2013届高考生物一轮复习课件：选修1 第5讲 DNA和蛋白质技术

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一、DNA的粗提取和鉴定 1.DNA的粗提取原理 (1)根据DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同 浓度的NaCl溶液中溶解度不同。如图表示DNA在NaCl

溶液中的溶解度随着NaCl溶液浓度变化而变化的曲线。 (2)根据DNA 不溶于酒精溶液 ，可用95%的冷酒精析出DNA。 (3)根据DNA对 酶、高温和洗涤剂 的耐受性。

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2.DNA的提纯

(1)方案一：利用DNA在 不同浓度的NaCl溶液中溶解度 不同的原理，通过控制NaCl溶液的浓度除去杂质。 (2)方案二：直接在DNA滤液中加入 嫩肉粉 木瓜蛋白酶 能够分解蛋白质。 ,其中的

(3)方案三：将DNA滤液放在 60~75℃ 的恒温水浴箱中 保温10~15 min。

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3.DNA的鉴定 (1)所用试剂： 二苯胺试剂 。 (2)处理方法：将试剂与DNA溶液混合后 沸水加热 5 min。 (3)现象：溶液颜色变 蓝 。

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二、多聚酶链式反应扩增DNA片段 (1)PCR原理：DNA的热变性 。

DNA缓慢

冷却

,分离的DNA链又重新结合成双

链DNA

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(2)PCR的反应过程： ①变性：当温度上升到 90℃ 以上时，双链DNA解聚 为 单链 。 ②复性：温度下降到50℃左右时，两种 引物 通过碱基

互补配对与两条单链DNA结合。③延伸：温度上升到 72℃ 左右时，溶液中的4种脱氧 核苷酸(A,T,C,G)在 DNA聚合酶 的作用下，根据 碱基互补配对原则合成新的DNA链。

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④PCR反应的结果：

DNA聚合酶只能特异地复制 处于两个引物之间 的DNA序列，使这段固定长度的序列呈 指数 扩增。

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三、血红蛋白的提取和分离实验 1.凝胶色谱法的原理 凝胶色谱法(也称分配色谱法)是根据 相对分子质量大小

将不同分子分离开来，即： 相对分子质量较小 的蛋白质容易进入凝胶内部通道，路程较长，移动速度 较慢 ； 而 大分子 蛋白质不能进入凝胶内部，则移动速度 较快 ，从而使相对分子质量不同的蛋白质得以分离。

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2.血红蛋白分离实验操作

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考点一

DNA的粗提取与鉴定

本部分在高考中所占的分值不大，近三年来的考情 考查有下降的趋势。命题以简答题的形式为主，考 查点着重于DNA粗提取的原理及操作步骤，关于 DNA在不同浓度NaCl溶液中的溶解与析出，DNA的 鉴定，还将是今后高考的热点之一。

解读

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[做一题]

[例1] 回答下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的问题。

(1)下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验原理的叙述正确的是 ( )

A.DNA在NaCl溶液中的溶解度，随NaCl溶液浓度的降 低而减小 B.利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒

精的物质而得到较纯的DNAC.DNA是大分子有机物，不溶于水而易溶于有机溶剂 D.在沸水中，DNA遇二苯胺会出现紫色反应

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(2)由于鸡血较难找到，某学生试图用人血代替，结果没有成功，其原因

最可能是 ( )

A.操作方法不对C.NaCl溶液浓度太高

B.人血含DNA太少D.加二苯胺太少

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(3)下图为该实验过程中的一些重要操作示意图：

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①正确的操作顺序是________________________。 ②上图C、E步骤都加入蒸馏水，但其目的不同，分别

是________________和________________。③上图A步骤中所用酒精必须是经过________才能使用， 该步骤的目的是________。 ④为鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA,可滴 加________试剂，沸水浴，如果出现________则该丝状

物的主要成分为DNA。