细 胞 生 物 学 实验课程教案(1)
细 胞 生 物 学 实验课程教案(1)
实验内容与实施过程 备 注1.血涂片的制备与血细胞的观察 (50 分钟) : 采血前用 70%酒精棉球消毒人的指
腹→采血→推片:挤出第二滴血置于载玻片的右侧→再取另一张边缘光滑的双凹 片,斜置于血滴的前缘,先向后稍移动轻轻触及血滴,使血液沿玻片端展开成线 状→两玻片的角度以 30~45°为宜,轻轻将双凹片向前匀速推进,即涂成血液薄膜 →染色:用天平称取去皮的土豆块茎 2g+10mlPBS 缓冲液,浸泡 2h→粗提液中含 有可溶性土豆凝集素。 2. 显微测微尺的使用(35 分钟) :以无菌方法抽取鸡血注射器中抽取 3.8%柠檬酸钠 1ml 抽取鸡静脉血液 2ml,用生理盐水洗 5 次,每次 2000r/min,离心 5min,最后 按压积红细胞体积用生理盐水配成 2%红细胞液。 3.细胞的观察与讨论(50 分钟) :淋巴细胞、白细胞、中性粒细胞、碱性粒细胞和酸 性粒细胞 4、实验小结(15 分钟) :总结实验过程中学生的操作是否规范;实验是否成功,如 果不成功,问题出在哪里;哪些实验作得比较好。提醒预习下节课实验内容,提问。 共 150 分钟。
实验作业 参考资料 (含参考文献、 期刊、杂志等)
1.绘制各种不同类型的血细胞,并说明它们的主要作用? 2.任选 20 个红细胞,测量其直径,并计算出平均值. 。
对于涂片的厚度一定要掌握,不然太厚不方便观察细胞,对于 实验总结 各种白细胞的染色一定要把握好,适度的染色可容易的区分开五 种白细胞,并进行大小的测量和绘图。
细 胞 生 物 学 实验课程教案(2)
实验内容与实施过程 备 注凝集 素是一类 含糖、并 能与糖专 一结合的 蛋白质,被 1. 脂类显示(65 分钟):用猪肝切片和花生的超薄切片,学习掌握使用冰冻切片机 的操作技术,获得理想的切片; 2. 细胞中 DNA 和 RNA 的显示(70 分钟):材料选用猪肝印片,学习如何制备肝印片 的片子,而后进行固定、浸洗、染色等即可显示二者在细胞中的分布。 3、实验小结(15 分钟) :总结实验过程中学生的操作是否规范;实验是否成功,如 认为与糖 的运输、 储存物质 的积累、 细胞间的 互作以及
细胞分裂 果不成功,问题出在哪里;哪些实验作得比较好。提醒预习下节课实验内容,提问。 的调控有 共 150 分钟。 关。
实验作业 参考资料 (含参考文献、 期刊、杂志等) 实验总结
细胞中脂类和核酸显示的原理是什么?
植物材料两种化学成分的显示结果都比较好,但是猪肝的效果较差, 这可能与切片的厚度有很大的关系,猪肝组织柔软不像花生子叶好切。
细 胞 生 物 学 实验课程教案(3)
凝集 1.凝集素粗提液制备(50 分钟) :用天平称取去皮的土豆块茎 2g+10mlPBS 缓冲液, 素是一类 含糖、并 浸泡 2h→粗提液中含有可溶性土豆凝集素。 能与糖专 2.鸡红细胞悬液制
备(35 分钟) :以无菌方法抽取鸡血注射器中抽取 3.8%柠檬酸钠 一结合的 1ml 抽取鸡静脉血液 2ml,用生理盐水洗 5 次,每次 2000r/min,离心 5min,最后 按压积红细胞体积用生理盐水配成 2%红细胞液。 3.细胞凝集反应现象的观察与讨论(50 分钟) :用滴管吸取土豆凝集素和 2%红细胞 液各一滴,置载玻片上,充分混匀,静置 20min 后于低倍显微镜下观察血球凝集 现象。 本实验过程很简单, 只需要将植物凝集素与红细胞混合后用低倍显微镜观察现象 即可。 具体如下: 实验组 对照组 凝集素 1 滴 PBS 液 1 滴 红细胞悬液 1 滴 红细胞悬液 1 滴 蛋白质,被 认为与糖 的运输、 储存物质 的积累、 细胞间的 互作以及 细胞分裂 的调控有 关。
4、实验小结(15 分钟) :总结实验过程中学生的操作是否规范;实验是否成功,如 果不成功,问题出在哪里;哪些实验作得比较好。提醒预习下节课实验内容,提问。 共 150 分钟。
实验作业 参考资料 (含参考文献、 期刊、杂志等)
1.细胞间凝集的原理是什么? 2.简图表示血细胞凝集原理。
1.为什么对照组有 PBS 液作对照呢?没什么巧, 因为凝集素中本身含 PBS 缓冲
实验总结
液,当含本身凝集素是不含 PBS 的,只是因为本实验中凝集素的提取时用到了 PBS. 2.那么红细胞悬液是怎么制备的呢? 其实也不难,无菌抽取动物静脉血液,当然血液抽出来后肯定要先加抗凝 剂了,然后再加生理盐水。那么怎么从血液中将红细胞分离出来呢?想想,血 液中有血清、红细胞、白细胞和血小板,按道理来讲红细胞应该最重吧(有待查 证),用离心机在 2000r/min 下离心 5min,去掉上清液,得到的应该就是红细胞 了,再加适量生理盐水洗涤几次后,加一定量是(按压积红细胞体积算)生理盐水 即可配成相应浓度的红细胞悬液了。 除了土豆中有凝集素外,还有韭菜叶片也有。 凝集素使细胞凝集是因为它与细胞表面的糖分子连接,在细胞间形成“桥”的 结果,加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞发生凝集。大多数凝集素存在于储藏 器官中,作为一种氮源; 对某些植物而言,受到危害时,凝集素作为一种防御蛋白发 挥作用。
细 胞 生 物 学 实验课程教案(4)
将观察到的现象列入下表,对实验结果进行比较和分析。 附表:不同低渗溶液下的溶血现象。
试管编号
是否溶 血
时间
结果分析
1.10ml 氯化钠+1ml 稀释羊 血 2.10ml 氯化铵+1ml 稀释羊 血 3.10ml 醋酸铵+1ml 稀释羊
实验作业
血 4.10ml 硝酸钠+1ml 稀释羊 血 5.10ml 草酸铵+1ml 稀释羊 血 6.10ml 硫酸钠+1ml 稀释羊 血 7.10ml 葡萄糖+1ml 稀释羊 血 8.10ml 甘油+1ml 稀释羊血 9.10ml 乙醇+1ml 稀释羊血 10.10ml 丙酮+1ml 稀释羊血
参考资料 (含参考文献、 期刊、杂志等)溶血时间及现象的观察比较困难,可采用离心辅助的方法来判别鸡血 在哪些等渗液中最易溶血,哪些较慢,做一些定性的分析。经过离心之后,
实验总结若上清液无色,证明在这个时间段血细胞没发生溶血,若上清液略红,证 明有溶血发生。当然这个方法不很精确,但却快速、便于观察。
细 胞 生 物 学 实验课程教案(5)
1.人口腔粘膜上皮细胞线粒体的超活染色与观察 清洁载玻片放在 37℃恒温水浴锅的金属板上 ↓ 滴 2 滴 1/5000 詹纳斯绿 B 染液 ↓ 用牙签口腔颊粘膜处稍用力刮取上皮细胞 ↓ 刮下的粘液状物放大载玻片的染液滴中 ↓
染色 10-l5min(注意不可使染液干燥,必要时可再加滴染液) ↓ 盖上盖玻片,显微镜下观察 2. 植物细胞液泡系的超活染色与观察 取小麦种子发芽的根尖 10min。 用刀片纵切根尖 放入中性红染液滴中,染色 5~ 盖上盖玻片进行镜检(镊子轻轻地下
吸去染液,滴一滴 Ringer 液
压盖玻片,使根尖压扁,利于观察)
实验结果: 在高倍镜下,先观察根尖部分的生长点的细胞,可见细胞质中散在很多大小不等 的染成玫瑰红色的圆形小泡,这是初生的幼小液泡。然后,由生长点向延长区观察, 在一些已分化长大的细胞内,液泡的染色较浅,体积增大,数目变少。在成熟区细胞 中,一般只有一个淡红色的巨大液泡,占据细胞的绝大部分,将细胞核挤到细胞一侧 贴近细胞壁处。
(1)绘口腔上皮细胞示线粒体的形态与分布
实验作业(2)绘小麦根尖细胞示液泡的形态与分布
参考资料 (含参考文献、 期刊、杂志等)
人口腔上皮细胞的线粒体的超活染色与观察效果很好,但是洋葱 表皮细胞和小麦根尖细胞的染色效果不是很理想。
实验总结
细 胞 生 物 学 实验课程教案(6)
(一)叶绿体的分离与观 …… 此处隐藏:2656字,全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……
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