BCA蛋白质定量试剂盒说明书

天根试剂盒,用于测蛋白质浓度大小!

产品简介：

BCA蛋白质定量试剂盒(BCA Protein Assay Kit)是根据目前世界上最常用 的两种蛋白浓度检测方法中的BCA（bicinchoninic acid）法研制而成，实现了 对蛋白质进行快速、稳定、灵敏的浓度测定。本试剂盒的原理是蛋白质分子中 的肽键结构在碱性环境下能与Cu2+生成络合物，并将Cu2+还原成Cu+，而BCA 试剂可敏感特异地与Cu+结合，形成稳定的有颜色的复合物，并在562nm 处

有最大光吸收值，该复合物颜色深浅与蛋白质浓度成正比，可根据吸收值的大

小来测定蛋白质的含量。

1小时内即可完成蛋白质定量检测。本试剂盒含有牛血清白蛋白（BSA） 溶液作为蛋白质标准溶液，测定范围为20～2000 ug/ml。

操作步骤：

1. 标准品的稀释：用与样品相同缓冲体系的稀释剂按下表对BSA标准品进

行稀释：

BSA标准浓度配制表

管号 稀释剂体积 BSA体积（来源） BSA终浓度（ug/ml）

A 0 ul 300 ul（母液） 2000

B 125 ul 375 ul（母液） 1500

C 325 ul 325 ul（母液） 1000

D 175 ul 175 ul（B管） 750

E 325 ul 325 ul（C管） 500

F 325 ul 325 ul（E管） 250

G 325 ul 325 ul（F管） 125

H 400 ul 100 ul（G管） 25

I 400 ul 0 0（空白对照）

技术支持：010-59822661/2665 http://www.77cn.com.cn 2. 配制BCA工作液：依据样品数量，将试剂A和试剂B按体积比50∶1

配制适量BCA工作液，并充分混匀。 注：配制BCA工作液前请将试剂A摇晃混匀 3. 标准比色杯测定方法：

1） 吸取0.1ml的每种标准品和待测样品置于合适的管中。 2） 加入2.0ml的BCA工作液, 彻底混匀。

3） 加盖，37℃孵育30min后冷却至室温或室温放置2h。 4） 用紫外分光光度计于562nm处检测其吸光度。 5） 根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。 4. 微管测定方法：

1） 分别取25ul表格中新鲜配制的BSA标准液和待测样品，加入到96孔板中。

2） 每孔中加入200ul BCA工作液，并充分混匀。 3） 加盖，37℃孵育30min后冷却至室温或室温放置2h。 4） 用紫外分光光度计于562nm处检测其吸光度。 5） 根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。

注意事项：

1. 测值范围：OD540～OD590nm,分别测定了OD540，OD562以及OD590nm

的吸收值，标准曲线均为线性, OD562测值最高。 2. 标准曲线的线性范围为20～2000 ug/ml。 3. 工作液配制之后24h内使用对标准曲线无影响。

订货电话：010-59822688 http://www.77cn.com.cn

天根试剂盒,用于测蛋白质浓度大小!

适用范围：

本检测方法可耐受的干扰物质浓度表：

干扰物质 耐受浓度 干扰物质 耐受浓度盐/缓冲液 去垢剂 HEPES (pH7.9) 100mM NP 40 5.0% PIPES(pH6.8) 100mM TRITON X-100 4% NaCl 1M SDS 4% HCl 100mM TWEEN20

4%

NaOH

100mM 混合物&极性化合物

Sodium citrate 100mM PMSF 1mM TRICINE(pH8.0) 20mM Acetone 10% Sodium Acetate 200mM Ethanol 10% Guanidine.HCl 4M Glycerol 10% Tris

50mM Urea 3M 螯合剂

DMSO 10% EDTA

10mM Sucrose

40% 还原剂

DTT

0.2mM

本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。

TIANGEN BIOTECH (BEIJING) CO., LTD. Order: 010-59822688

Technical: 010-59822661/2665 Toll-free: 800-990-6057

版本号: PT100406

BCA Protein Assay Kit

BCA蛋白质定量试剂盒

目录号：PA115

试剂盒内容：

试剂盒组成 PA115-01* PA115-02** BCA试剂A 100 ml 500 ml BCA试剂B

3 ml

15 ml BSA 标准品(2mg/ml) 2× 1 ml

10 × 1 ml 说明书

1份

1份

*PA115-01试剂盒所携带的试剂可满足50次微管检测和500次微板检测。 **PA115-02试剂盒所携带的试剂可满足250次微管检测和2500次微板检测。

储存条件：

BCA试剂A 和BCA试剂B 室温储存。 BSA标准品-20℃保存。