2013届高考生物考点专题精讲精练试题8(3)

________，培养基灭菌采用的最适方法是________法。

(3)测定培养液中微生物数量，可选用________法直接计数；从微生物M分离提取的脂

肪酶通常需要检测________，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产成本，可利用________技术使脂肪酶能够重复使用。

(4)若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的________技术。

解析 (1)因为植物油不易挥发，不能选用蒸馏法，可以用压榨法、

萃取法从油料作物中提取。(2)微生物的生长需要水、碳源、氮源和无机盐等，选择培养基中添加的植物油为

微生物生长提供碳源。分析灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌等实验室常用灭菌方法

的特点可知，培养基灭菌采用的最适方法是高压蒸汽灭菌法。(3)测定培养液中微生物的

数量，可选用显微镜直接计数法直接计数。提取的脂肪酶在应用于实验或生产之前，要

先检测其活性，以确定其应用价值。固定化酶技术可以实现酶的反复利用，降低了生产

成本。(4)在应用PCR技术扩增DNA片段时，DNA合成(延伸)时温度要控制在72 ℃，

需要具有较强的耐热性的DNA聚合酶催化。

答案 (1)压榨 萃取(注：两空顺序无先后) (2)碳源 高压蒸汽灭

菌 (3)显微镜直接计数酶活性(或酶活力) 固定化酶(或固定化细胞) (4)PCR(或多聚酶链式反应，聚合酶链式反应)

8．(8分)(2010·重庆理综)炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传

染病。炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列，菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过实验确诊。 (1)细菌培养：采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落。 (2)细菌鉴定：实验流程如图所示

①对配制的液体培养基等需采取________方法灭菌；实验所用液体培养基的碳源为

________(填“无机碳”或“有机碳”)。

②挑选可疑菌落制片后，用________观察，可看到呈竹节状排列的杆菌。

③接种可疑菌后，35 ℃培养24 h，液体培养基变浑浊，原因是________________。对照

组试管中应加入________，与实验组同时培养6 h后，若实验组液体培养基的浑浊度比

对照组________(填“高”或“低”)，则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。

④对排除的疑似患者及易感人群，可接种炭疽杆菌疫苗，刺激机体产生相应抗体，与产

生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外，还有________。

解析 (2)①微生物的培养基配制后常用高压蒸汽法灭菌；由于炭

疽杆菌是异养型微生

物，培养基中应加有机碳作碳源。②炭疽杆菌呈竹节状排列，需借助显微镜观察。③接

种培养后，液体培养基由澄清变浑浊，应是炭疽杆菌大量繁殖的结果；实验组与对照组

的设臵应遵循单一变量原则和等量原则，实验组加入生理盐水配制的澄清噬菌体液，对

照组应加入等量的生理盐水；若疑似患者被炭疽杆菌感染，则培养6 h后，实验组中的

炭疽杆菌由于噬菌体侵染而大量裂解死亡，浑浊度会明显低于对照组。④接种疫苗后，

机体通过体液免疫产生抗体，与此相关的细胞有吞噬细胞、T细胞、B细胞和效应B(浆) 细胞。

答案 (2)①高压蒸汽(98kPa蒸汽) 有机碳 ②显微镜 ③细菌大

量繁殖 等量生理盐水低 ④吞噬细胞、效应B(浆)细胞

9．(8分)(2011·济南二模，34)生产实践中应用的菌种主要来自土壤，从土壤中分离微生物的实验流程如下：

土壤取样―→选择培养―→梯度稀释―→鉴别培养。 请回答下列有关问题：

(1)将土壤浸出液接种到特定培养基上，可以将酵母菌从混杂的微生物群体中分离出来，

获得纯种酵母菌，这一过程叫做________。在培养酵母菌的过程中，对培养基、接种环

常采用的灭菌方法分别是________________。

(2)在使用酵母菌发酵生产酒精的过程中，影响酵母菌酒精发酵的主要因素有_________，

常使用________的方法从发酵液中提取纯酒精。

(3)从土壤中分离纤维素分解菌，最好选择在________环境中采集土样，所选择的培养基

应以________作为唯一碳源。

(4)纤维素分解菌能够合成纤维素酶，为了使纤维素酶反复使用，可以对纤维素酶进行

________处理，处理的方法有吸附法、共价键结合法和________法。

解析 (1)在微生物培养过程中，培养基常用高压蒸汽灭菌，接种

环常用灼烧灭菌。(2)

温度、pH影响酶的活性，氧气浓度影响发酵产物。因酒精沸点较低，故可用蒸馏法对酒

精进行提纯。(3)纤维素分解菌生活在富含纤维素的环境中，分离所用的培养基应以纤维

素作为唯一碳源，以抑制以其他有机碳为碳源的菌类生长。(4)对酶进行固定化处理可以

使酶重复使用，提高利用率。

答案 (1)纯培养 高压蒸汽灭菌、灼烧 (2)温度、pH、氧气浓度

等 蒸馏 (3)富含纤

维素的 纤维素 (4)固定化 包埋

10．(12分)自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。步骤如下： (1)制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。 (2)为了得到更加准确的结果，你选用________________(平板划线法、稀释混合平板法、

稀释涂布平板法)接种样品。 (3)适宜温度下培养。 结果分析：

①测定大肠杆菌数时，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正 确可信的是

( )。

A．一个平板，统计的菌落数是23

B．两个平板，统计的菌落数是22和26，取平均值24 C．三个平板，统计的菌落数分别是21、5和52，取平均值26 D．四个平板，统计的菌落数分别是21、30、24和25，取平均值25

②一同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4，那么每毫升

样品中的大肠杆菌数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2 mL)________。

③用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得的数量________，因为________________

________________________________________________________。

④某同学在测定大肠杆菌的密度时发现，在培养基上还有其他杂菌的菌落，能否据此肯

定该大肠杆菌的品系被污染了？为什么？______________________________________。

解析 平板划线分离法是指由接种环以无菌操作蘸取少许待分离

的材料，在无菌平板表