外周血细胞形态学检验及技巧报告(2)

污染涂片。

四．血液学及血细胞形态学内容及自身特点：

（一）血常规检查（ Hb 、 RBC 、 WBC 、 Plt 、血细胞比积、 RBC-MCV 、 MCH 、 MCHC 及血小板容积曲线），用自动化仪器提高工作效率，为使结果准确可靠，必须建立监测方法，搞好质控，此属数值质控。我国已较普遍开展全国、省、市（地区）质控。但普遍存在应付质 控质量 的问题，并未能切实解决自身质控问题。

（二）白细胞分类：白细胞分类的自动化已普遍应用，只能为患者普查与筛选之用。遇有问题应用显微镜观察，弥补自动化仪器缺陷。一般医院显微镜档次偏低，分辨率低，正确使用和维修欠缺，因而要更好地发挥光镜的观察效应。

（三）骨髓、外周血细胞形态学及分类，是血液病及临床各科患者基本检查及诊断依据。反映继发性疾病的血液学表现，了解机体状况、感染（细菌、病毒、寄生虫等）等改变。

（四）血细胞涂片自身的特点：

1 ．涂片不易均匀：由于血液是混悬液，其中白细胞、有核细胞、 RBC 、血小板的形态大小、比重及生物活性和血浆成分等的不同和制片技术差异、质量分布不均匀性差异颇大。

2 ．细胞分布和检查的非随机性：

作者：198585912005-5-27 19:51 回复此发言

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4 外周血细胞形态学检验及技巧

(1) 细胞分类标准与观念不一；

(2) 采样和计数 100~200 个白细胞的局限性；

(3) 细胞分布的生理变动；

3. 与疾病的相关性；

4. 室内、室间分类不一致性，开展室间质控也是促进形态学提高重要手段。

（五）血细胞形态学（外周血及骨髓）质控：自 1983 年以来，澳大利亚皇家病理学质控中心和英国皇家进修学院 WHO 质控中心及最近美国洛杉矶质控中心，国内：全国及省地市也普遍开展，由质控标本涂片发展图片指定细胞识别。

五．血细胞形态学采样、制片染色与检查要求：

( 一 ) 采样、制片及染色，三道工序至关重要，是细胞形态学检查的成败关键。要得到合格的涂片标本，做好上述工序，应注意以下要求：

1. 采样、制片：

(1) 玻 片要求：国内 1.0mm × 26mm × 76mm ± 0.5 ，美国 NCCLS 规定 1.0mm × 25mm × 75mm ± 0.5 ，要严格清洁，接近中性 .

(2) 推片：选择优质推片， 推片两端 边缘整齐、平滑。也可选用有机玻璃，其大小、厚度 与坡片相同 ，两端之边缘 应加工 光滑， 以利推片用 。 (3) 采外周 血（样），擦去第一滴血，迅速采血，量适中，如绿豆粒大小，具有 一定推片技术 ， 推片倾斜 45 °±，推成血膜长度 25mm ～ 35mm ，宽度 18 ～ 20mm ，血膜四周留有空隙区，血膜 终尾离玻 片终端至少 10mm ，血膜均匀，薄如蝉翼，尾端形如弧状，迅速扇（摇）干，血膜具有头、体、 尾不同 厚薄区域。此外，涂片时，还要考虑患者的血液状态，如贫血程度、血液粘稠度、 WBC 或有核细胞多少等因素， 调整推片技巧 。

(4) 如若采用静脉血推片，用 K 3 -EDTA 或肝素抗凝， 推制血 片应尽早进行（最迟在 1 ～ 2 小时内）。

（二）染色：是识别细胞形态的重要标记工序：

常规瑞氏 - 姬姆萨染色要点：

1 ．要得到满意、漂亮的血细胞染色标本，新鲜涂片迅速染色是很重要的。

2 ．染色液配制要合格；

3 ．涂片切勿用甲醛固定，否则不着色；

4 ．染色的好坏与染色液、缓冲液的质量及比例、加液间隔时间、保持 玻 片染色液面的张力等染色技巧均有重大关系。染液要覆盖涂膜面，再加缓冲液（ 1:2 ），其量要充足、混均，染色时间要 30 分钟以上。

5 ． 细胞着色的观察：

(1) 当染液与缓冲液混合后，甲醛吸水液温升高，发生剧烈反应，直至液膜表面的“染色粒”呈均匀分布，随染色时间的推延，“染色粒”由“染色小粒”聚集成“染色大粒”，逐渐由外缘向内缘推进至 染色面 中心（此过程需要 20-30 分钟以上），则表明细胞着色已完成，

(2) 再用自来水缓流冲洗，使染色液沉渣及染色粒浮去，使其充分起分色作用，去除细胞染色中浮色，显示出胞核结构及细胞清晰形态，待干，镜检。

六．外周血细胞形态检查技巧：

外周血中三种血细胞数与形态学表现是：

● 反映骨髓造血状态及血液病和其他疾病的 厨窗 ；

● 是检查与观察疾病的重要指标；

（一） WBC 形态学诊断技巧：

1 ． WBC 数值准确性估计：

（ 1 ）目前自动化计数仪时有出现结果的偏差，低倍镜观察血涂片可以粗略估计 WBC 数值及分布。低倍视野 WBC 数：正常约 3~5 个，增多 6 个以上，减低 3 个以下。

（ 2 ） WBC 如推至片尾，分布不均，估计将有一定难度。较大的细胞如单核、异淋及中性粒细胞及不成熟细胞多在片尾，体部则多为较小的淋巴细胞，使分类造成偏差，所以分类部位在适当调整。

2 ． 白细胞计数值限度分级：

（ 1 ） WBC 正常范围： 4.0~10.0 × 10 9 /L;

（ 2 ） WBC 正常限度以下 :

● 轻度减少 (<4.0 ～ 3.0 × 10 9 /L),

● 中度减少 (<3.0 ～ 2.0 × 10 9 /L),

● 极度减少 (<2.0 × 10 9 /L);

作者：198585912005-5-27 19:51 回复此发言

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5 外周血细胞形态学检验及技巧

（ 3 ） WBC 正常高限度以上 :

● 分轻度增多 (>10.0 ～ 20.0 × 10 9 /L),

● 中度增多 (>20.0 ～ 40.0 × 10 9 /L),

● 明显增多 (>40.0 ～ 80.0 × 10 9 /L)

● 极度增多 (>80.0 × 10 9 /L) 。

以此与所测知 WBC 计数值作粗略对比，推断 WBC 计数值的准确性。

（ 4 ）如在血片分类计数过程中发现较多有核红细胞时，

● 计出血片中有核红所占 % 率，即以校正原 WBC 计数值减去有核红所占比例，求出外周血中 WBC 总数值，

● 另作 WBC 分类计 100 个过程中遇到多少有核红细胞，即有核红细胞 个 /100 个 WBC ，

● 或作血片有核细胞分类计数（包括有核红细胞），计出有核红细胞所占 % 率。

3 ． WBC 分类正常范围及其病理性改变：

（ 1 ） WBC 分类正常范围：

● 新生儿出生后最初 24 小时白细胞数高，主要为中性粒细胞 , 至第 3 ～ 4 周，中性粒细胞与淋巴细胞比例倒转，直至 4 岁淋巴细胞比例仍多。表 1

● 白细胞分类正常范围由于民族、地区、年龄、性别及其生理性变化的影响，以及检查本身的技术差异，即使一人同次取材不同涂片、一张涂片多次分类计数结果也不可能完全一致，但不可差异太大。

● 分类中占大比例的中性粒细胞或淋巴细胞呈正态分布，占小比例的嗜酸 / 嗜碱性粒细胞及单核细胞则为 Poisson 分布。

（ 2 ） 病理性形态学改变：

①中性粒细胞 …… 此处隐藏：2619字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……