生物化学复习重点 - 图文
第二章 蛋白质
1、凯氏定氮法:蛋白质含量=总含氮量-无机含氮量)×6.25
例如:100%的蛋白质中含N量为16%,则含N量8%的蛋白质含量为50% 100% /xg=16% /1g x=6.25g
2、根据R基的化学结构,可将氨基酸分为脂肪族氨基酸、芳香族氨基酸、杂环氨基酸和杂环亚氨基酸。
按照R基的极性,可分为非极性R基氨基酸、不带电荷的极性R基氨基酸、极性带负电荷的R基氨基酸、极性带正电荷的氨基酸。 类别 非极性 极性不带电荷 氨基酸名称 丙氨酸 缬氨酸 亮氨酸 异亮氨酸 苯丙氨酸 缩写符号 简写符号 Ala Val Leu Ile Phe A V L I F M P W G S T N Q Y C D E H K R Met 甲硫氨酸(蛋氨酸) 脯氨酸 色氨酸 甘氨酸 丝氨酸 苏氨酸 天冬酰胺 谷氨酰胺 酪氨酸 半胱氨酸 Pro Trp Gly Ser Thr Asn Gln Tyr Cys Asp Glu His Lys Arg 极性带负电荷天冬氨酸 (酸性氨基酸) 谷氨酸 极性带正电荷组氨酸 (碱性氨基酸) 赖氨酸 精氨酸 3、氨基酸的重要理化性质 (1)一般物理性质
无色晶体,熔点极高(200℃以上),不同味道;水中溶解度差别较大(极性和非极性),不溶于有机溶剂。氨基酸是两性电解质。 氨基酸等电点的确定:
酸碱确定,根据pK值(该基团在此pH一半解离)计算: 等电点等于两性离子两侧pK值的算术平均数。
(2) 化学性质
①与水合茚三酮的反应:Pro产生黄色物质,其它为蓝紫色。在570nm(蓝紫色)或440nm(黄色)定量测定(几μg)。
②与甲醛的反应:氨基酸的甲醛滴定法
③与2,4-二硝基氟苯(DNFB)的反应:形成黄色的DNP-氨基酸,用来鉴定多肽或蛋白质的N端氨基酸,又称Sanger法。或使用5-二甲氨基萘磺酰氯(DNS-Cl,又称丹磺酰氯)也可测定蛋白质N端氨基酸。
④与异硫氰酸苯酯(PITC)的反应:多肽链N端氨基酸的α-氨基也可与PITC反应,生成PTC-蛋白质,用来测定N端的氨基酸。 4、肽的结构
线性肽链,书写时规定N端放在左边,C端放在右边,用连字符将氨基酸的三字符号从N端到C端连接起来,如Ser-Gly-Tyr-Ala-Leu。命名时从N端开始,连续读出氨基酸残基的名称,除C端氨基酸外,其他氨基酸残基的名称均将“酸”改为“酰”,如丝氨酰甘氨酰酪氨酰丙氨酰亮氨酸。若只知道氨基酸的组成而不清楚氨基酸序列时,可将氨基酸组成写在括号中,并以逗号隔开,如(Ala,Cys2,Gly),表明此肽有一个Ala、两个Cys和一个Gly组成,但氨基酸序列不清楚。
由于C-N键有部分双键的性质,不能旋转,使相关的6个原子处于同一个平面,称作肽平面或酰胺平面。 5、、蛋白质的结构
(一)蛋白质的一级结构(化学结构)
一级结构中包含的共价键主要指肽键和二硫键。 (二)蛋白质的二级结构 (1)α-螺旋(如毛发)
结构要点:螺旋的每圈有3.6个氨基酸,螺旋间距离为0.54nm,每个残基沿轴旋转100°。 (2)β-折叠结构(如蚕丝) (3)β-转角 (4)β-凸起 (5)无规卷曲
(三)蛋白质的三级结构(如肌红蛋白) (四)蛋白质的司机结构(如血红蛋白) 6、蛋白质分子中氨基酸序列的测定 氨基酸组成的分析:
? 酸水解:破坏Trp,使Gln变成Glu, Asn变成Asp ? 碱水解:Trp保持完整,其余氨基酸均受到破坏。 N-末端残基的鉴定:
鉴定N-末端的氨基酸残基常用2,4-二硝基氟苯(DNFB)的反应或丹磺酰氯反应。异硫氰酸苯酯(PITC)反应也可用于鉴定N-末端的氨基酸残基,但主要是用于测定肽段的氨基酸序列。
C-末端残基的鉴定:
? 肼解法:蛋白质或多肽与无水肼加热发生肼解,反应中只有C端氨基酸以游离形式
存在。 ? 还原法:肽链C端氨基酸可用硼化锂还原成相应的α-氨基醇,可用层析法加以鉴别。 ? 羧肽酶法:羧肽酶从羧基端(C端)一个一个切。 多肽链的裂解:
酶切位点或作用特点:
? 胰蛋白酶:Lys, Arg的C侧 ? 糜蛋白酶(胰凝乳蛋白酶):Phe, Tyr, Trp的C侧 ? 梭菌蛋白酶:Arg的C侧
? 葡萄球菌蛋白酶:Asp或Glu的C侧 ? 嗜热菌蛋白酶:Leu, Ile, Val的N侧 ? 氨肽酶:从氨基端(N端)一个一个切 ? 溴化氰(CNBr): Met的C端 ? 羟胺:Asp的C侧,Gly的N侧
7、蛋白质的沉淀反应:加高浓度盐类;加有机溶剂;加重金属盐类;加某些酸类;加热。 8、氨基酸的颜色反应
第三章 核酸
1、核苷酸由含氮碱基(嘌呤或嘧啶),戊糖(核糖或脱氧核糖)和磷酸组成。核酸是核苷酸的多聚物,其连接键是3’,5’-磷酸二酯键。
2、生物体内的AMP(腺苷酸)可与一分子磷酸结合,生成ADP(腺苷二磷酸),ADP再与一分子磷酸结合,生成腺苷三磷酸(ATP)。各种核苷三磷酸(ATP、GTP、CTP和UTP)是体内RNA合成的直接原料,各种脱氧核苷三磷酸(dATP、dGTP、dCTP、dTTP)是DNA合成的直接原料。
在体内能量代谢中的作用: ATP—能量“货币”
UTP—参加糖的互相转化与合成 CTP—参加磷脂的合成
GTP—参加蛋白质和嘌呤的合成 第二信使—cAMP(3’,5’-环状腺苷酸) 3、核苷酸的性质: (一)一般理化性质:①为两性电解质,通常表现为酸性;②DNA为白色纤维状固体,RNA为白色粉末,不溶于有机溶剂;③DNA溶液的粘度极高,而RNA溶液要小得多;④RNA能在室温条件下被稀碱水解而DNA对碱稳定;⑤利用核糖和脱氧核糖不同的显色反应鉴定DNA与RNA。
(二)核酸的紫外吸收性质:核酸的碱基具有共轭双键,因而有紫外吸收性质,吸收峰在260nm(蛋白质的紫外吸收峰在280nm)。 增色效应;减色效应。
核酸结构的稳定性:碱基对间的氢键;碱基堆积力;环境中的正离子。
核酸的变性:将紫外吸收的增加量达到最大增量一半时的温度称熔解温度(Tm)。 核酸的复性:Tm-25C 4、双螺旋结构模型要点
(1)两条多核苷酸链反向平行。
(2)碱基内侧,A与T、G与C配对,分别形成3和2个氢键。
(3)双螺旋每转一周有10个(bp)碱基对,每转的高度(螺距)为3.4nm,直径为2nm。
5、双螺旋结构的稳定因素 (1)氢键(太弱);(2)碱基堆积力是稳定DNA最重要的因素;(3)离子键(减少双链间的静电斥力)。
6、DNA的三级结构
线形分子、双链环状(dcDNA)→超螺旋
7、tRNA主要作用是转运氨基酸用于合成蛋白质。
RNAi(RNA干扰)用双链RNA抑制特定基因表达的技术称RNA干扰。 snRNA(核小RNA)主要存于细胞核中,占细胞RNA总量的0.1~1%,与蛋白质以RNP(核糖核酸蛋白)的形式存在,在hnRNA和rRNA的加工、细胞分裂和分化、协助细胞内物质运输、构成染色质等方面有重要作用。
第四章 糖类
1、还原糖是指具有还原性的糖类。在糖类中,分子中含有游离醛基或酮基的单糖和含有游离醛基的而糖都具有还原性。还原性糖包括葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麦芽糖等。 2、在多羟基醛或多羟基酮中,有些羟基上的氢原子可以和酮基(羰基)发生加成反应,这样会生成一个羟基,这就是半缩醛羟基。 3、如果没有半缩醛羟基就没有还原性。
4、单糖分船式构象和椅式构象。常见单糖衍生物有糖醇、糖醛酸、氨基糖及糖苷等。 5、多糖没有还原性和变旋现象。多糖的结构包括单糖的组成、糖苷键的类型、单糖的排列顺序3个基本结构因素。代表物有: ? 淀粉:
淀粉与碘的呈色反应与淀粉糖苷链的长度有关 …… 此处隐藏:1576字,全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……
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