计的一种操作简便、精确测定MIC

的一种方法。

二）耐药菌检测试验

1、 耐甲氧西林葡萄球菌的筛选测定 包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌，是目前导致医院感染的重要病原菌。此类葡萄球菌具有多重耐药性，即对全部?-内酰胺类抗菌药物，包括青霉素族和头孢菌素族以及临床常用的其他多种抗菌药物均耐药。

2、氨基糖苷类抗生素高耐药肠球菌的筛选测定 对多种抗菌药物包括氨基糖苷类呈固有耐药是肠球菌的特点， 故单用氨基糖苷类治疗肠球菌感染无效。

3、耐青霉素肺炎链球菌的筛选测定 为早期及时筛选此类肺炎链球菌可采用1ug苯唑青霉素纸片筛选法

4、?-内酰胺酶检测 ?-内酰胺酶能裂解青霉素族和头孢菌素族抗生素的基本结构?-内酰胺环，从而使其丧失抗菌活性。

5、超广谱?-内酰胺酶（ESBL）检测 ESBL的水解底物除一、二代头孢菌素外，对第三代头孢菌素以及氨曲南均有作用，它的检测可用微生物学、生物化学和分子生物学方法进行。

三）病原菌耐药基因的检测

细菌耐药基因的检测正由研究实验室走向临床试验室。 临床意义：1、有利于临床早期合理选药治疗

2、对病原菌的耐药性具有确证意义 3、比常规方法检测病原菌的耐药谱更准确 4、可作为考核其他耐药性检测方法的金标准。

第四节 临床感染常见病原体检查

感染性疾病指各种病原体寄生人体所引起的传染性感染疾病和非传染性疾病。

流行病学和临床类型 （一） 流行病学

感染性疾病的流行病学具有下述特点：

1、 2、 3、

疾病谱发生变迁

多重耐药菌株的出现，导致康感染治疗的困难

器官移植、抗肿瘤化疗和放疗的开展，降低了机体的免疫预防功能，造成医院感染及条件性致病菌感染的增加。

（二） 临床类型

可导致人类感染性疾病的病原体约五百种以上， 包括病毒、衣原体、立克次体、支原体、螺旋体、西军、真菌和寄生虫等。目前，细菌感染仍然是发病率较高的感染性疾

病，病原种类以革兰阴性条件致病菌、凝固酶阴性葡萄球菌、耐甲氧西林葡萄球菌和耐药的白色念珠菌为主。 二 监察项目和临床应用 （一）细菌感染

细菌感染性疾病的检查主要可以从三个方面着手：

1、 2、 3、

（二）病毒感染

病毒感染的实验室检查包括病毒分离与鉴定、病毒核酸与抗原的直接检出，以及特异性抗体的检测。 （三）真菌感染

真菌的微生物学诊断手段主要包括直接检查、培养检查、免疫学试验和动物试验，核酸杂交技术及PCR技术。 （四）其它病原体感染

1、支原体检测 支原体是一群介于细菌和病毒之间，可通过滤菌器、无细胞壁，能在无生命培养基中生长繁殖的最小原核微生物。

寄生于人泌尿生殖道，以特定的环境下能引起非淋球菌尿道炎，主要传播途径为性接触传播和母婴传播。

一、发病机制： Uu吸附宿主细胞后，可产生磷脂酶分解细胞膜中的磷脂，影响细胞合成，尿素酶分解尿素产氨，对细胞有毒性作用，特别是产生IgA蛋白酶，破坏尿生殖道粘膜表面的IgA的局部抗感染作用，利于Uu粘附于泌尿生殖粘膜表面而致病。 培养特性：营养要求高，需要供胆固酵和酵母以牛心浸液为基础，加小牛血清蛋白胨 NaCl 尿素，批示剂：酚红，抑制剂：青霉素抗生素，最适PH5.5～6.5，制成液体和固体培养基

分离与鉴定：取标本接种于酚红和尿素的液体培养基中37度孵育，24小时观察颜色

变化，由黄变红判为阳性。取液体培养物转种固体培养基、Co2环境下培养，两天后低倍镜下有典型“油煎蛋菌落或颗粒样桑椹样菌落”出现为阳性 生化反应：Uu分解尿素、不分解精氨酸和葡萄糖

2、螺旋体检测 螺旋体是一群细长、柔软、运动活泼、呈螺旋状的微生物。 常用检测法快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)：是改良VDRL试验原理未的活性炭颗

检测细菌或其抗原——主要包括直接涂片显微镜检查、培养、抗原检测和分析 检测抗体

检测细菌遗传物质——主要包括基因探针技术和PCR技术

粒吸附VDRL抗原，均通过玻片或.卡片凝集试验来检测病人血清中有无反应素存在。如存在即出现黑色凝集颗粒为阳性 【临床意义】

定性试验用于梅毒的筛选。

其阳性率是：感染梅毒螺旋体后1～2周为76％，

二期梅毒为 95％～ 100％，晚期梅毒为 70％～ 95％，隐性感染期为 70％～ 80％。

定性试验可出现假阳性反应，见于瘤型麻风病、疟疾、SLE、硬皮病、雅司热、回归热、血吸虫病、包虫病、支原体肺炎、传染性单核细胞增多症、结核病等。

3、立克次体检测 立克次体是一类严格细胞内寄生的原核细胞型微生物，在形态结构、化学组成及代谢方式等方面均与细菌类似。

常用检测法快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)：是改良VDRL试验原理未的活性炭颗粒吸附VDRL抗原，均通过玻片或.卡片凝集试验来检测病人血清中有无反应素存在。如存在即出现黑色凝集颗粒为阳性

4、衣原体检测 衣原体是不活动的专性细胞内寄生物，有化学上与戈兰阴性菌相似

的细胞壁，具有核糖体，可出现胞质内包涵体 常用免疫法法[检测原理]：

衣原体检测试剂盒（胶体金法）系用抗衣原体脂多糖单克隆抗体和羊抗鼠Ig G多克隆抗体分别固定于硝酸纤维素膜，并和胶体金标记的另一抗衣原体脂多糖单克隆抗体及其他试剂原料组成，应用胶体金免疫层析技术，采用双抗体夹心的形式建立的衣原体检测方法，用于女性宫颈和男性尿道口中衣原体的检测。

5、严重急性呼吸道综合症（SARS）病毒的检测 SARS俗称“非碘性肺炎”。SARS病毒属于正单链RNA病毒。 （五）实验结果分析和临床应用

各种试验诊断方法中，临床标本分离和培养的阳性结果最具有诊断价值。 病原体的抗原成分检测有助于早期诊断感染性疾病，阳性结果提示某种感染性病原体的存在，但对于那些存在正常菌群的标本，需考虑共同抗原引起的交叉反应，必须在设有严格对照试验和排除试验时，阳性结果才能做出正确诊断。

第五节 医院感染常见病原体检测

医院感染又称医院内感染或医院内获得性感染。医院感染伴随医院的出现而发生，其感染率有迅速增长之势。不仅增加了病人的发病和痛苦，死亡率上升，而且住院时间明显延长，费用增加，加重了病人和国家的经济负担，也影响了病床周转率。因此，医院感染已成为当今世界每个国家各级医院面临的突出问题。许多国家将医院感染率作为医院管理水平的重要指标。随着医药卫生事业的不断发展，了解现阶段医院感染发生的危险因素和引起感染的病原体等，探索研究医院感染的发生发展规律，提高医 …… 此处隐藏：2161字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……