植物生理学实验指导(2)
明亮的蓝色、蓝紫色或蓝绿色的荧光;丧失生命力的死种子在紫外光照射下多呈黄色、褐色以至暗淡无光,并带有多种斑点。随机选取
20粒待测种子按上述方法进行观察并记载有生命力及丧失生命力的种子的数目,然后计算有生命力种子所占百分数。与此同时也作一平
行的常规发芽试验,计算其发芽率作为对照。
2)纸上荧光:随机选取50粒完整无损的种子置烧杯内加蒸馏水浸泡10~15min令种子吸胀,然后将种子沥干,再按0.5cm的距离摆放在湿
滤纸上(滤纸上水分不宜过多,防止荧光物质流散)以培养皿覆盖静置数h后将滤纸(或连同上面摆放的种子)风干(或用电吹风吹干)。
置紫外光灯下照射,可以看到摆过死种子的周围有一圈明亮的荧光团,而具有生命力的种子周围则无此现象。根据滤纸上显现的荧光团
的数目就可以测出丧失生命力的种子的数量,并由此计算出有生命力种子所占的百分率。此外,可与此同时作一平行的常规种子萌发试
验计算其发芽率作为对照。这个方法应用于白菜、萝卜等十字花科植物种子生命力的鉴定上效果很好。但对于一些在衰老、死亡后减弱
或失去荧光的种子便不适用此法,因此,对它们只宜采用直接察法。
实验四 植物抗逆性的鉴定(电导仪法)
一、原理
植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要的作用。在正常情况下,细胞膜对物质具有选择透性能力。当植物受到逆境
影响时,如高温或低温,干旱、盐渍、病原菌侵染后,细胞膜遭到破坏,膜透性增大,从而使细胞内的电解质外渗,以致植物细胞浸提
液的电导率增大。膜透性增大的程度与逆境胁迫强度有关,也与植物抗逆性的强弱有关。这样,比较不同作物或同一作物不同品种在相
同胁迫温度下膜透性的增大程度,即可比较作物间或品种间的抗逆性强弱,因此,电导法目前已成为作物抗性栽培、育种上鉴定植物抗
逆性强弱的一个精确而实用的方法。
二、材料、仪器设备及试剂
(一)材料:小麦、女贞叶片;
(二)仪器设备:1)电导仪;2)天平;3)温箱;4)真空干燥器;5)抽气机;6)恒温水浴锅;7)注射器。
(三)试剂:NaCl溶液
四、实验步骤
1)制作标准曲线:如需定量测定透性变化,可用纯NaCl配成0、10、20、40、60、80、100μg/ml的标准液,在20~25℃恒温下用电导仪测
定,可读出电导度。
2)选取小麦或其他植物在一定部位上生长叶龄相似的叶子若干,剪下后,先用纱布拭净,称取二份,各重2g。
3)一份插入小杯中放在40℃恒温箱内萎蔫0.5~1h,另一份插入水杯中放在室温下做对照。处理后分别用蒸馏水冲洗二次,并用洁净滤纸
吸干。然后剪成长约1cm小段放入小玻杯中(大小以够容电极为度),并用玻棒或干净尼龙网压住,在杯中准确加入蒸馏水20ml,浸没叶片。
4)放入真空干燥器,用抽气机抽气7~8min以抽出细胞间隙中的空气;重新缓缓放入空气,水即被压入组织中而使叶下沉。
5)将抽过气的小玻杯取出,放在实验桌上静置20min,然后用玻棒轻轻搅动叶片,在20~25℃恒温下,用电导仪测定溶液电导率。
6)测过电导率的之后,再,放入100℃沸水浴中15min,以杀死植物组织,取出放入自来水冷却10min,在20~25℃恒温下测其煮沸电导率。
五、实验结果及分析
比较不同处理(萎蔫处理与对照)的叶片细胞透性的变化情况,记录结果,并加解释。
实验五 植物激素及生长调节剂的生理效应观察
(选做实验)
II 生长调节对果实发育的影响
[实验目的]
1.了解赤霉素对茎伸长作用。
2.了解乙烯对果实的催熟作用。
3. 植物生长调节剂对植物插条不定根发生的影响
[实验原理]
赤霉素对种子萌发及茎伸长有促进作用;适当浓度的乙烯利能促进果实成熟。用
植物生长调节剂(生长素类、生长延缓剂等)处理插条,可以促进细胞恢复分裂能力,诱导根原基发生,促进不定根的生长;容易生根的植物经处理后,发根提早,成活率提高;对木本植物进行插条处理,提高生根率。移栽的幼苗被生长调节剂处理后,移栽后的成活率提高,根深苗壮。本实验通过测定植物生长的重要生理指标——根的活力和过氧化物酶活性,以了解生长调节剂促进不定根发生作用。
[器材与试剂]
1.实验仪器 塑料盆,量筒,移液管,容量瓶,烧杯,标签,天平,称量纸,滴管,
角匙
2.实验试剂 100mg/L 赤霉素GA3,40%乙烯利,1000mg/L吲哚丁酸溶液(称取100mg
吲哚丁酸,加90%酒精0.2mL溶解,用蒸馏水定容至100mL)
3.实验材料 番茄或白菜种子和幼苗,没成熟大蕉或柿子,非洲蓬琪菊枝条等
[实验步骤]
1. 赤霉素对种子萌发及对茎伸长作用
(1)用100mg/L喷或涂在小苗的地上部分,过两天观察结果。
2.乙烯利对果实的催熟作用
(1)将采收后的大蕉(或香蕉、柿子、芒果等)用500mg/L乙烯溶液浸泡5s,以蒸
馏水浸泡作对照,取出果实分别放在箩筐或纸箱内,室温保存。
(2)3~5d之内,观察结果。比较果皮的颜色和果实的成熟度。
3. 植物生长调节剂对植物插条不定根发生的影响
(1)生根稀释浓度100mg/L、200mg/L、300mg/L。
(2)取非洲蓬琪菊或其他植物材料从茎顶端或枝条上端向下10~15cm处剪去植株地下部分,去除花,保留1~2片叶片(如果叶片面积较大,可以保留半片叶)。
3.将插枝基部2~3cm浸泡在植物生根溶液中,以相同体积浸泡插条为对照。记录浸泡时间,然后换水。
4.将插条放置在阳台或走廊的弱光通风处培养(室温为20~35℃),培养期间注意加水至原来的高度。
5.插条用水培养10~20d后,统计其基部不定根发生的数目,每个插条的生根数目、生根的范围。然后用刀片切下不定根,在电子天平上称其鲜重。放置培养皿内,于烘箱60~80℃烘2 h,取出,冷却后称重;继续烘干,直至重量不发生变化。
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