分子生物学复习题及其答案(3)

7、DNA聚合酶反应特点

☆ 以4种dNTP 作为底物

☆ 反应需要接受模板指导

☆ 链延伸需要引物3’-羟基存在

☆ 新链延伸方向5’→ 3’

☆ 产物DNA极性与模板相对

8、DNA聚合酶I的结构

DNA聚合酶I有5个结合位点：

(1) 模板结合位点

(2) 引物结合位点

(3) 底物dNTP结合位点

(4) 5‘→3’外切酶结合位点

(5) 3'→5'校正位点

9、DNA聚合酶I的主要活性和生理功能

5’ → 3’聚合活性： 催化条件：4×dNTP、Mg2+、模板DNA（双链）、RNA引物；可用与DNA测序

3’ → 5’外切活性：无dNTP是外切活性，有dNTP时，校正作用

5’ → 3’外切活性

内切酶活性

生理功能：滞后链合成中除去RNA引物并添补其留下的缺口；参与DNA损伤修复

10、DNA聚合酶II的主要活性

5’ → 3’聚合活性

3’ → 5’外切活性

生理功能：修复中起作用

11、DNA聚合酶III的主要活性

多亚基酶

5’ → 3’聚合活性

3’ → 5’外切活性

生理功能：是体内DNA复制的主要承担者

12、DNA的复制过程

1、复制的起始

DNA解旋、解链，形成复制叉：拓扑异构酶、解旋酶及单链DNA结合蛋白

RNA引物合成：依赖于单链模版，由引物酶催化合成一小段RNA引物

特点：原核环形DNA通常只有一个起点，双向复制；真核线性DNA通常多个起始点，形成多个复制叉

2、复制的延长

子链延长：引物合成后，由polII催化，在引物3’-OH末端逐一添加与模板链对应互补的脱氧核苷三磷酸

分子生物学所学知识点及主要考点和相应习题及答案

半不连续合成：

A.领头链：键的延长方向与解链方向相同，为连续合成

B..随从链：键的延长方向与解链方向相反，为不连续合成，产生冈崎片段

3、复制的终止

水解引物及填补空隙：冈崎片段合成后，由Pol I水解去除RNA引物，并填补留下的空隙

连接酶连接冈崎片段形成完整双链DNA分子：空隙填补后，DNA片段与片段之间的一个缺口由DNA连接酶催化连接，从而产生完整的双链DNA分子

13、端粒酶的生物学意义

（1）细胞水平的老化，可能与端粒酶的活性下降有关。

（2）基因突变、肿瘤形成，端粒也可表现缺失，融合或序列缩短等现象。

（3）研究端粒的变化是目前肿瘤研究中的一个新领域。

14、DNA重组的意义

1、迅速增加遗传群体的多样性

2、与DNA修复有关

3、可调节某些基因的表达

15、转座子转座的特征

☆ 转座不依赖靶序列的同源性

☆ 转座后靶序列重复

☆ 转座子的插入具有专一性

☆转座具有排他性

☆转座具有极性效应

☆活化临近的沉默基因

☆区域性优化

16、转座子的应用

1、用于难以筛选的基因的转移

2、作为基因定位的标记

3、筛选插入突变

4、构建特殊菌株

5、克隆难以进行表型鉴定的基因

17、RNA转录的一般特点

☆ 具有选择性，即只对基因组或DNA分子中的编码区进行转录

☆ 开始于特定位点，并在特定的终点处终止

☆ 催化转录反应的是RNA聚合酶

☆ 被转录的DNA双链中只有其中一股模板链（反义链）作为 RNA合成的模板，进行“不对称”转录

☆ 启动子控制起始

☆ 底物为4种5’-核糖核苷三磷酸

☆ 合成方向5′→3′

18、原核生物启动子的特征

结构典型：都含保守的识别序列（R)、结合序列（B)、起始位点（I）以及间隔长度; 直接和聚合酶相结合；

常和操纵子相邻；

常位于基因的上游；

分子生物学所学知识点及主要考点和相应习题及答案

19、真核RNA聚合酶的一般特点

结构非常复杂

结构具有相似性

3类RNA聚合酶都有几种共同的亚基：根据其结构与功能，可以分为核心亚基、 共同亚基和非必须亚基。

20、原核生物和真核生物的rRNA基因差异

原核生物无5.8S rRNA

5S rRNA编码基因与其它rRNA编码基因关系不同

重复次数不同

21、帽子结构的功能

（1） 对翻译起识别作用------为核糖体识别RNA提供信号，Cap0 的全部都是识别的重要信号， Cap1,2 的甲基化能增进识别

（2） 增加mRNA 的稳定性，使5’端免遭外切核酸酶的攻击

(3) 有助于mRNA越过核膜，进入胞质

22、poly(A) 的功能

（1） 可能与核质转运有关

（2） 增强mRNA稳定性

（3） 增强可翻译能力

23、剪接机制——剪接体套索模型

● 第一次转酯，内含子形成套索

● 第二次转酯，外显子1、2连接、套索状内含子释放

● 拼接体解体与套索降解

24、翻译（蛋白质的生物合成）:

以氨基酸为原料

以mRNA为模板

以tRNA为运载工具

以核糖体为合成场所

起始、延长、终止各阶段蛋白因子参与

合成后加工成为有活性蛋白质

25、简并性的生物学意义？

可以降低由于遗传密码突变造成的灾难性后果。

可以使DNA上的碱基组成有较大的变化余地，而仍然保持多肽上氨基酸序列不变。

26、tRNA的结构与功能

1、tRNA的一级结构特点

含 10~20% 稀有碱基，如 DHU

3´末端为 — CCA-OH

5´末端大多数为G

具有 TψC

2、tRNA的二级结构——三叶草形

氨基酸臂

DHU环

反密码环

额外环

TΨC环

分子生物学所学知识点及主要考点和相应习题及答案

3、tRNA的三级结构——倒L型

27、肽链合成延长

包括以下三步：

进位：新氨酰tRNA识别核糖体内的mRNA,进入A位

转肽：P位的氨基酸转到A位新氨基酸末端，形成肽键

移位：核糖体向3’端移动1个密码子长度

肽链延长是以上3步在核糖体上连续性循环式进行，每次循环增加一个氨基酸，又称为核糖体循环(ribosomal cycle)。

28、原核生物基因表达调控的特点

主要是短期调节

主要是转录水平的调节

以操作子为单位，存在正、负调控，但以负调控为主，调节因子的活性主要受变构效应调节

还存在其它调控机制

29、Lac操纵子调控机制总结

当低葡萄糖而高乳糖时，部分乳糖在β－半乳糖苷酶作用下转变为异乳糖，异乳糖可作为诱导物和有活性阻遏蛋白结合，使阻遏蛋白失活，不能结合O，RNA聚合酶顺利结合启动子，起始转录利用乳糖的酶；同时，由于没有葡萄糖存在，胞内cAMP浓度高，大量的 cAMP－CAP复合物结合在CAP位点，极大的促进下游结构基因转录效率，β－半乳糖苷酶、通透酶和转乙酰酶的含量高，这时候，细菌就分解乳糖为葡萄糖和半乳糖，葡萄糖直接作为碳源，半乳糖利用gal操纵子调控的酶转变为葡萄糖，由于阻遏物不断合成，当乳糖被消耗完毕后，有活性的阻遏蛋白可重新建立阻遏状态，酶合成被抑制，经过一段延迟期后，逐渐被稀释。

当高葡萄糖和高乳糖时，乳糖可作为诱导物和有活性阻遏蛋白结合，使阻遏蛋白失活，不能结合O，RNA聚合酶可顺利结合P起始转录分解利用乳糖的酶；同时，但是由于葡萄糖存在，胞内cAMP浓度极低，没有cAMP－CAP结合在CAP位点，转录虽然可以起始但还是效率极低，β－半乳糖苷酶、通透酶和转乙酰酶的含量非常 …… 此处隐藏：2721字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……