实验动物学实验报告

实验动物学课程

实验报告

实验内容：

1. 小鼠的基本实验操作

2. 小鼠皮肤移植试验、睾丸（或卵巢）摘除术 3. 豚鼠和兔的一般操作技术 4. 大鼠实验的基本操作

5. 大鼠性周期观察和大鼠急性肺水肿模型建立 6. 小鼠无菌取胎术

7. Beagle犬的一般操作和沙鼠、金黄地鼠、裸小鼠的特性

实验一 小鼠的基本实验操作

一、实验目的:通过实际操作，掌握小鼠的一般操作方法，包括小鼠的抓取和固定、性别鉴定、编号、去毛、给药、采血、麻醉、处死，尤其是染色法编号、灌胃、眼球摘除法采血、腹腔注射、脊椎脱臼法处死。

二、实验动物：昆明小鼠4只（2雌2雄）

三、实验步骤

1、 抓取和固定 2、 性别鉴定 3、 编号（染色法） 4、 去毛（脱毛剂法）

5、 给药：消化道、腹腔注射、尾静脉注射

6、 采血：眼眶后静脉丛、尾静脉、眼球摘除法、断头法 7、 麻醉：氯胺酮腹腔麻醉 8、 处死：脊椎脱臼法、过量麻醉 9、 解剖：

9.1 生殖系统：

9.1.1雄性：睾丸、附睾、输精管、鼠蹊腺（在膀胱下方，胶质状，透明） 9.1.2雌性：双角子宫、卵巢 9.2 肾上腺、胰腺、胆囊、甲状腺

四、实验结果

1、抓取和固定：

抓取：抓小鼠的尾根部

固定：抓住小鼠的尾根部，让小鼠在粗糙平面上爬行，后拉尾跟部，右手的拇

指和食指抓住小鼠两耳及其间的颈部皮肤，小指和无名指将尾巴固定在手掌面。 2、 性别鉴定：

观察肛门与生殖器间的距离和二者之间的毛发。雄性：距离长，毛发密（和其

他部位一样）；雌性：距离短，毛发稀疏。

3、 编号：

3.1染色法：

3.1.1用苦味酸（黄色）在小鼠背面染色 3.1.2逆毛发生长方向染色，自毛根开始 3.1.3可编1-10号（10号为不编号） 3.2去毛：脱毛剂：8% Na2S，自毛发根部涂抹 3.3 给药：

3.3.1 灌胃法：左手抓取小鼠固定后，右手持特制灌胃针，沿一侧口角进针，

紧贴咽后壁，头后仰以便伸直消化道，进针2/3后灌生理盐水0.5ml

3.3.2 注射给药： 3.3.2.1腹腔注射：

3.3.2.1.1从下腹部的两侧进针

3.3.2.1.2进针时针与腹部成45°。进针后稍微晃动针，如无粘滞感则可注射药物

3.3.2.2尾静脉注射：一人固定小鼠，另一人用左手中指和拇指将尾拉直，食指托住尾部，消毒后右手持带4号针头的注射器在图示A（背面，实为动脉）位置进针注射0.5ml生理盐水。注射完毕拔出针头，用无菌棉球压迫止血。尾动脉细小，且贴近皮肤，未注射成功。

小鼠尾静脉切面图

3.4 采血

3.4.1 ：从眼角内侧0.5cm处进针。（右图）

3.4.2 眼球摘除法：左手抓取用固定小鼠，右手持弯头镊在眼球根部将眼球摘除，头朝下，眼眶内血迅速流出。 3.5 麻醉：

0.5%氯胺酮腹腔麻醉：本小鼠重25g，按100mg/kg的药量给药，8分钟麻醉成功 3.6 处死：

3.6.1 脊椎脱臼法：按住头部，将尾根部向后上方以短促的力量拉即可致死 3.6.2 过量麻醉：追加0.5%氯胺酮过量（5ml）腹腔麻醉 3.7 解剖：

3.7.1生殖系统：

3.7.1.1 雄性：寻找到睾丸、附睾、输精管、鼠蹊腺 3.7.1.2 雌性：双角子宫、卵巢 3.7.2 肾上腺：米粒大小

3.7.3 胰腺：位于胃下方，类似于脂肪组织，浑浊状 3.7.4 胆囊：芝麻大小，浅绿色，半透明 3.7.5 甲状腺：紧贴环状软骨

五、实验讨论

1、小鼠抓取的感受：

小鼠性情较温顺，一般不会咬人，比较容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上，在小鼠向前挣扎爬行时，用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤，将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部，即可将小鼠完全固定。在一些特殊的实验中，如进行尾静脉注射时，可使用特殊的固定装置进行固定，如尾静脉注射架或粗的玻璃试管。如要进行手术或心脏采血应先行麻醉再操作，如进行解剖实验则必须先行无痛处死后再进行。

2、小鼠尾静脉注射感受：

首先，注射前尾巴用稍热的水浸泡几分钟，有利于注射；其次，先远后尽，不要一开始就从尾根部，那样失败了不好办； 再次，进血管后注意保持稳定，针尖很容易刺穿血管的。

尾静脉就在尾巴的正左右两边，先用酒精用力擦，可以去掉部分角质，然后按住近心端让充血，就很容易看到了。进针大概1～2厘米是最合适的。

尾静脉注射时，可用45~50度的温水浸润半分钟或用酒精擦拭，可使血管扩张，同时也可软化表皮角质。以左手拇指和食指夹住鼠尾，使静脉充盈，中指帮助无名指和小指捏住鼠尾末梢，右手持注射器（连5号细针头），针头与静脉夹角一般小于30度，从距尾尖2 - 3厘米处进针，此处皮薄易进入，先抽回血，见到血后再缓慢注入少量药液，如无阻力，表示针头已进入静脉，可继续注入。一般推注速度为0.05 - 0.10ml/秒，一次注入量为0.05 - 0.25ml/10g体重。如反复注入，应尽可能从尾末端开始，以后向尾根部方向移动注射。

实验二 小鼠皮肤移植试验、睾丸（或卵巢）摘除术

一、实验目的

1. 掌握近交系小鼠常用的皮肤移植试验（尾～背植皮法，尾～尾植皮法）。 2. 掌握小鼠卵巢摘除术和大鼠睾丸摘除术 二、实验步骤

1、近交系小鼠常用的皮肤移植试验

1.1 尾～背植皮法 1.2尾～尾植皮法 2、小鼠卵巢摘除术

2.1 固定体位、麻醉 2.2 卵巢摘除

三、实验结果

1、近交系小鼠常用的皮肤移植试验 1.1尾～背植皮法：

1.1.1 将近交系小鼠（受体）固定后（已麻醉），背部剪毛（约1.5cm×1.5cm大小），75%酒精常规消毒。用眼科剪在此部位剪开一个0.3cm×0.3cm大小的方形洞备用。 1.1.2将近交系小鼠（供体）固定后（已麻醉），75%酒精常规消毒鼠尾。用眼科剪沿尾静脉剪开一条缝，用止血钳将皮肤剥下，剪成0.5cm×0.5cm大小，刮掉皮片上的结缔组织。

1.1.3将供体皮片（0.5cm×0.5cm大小）覆盖在受体背部的方形洞（0.3cm×0.3cm大小）内，铺平，用棉球吸去渗出的血液，使植皮紧贴受体的创面，并与宿主的边缘密切吻合。

1.1.4无菌纱布覆盖植皮区，胶布包扎（此步骤本实验中省略）。 1.1.5 1～3周后观察结果

1.2 尾～尾植皮法（本实验中为自体尾～尾移植）：

1.2.1 将近交系小鼠固定后（已麻醉），75%酒精常规消毒尾部皮肤。

1.2.2 固定鼠尾的根部，用4号手术刀在鼠尾背部切开一0.5cm×0.5cm大小的皮片，尽量不损伤局部血管，用止血钳将皮肤剥下。

1.2.3 将皮片旋转180°，镶嵌在创面上，棉球吸去局部渗出的血液和组织液，使其尽可能紧贴，可以不包扎。 1.2.4 1～3周后观察结果（100天）

2、小鼠卵巢摘除术

2.1 固定体位、麻醉：

选雌性小鼠，取左侧卧位，以左腹外侧区（左肋弓下缘）为手术区，局部剪毛，75%酒精消毒两遍后，用0.5%氯胺酮以100mg/kg的剂量（本实验：0.5ml）进行腹腔麻醉，5分钟后小鼠静卧于手术台上，呼吸深大而有节律，频率略快，四肢肌肉松弛，麻醉成功。

2.2 卵巢摘除：

用手术刀在左肋缘下，取腹正中线平行方向切开皮肤1cm，暴露腹腔内容物。拨开肠管，找到右肾。在右肾下方找到右侧卵巢和右侧子宫角。游离右侧卵巢并摘除。局部消毒，缝合腹膜、腹壁肌肉和皮肤。

按上述方法摘除左侧卵巢（另一位同学操作）。

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