LCTech GPC操作规程

LCTECH GPC ULTRA

（全在线预浓缩-净化-定量浓缩联用）操作说明

一、 原理

GPC（Gel Permeation Chromatography）凝胶净化色谱是根据溶质分子大小进行分离的色谱技术，选择性仅与分子大小的差异有关。要改进分离度只能靠凝胶的孔径大小和孔径分布的最佳化来实现。试样的分离并不依赖于溶剂与试样间的相互作用力（与一般色谱的不同）。 输液泵将流动相与样品带入净化柱，试样中各组分按照分子大小顺序洗脱，大分子油脂、色素、生物碱、聚合物先淋洗出来农药等较小分子后淋洗出来，检测器检测出信号，组分收集器收集含有目标组分的洗脱液。

二、 操作注意事项

1、 硬件部分

主机电源只用开一个，开关机间隔1 min以上；

冷凝水开关三个，确保冷凝水箱是满的；

真空瓶需用防爆瓶，收集瓶尽量也用防爆瓶；

定期倒掉废液，检查废液瓶容积；

不要触摸进样针，只有在仪器处于关闭状态时，才可用手移动机械臂；

定量环5 mL，一次准确上样5 mL，二联机实际吸取样品大于5 mL（满环上样）。

2、 凝胶净化柱

农残标准柱：Bio-Breads S-X3 200-400目，柱长400 mm，内径25 mm，流速一般5 mL/min。 一根柱子一般可用2-3年，可分析5000个样品。

3、 样品

去除样品中可见杂质；

样品脱水；

上柱时样品必须是环己烷/乙酸乙酯体系，丙酮极性大进柱子会使填料膨胀； 含油量高的样品，上样1 g，因为油含量太高容易堵塞柱子上下过滤膜。

4、 仪器维护

避免柱干，仪器不用时一个星期冲一次，对于沸点高的体系2-3个星期冲一次也行。冲洗方法为：直接开主机电源，按泵上start按钮，以5 mL/min速度冲15 min（约75 mL溶剂）。

5、 故障清除

泵压：液相泵压力显示范围为0.2-11.2 Bar。

低压报警：低于0.2 Bar时，说明管路中有气泡，在stop（不工作）模式下，松开半圈黄色阀门，两只手同时按住∧∨键排气泡，直到气泡排除干净松开两只手，拧紧阀门即可。

高压报警：①柱子堵了，柱子流向是下进上出，一般进口端（下端）易堵，此时可将柱子反接，冲洗一段时间排除故障。②反压阀（阻尼器）堵了，将其拆下不接入管路，开泵冲洗管路，如果压力到1 Bar，说明阻尼器堵，此时将阻尼器用丙酮超声15 min后重新接入管路中。③阀未切回来也可导致压力过高，重新开机自检一般可排除故障，如果不行，说明阀出问题。

在仪器运行样品处理程序时，如要停止运行，需要关闭电源开关，如要继续执行处理程序，在关闭电源开关一分钟后，再重新开机。处理程序被取消后，一旦仪器再次开机并且自检完毕后，需要通过样品表执行清洗程序（按F1键选择）。

三、 软件介绍

UltraSoft_1.17：更稳定，不能保存紫外谱图

UltraSoft_2.08：可以保存紫外谱图

GPC_Ultra_Concentrator：浓缩模式

GPC_Ultra_Online_GPC：在线模式

GPC总共有三种模式：

① 单浓缩：一次可分析26个样，定容到2 mL/5 mL

② 二联机：净化+定量浓缩，满环上样，上样会有损失，一般预先将样品定容到10 mL，

只上样5 mL。

③ 三联机：预浓缩+净化+定量浓缩（①+②），全部上样，没有损失。

三个样品盘：

① 多用盘：单浓缩+三联机，样品瓶（100 mL）/收集瓶（16 mL）

② 二联机：样品瓶（16 mL）/收集瓶（2 mL×2）/收集瓶（4 mL×1）

③ 三联机：样品瓶（60 mL）/收集瓶（2 mL×2）/收集瓶（4 mL×1）

更换样品盘时，凹槽对准中心轴在离线状态下更换最佳，如果是在线更换，需重新selftest自检。

四、 GPC_Ultra_Concentrator（单浓缩模式）

点击桌面GPC_Ultra_Concentrator进入单浓缩界面，菜单栏中system图标亮成绿色，表示连机正确。输入密码admin，点击屏幕中绿色的按钮logon进行登录，登录成功时工具栏被激活，否则工具栏是灰色的。

1、 自检

点击（status）进入系统状态窗口，每当仪器重新开机或改换样品盘后，都需要进行系统自检。自检操作过程：点击“selftest”-----选择正确的样品盘-----再点击“selftest”仪器将进行自检程序。

2、 方法编辑

点击图标可创建新方法或对以已建立好的方法进行参数修改。每个方法可输入方法名称、方法 ID 号和详细说明，进行方法的诠释，这些方法的内容可打印在试验样品记录中。在编辑样品序列时，可选择相应的方法 ID 号来指定样品运行的方法。总共可编辑存储 97 个方法（#1—#97），如果只做单浓缩，在1-19,41-98中编辑，因为20-40是三联机预留方法。如果做三联机，则需要在单浓缩和二联机模式下都编辑好相应方法参数，且方法序数（20-40号）要一致，最后在单浓缩模式下编辑序列运行。二联机模式的话随便哪个方法序号都可以。

首先在open/save中选择方法序数，Name中输入方法名称，Procedure中选择运行程序。方法参数编辑好后，必须在“PC”和“system”中都进行保存。

① 单浓缩程序说明：

Procedure 1 System rinsing program

系统内部清洗程序(只清洗不上样)，默认设定，不需要修改。

Procedure 2 Standard Evaporation

标准浓缩模式 先大体积（高位激光5 mL）→小体积（低位激光2 mL）→定容到5 mL，需注意的是，5 mL样品不是能够完全被转移出来的，管子有一定的内径。

Procedure 3 Concentrate for SPE

用于 SPE 的快速浓缩模式，不定容，体积不准，样品直接转移到原样品瓶。

Procedure 4 Solvent Exchange Complex

不蒸干溶剂转换，只能是低沸点溶剂变成高沸点溶剂转换，一般2-3次可转换完全，定容体积5 mL。

Procedure 6 Precess to Dryness

蒸干溶剂转换，可用于高沸点溶剂转换成低沸点溶剂，适用于相对干净的样品，不会在浓缩腔壁上产生沉淀，定容体积5 mL。

Procedure 7 & Internal Standard

加入内标标准浓缩，不需要通过激光的准确判断，直接浓缩到低位激光，过程更快，定容体积2 mL。

② 参数编辑

单浓缩部分主要是温度和真空度影响实验结果，真空度为主，温度为辅。以溶剂沸点60-70℃为分界点，低沸点溶剂油浴温度为33-35℃，真空度360-400 mbar；高沸点溶剂油浴

温度为40℃，真空度180-200 mbar。

Parameters in Process to Upper Laser 第一次浓缩（高位浓缩，5 mL）

Heat Bath Temperature（油浴温度）：30-70℃ 乙酸乙酯/环己烷作为流动相，浓缩腔最佳温度为40℃。如使用不同的溶剂，浓缩腔温度设定必须要与相应溶剂的沸点相对应。

Nominal vacuum（真空度）：浓缩腔设定真空度大约要低于10～40mbar相对应溶剂的蒸汽压。

Shut Down vacuum（结束真空度）：设置与Nominal vacuum相同即可。

Automatic Mode（自动模式）：不打勾，自动模式适用于复杂体系的浓缩。自动模式下前面设置的温度和真空度都没用。

Frequency Limit of the Vacuum Pump：默认值30 HZ

Parameters in Process to Lower Laser 第二次浓缩（低位浓缩，2 mL）

Heat Bath Temperature（油浴温度）

Nominal vacuum（真空度）件下浓缩。此阶段真空度可以设定为所用 …… 此处隐藏：7283字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……