不同倍性东方百合杂交后代染色体数目观察

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第22卷　第5期　　　　　　　　　　　　　　云南农业大学学报　　　　　　　

2007年　9月　　　　　　　　　　JournalofYunnanAgriculturalUniversity　　　　　

Vol122　No15

Sep.2007

不同倍性东方百合杂交后代染色体数目观察

向仕华,郑思乡

1

1,233

3

,赵　雁,关文灵,李　益,刘　妍,张喜艳

11111

(1.云南农业大学园林园艺学院,云南昆明650201;2.云南玉溪雷森科技有限公司,云南玉溪650031)

摘要:以3个二倍体东方百合品种(2n=2×=24)与4个同源四倍体东方百合品种(2n=4×=48)为杂交亲本配制成8个杂交组合,并对杂交后代各株系进行了细胞学观察。结果表明,性低;且各杂交组合的杂交后代中,。关键词:东方百合;细胞学;二倍体;同源四倍体

中图分类号:S6821032　　文献标识码:A　　文章编号:)-04

ChroonontheHybrid

ifferentPloidyLiliumoriental

XIANGShi2hua,ZHENGSi2xiang

1

1

1

1

1,2

,ZHAOYan,

1

1

GUANWen2ling,LIYi,LIUYan,ZHANGXi2yan

(1.FacultyofLandscapeandHorticulture,YunnanAgriculturalUniversity,Kunming650201,China;

2.LeisenScienceandTechnologyLimitedCompany,Yuxi650031,China)

Abstract:CytologicalobservationonthehybridgenerationsofninecrosscombinationobtainedfromthecrossingparentsofthreediploidLiliumorientalvarieties(2n=2×=24)andfourautotetraploidvarieties(2n=4×=48).Theresultsshowedthat,thepropagationoftheLiliumorientalhybridseedswereverylow,andallthehybridgenerationshaveadifferentdegreediversityinthenumberofchro2mosomes.

Keywords:Liliumoriental;cytology;diploid;autotetraploid

　　百合是百合科(Liliaceae)百合属(Lilium)多年生草本植物。百合在鲜花中的地位非常重要,因而在国内外花卉市场上百合始终倍受人们青睐。但至今我国花卉市场上无论是芳香醉人的东方、麝香系列,还是朴素大方的亚洲百合几乎都是国外培育的泊来之品。因此应充分利用我国丰富的百合遗传资源,结合常规和现代育种技术,培育出具有自主知识产权的百合新品种。

有性杂交对于百合育种,特别是选育百合新品种有着重要的现实意义。不同倍性东方百合杂交,可以获得二倍体、三倍体和四倍体植株,它们无论在新品种培育、遗传研究还是在生产上都具有重要

作用。为此提出了本项研究,旨在快速培育出观赏价值高的百合优良品系来,为国内百合种质资源的研发与生产开辟一条新的途径,并为百合的遗传学研究积累资料。

以下因素可能造成植物染色体数目变异:①秋水仙素等化学诱变剂;②物理因素,如温度聚变、X射线、激光、嫁接、切割等;③多倍体与二倍体杂交或与未经减数分裂的配子受精;④组织培养;⑤大多数胚乳培养产生的植株;⑥远缘杂交;⑦化学诱导的无融合生殖。本文首次提出不同倍性东方百合杂交所产生的染色体数目多样性,以便为今后百合倍性间杂交育种提供理论依据

。

　收稿日期:2006-12-20　

3基金项目:国家科技部成果转化基金项目　　　　33通讯作者　E2mail:huazizi@　作者简介:向仕华(1983-),男,在读硕士生,主要从事花卉生物技术与育种研究。

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1　材料与方法1.1　材料

云南农业大学学报　　　　　　　　　　　　　　第22

卷

分裂行为的观察,取各株系根尖用卡诺固定液直接

固定→酸解→卡宝品红染色→火焰烘烤→压片,然后用光学显微镜观察和拍照。2　结果与分析

2.1　不同倍性东方百合品种间杂交亲和性研究

云南省玉溪市科技有限公司提供的东方百合品

种。有SF4×ZY29,SF4×ZY17,ZY17×SF4,L4×T4,T4×L4,L2×L4,L2×T4,C4×ZY17八个杂交组

)合[SF4,C4为东方百合星球战士(L.‘Starfighter’诱导的四倍体新品种;ZY29,ZY17为东方百合真情

(L.‘ConAmore’)和元帅(L.‘Acapulco’)的2n配子杂种后代形成的二倍体新品种;T4为东方百合蒂伯(L.‘Tiber’)诱导的四倍体新品种;L4为东方百合里

)诱导的四倍体新品种]。瓦尔多(L.‘Livarno’

1.2　方法

根据表1进行杂交试验5d掉雄蕊,并且套袋,、柱头上出现粘液时授粉(头上),并重复授粉。种子萌发率(%)=萌发种子数/杂交种子数×100%。

表1　杂交组合

Tab.1　Crosscombination

组合

combination

1

234567在不同倍性品种之间的杂交中(表2),出苗率都很低并有很大差异,说明东方百合不同倍性品种间杂交亲和性较差,与其它相关报道相符合

[1]

。

,13%,以二倍体0167%,,说明在二倍体与四倍体的杂交中以四倍体为母本的杂交更易成功,杂交亲和性更强。在四倍体SF4为母本的各组合中,以ZY29为父本的种子萌发率远远高于以ZY17为父本的,说明SF4与ZY29的杂交亲和性

更强。在ZY17与SF4的正反杂交组合中,种子萌发率都很低,而以正交组合的种子萌发率稍高一些,这可能是由正反杂交胚乳发育的差异所致。在二倍体ZY17为父本的杂交组合中,四倍体C4为母本的杂交组合的种子萌发率远远高于以SF4为母本的,说明C4与ZY17的杂交亲和性更强,更易获得杂种后代。而以L2,L4为母本的各杂交组合中,他们的种子萌发率都为0,说明他们的杂交亲和性很低,存在很大杂交障碍,因此,今后不应以类似他们的来作为培育新种的杂交组合。说明在对多倍体品种改良时,无论是四倍体之间的杂交,还是以二倍体和四倍体之间的正反杂交,首要考虑的是亲本间的亲和性问题,才能准确、快速、有效的达到理想的育种目标。

表2　种子萌发状况

Tab.2　Theconditionofseedgerminated

杂交组合培养种子数观察天数/d种子萌发数种子萌发率/%

crossNo.ofseed

combinationculturedSF4×ZY29ZY17×SF4SF4×ZY17C4×zy17L2×L4L2×T4T4×L4L4×T4

25015070025032575150150

No.ofNo.ofseed

observedaygerminated120120120120120120120120

31356700140

frequencyof

seedgerminated

121421001726180001090

母本代号染色体倍数父本代号染色体倍数

femalemultiplesofmaleparentmultiplesof

parentnumberchromosomenumberchromosome

SF4

ZY17SF4C4L2L2T44244224×××××××ZY29SF4ZY17ZY17L4T4L42422444×××××××将成熟的果实2～4℃低温处理7d后,种子消毒并接种在MS+110mg/L6-BA+011mg/LNAA的培养基上,放于温度20～22℃,光照强度1000lx,每日光照12h下培养。

将萌发的种子接种在MS+115mg/L6-BA+011mg/LNAA上诱导不定芽,并形成株系;继代培养将6-BA下降到015mg/L;生根培养基为MS+110mg/LNAA+2-5g/LAC;试管苗经2～4℃低温处理37～57d,然后练苗移栽到腐质土中。

杂交后代染色体数目观察,以各株系根尖为材料,用秋水仙素和八羟基喹啉(1∶1)预处理→卡诺固定液固定→酸解→卡宝品红染色→火焰烘烤→压片,然后用光学显微镜观察、计数并拍照。有丝

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