吡格列酮对动脉粥样硬化大鼠核因子-κB表达的影响

目的探讨吡格列酮对动脉粥样硬化大鼠核因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法将30只健康雄性Wistar大鼠随机分为3组,正常饮食组、高脂饮食组、高脂饮食加吡格列酮干预组,比较3组大鼠主动脉病理形态学改变,测定大鼠的血脂变化,采用免疫组化技术测定NF-κB在血管内皮细胞的表达。结果吡格列酮能减轻动脉粥样硬化所致的内膜和肌层增厚。吡格列酮能降低胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、

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CHI NES OURNALOF I EJ NTEGR ATI DI NEON AR O一 C VE ME CI C DI/ ERE ROVAS B CUIAR DIEAg M a 2 0 Vo. No 5 S E y 01 18 .

毗格列酮对动脉粥样硬化大鼠核因子一K B表达的影响王慧敏，陈还珍摘要：目的’讨吡格列酮对动脉粥样硬化大鼠核因子一 (探 B NF—K )达的影响。方法将 3 B表 0只健康雄性 Wi a s r大鼠随机 t

分为 3组，常饮食组、脂饮食组、正高高脂饮食加吡格列酮干预组，比较 3组大鼠主动脉病理形态学改变，定大鼠的血脂变化，用测采 免疫组化技术测定 NF—K B在血管内皮细胞的表达。结果吡格列酮能减轻动脉粥样硬化所致的内膜和肌层增厚。吡格列酮能降低胆固醇 ( C)三酰甘油 ( G)低密度脂蛋白 ( D—,高高密度脂蛋白胆固醇 ( L C)高脂饮食能刺激大鼠主动脉 T、 T、 L L C)升 HD—。

NF— B的表达， K吡格列酮能显著减轻这种作用。结论吡格列酮能减轻动脉粥样硬化大鼠 NF~ B的表达，而可能会有效防治 K从f

动脉粥样硬化。

关键词：格列酮；脉粥样硬化；因子一K 吡动核 B

中图分类号： 5 1 4 R 8 . R 4 . 2 5 5

文献标识码： A

文章编号： 6 2—1 4 ( 0 0 O O 7 O 17 3 9 2 1 ) 5一 5 O— 2

动脉粥样硬化 ( )发病率在逐年上升，重影响了人们 AS的严的健康。研究表明，炎症反应对 AS的形成起关键性的作用¨。 1]核因子一k p a ( u l r a t r a p B, F—K )调节基 a p B n c a co—k p a N e f B是

鼠的血脂。 1 4病理及免疫组化切片 .

141取材 ..

2乌拉坦腹腔注射麻醉动物，开胸腹，离 5切游

因转录的关键性因子，参与了许多与炎症反应有关的基因表并达调控。新近研究发现， NF— B也存在于血管内皮细胞、管血平滑肌细胞中，且与动脉粥样硬化的发生与发展有关，并 NF~ B激活后，导致炎症相关因子的过度表达，将引起明显的

炎症反应 _。吡格列酮是一种合成的过氧化物增殖物激活型受 2]

胸腹主动脉全长，离外膜脂肪组织，一段胸腹主动脉 3 c剥取 m~

5m,理盐水冲洗，于 1中性缓冲甲醛 ( H 7 2中 c生置 0 p .)固定。

1 4 2病理切片图像分析 ..

取胸主动脉 5mm,水并透明 1 脱 5

h常温下石蜡包埋，冻后切片。光镜下观察照相， I g,冷用 mae T o图像分析仪测量内膜和肌层厚度。 ol 1 4 3免疫组化染色取上述普通切片，照免疫组化试剂盒 ..参说明书进行，由北京中杉金桥生物有限公司提供抗鼠 NF— B K的亚基 NF一￣ p 5疫细胞化学染色，镜初步观察，组取 B6免光各

体 7 P AR,激动剂， P (P￣ ) P AR激动剂不仅调节代谢，而且能抑制血管的炎症反应，有抗 A具 S作用。本研究采用吡格列酮观察对核因子一 B表达的影响，而为 P AR,动剂抗动脉粥样从 P￣激硬化的作用提供理论依据。1材料与方法

3张切片， 0镜下每张切片随机选取 5视野，用 4倍 0个采吡格列酮 (可拓，艾日本武田药品工业

11主要试剂和仪器 .

H—S OR C E法计算阳性细胞所占的比率。 N—e p 5阳性染 F B6色以细胞核染色为主，胞质也有染色，棕黄色。细呈

株式会社生产，津武田药品有限公司分装 )胆固醇 ( C)三天； T、

酰甘油 ( G)高密度脂蛋白 ( D T、 L L—C)剂盒、密度脂蛋白试低(D L L—c试剂盒 ( )中生北控生物科技股份有限公司)抗鼠 N B; F一 的亚基( NF— p5抗体 ( E中杉金桥生物有限公司)胆酸 B 6 ) j京；钠、固醇等均为国产分析纯；心机 (大创新股份有限公司胆离科

15统计学处理 .

采用 S S 30软件包进行统计，主要指 P S1 .对

标进行正态性检验。两样本比较采用 t验，检 3组间比较采用 On—Wa AN e y OVA分析。数据用均数±标准差 ( s表示。± )2结果

中佳分公司 )石蜡切片机 (海市医疗器械工业公司 )图像分；上；析仪、像仪 (海精

密科学仪器有限公司 )摄上。1 2动物和分组 3 . O只重量为 ( 1± 1 ) 10 0 g的健康雄性

2 1体重测定实验前 3 . 0只大鼠体重为 10 g 1, 1± 0g 6周后，予高脂饮食的大鼠，重升至 3 0g 2g正常饮食的大给体 1±1;鼠，重为 2 5±1 (体 0 g 0g P%0 0。1周时高脂饮食组体重增 . 5) 2加至 3 0 _ 3显著高于正常饮食大鼠 ( 0± 1 g P< g4 g 9 - 5 - 2 g , 7 2 0 0 )吡格列酮组体重增至 3 2g 2,高脂正常饮食组 .5。 3士 Og与相比有统计学意义 ( P< 0 0 ) .5。

Wi a大鼠 (山西医科大学实验动物中心提供 )随机分为 3 sr t由，

组，常饮食组、脂饮食组及高脂饮食加毗格列酮干预组。随正高机取其中 1 O只作为正常对照组，予普通饲料喂养 1给 2周； 0 2只作为高脂饮食组，以高脂饲料喂养 1周。6周后随机取 1予 2 O只作为高脂饮食加吡格列酮干预组，高脂饮食基础上给予吡在格歹酮 1/ k《 0mg ( g d )口服。

22血脂测定 .

实验前各组血脂水平无明显差别；1 2周末高

脂饮食组 TC L L— T和 HD C均明显高于正常对照组、D C、 G I一( P< 0 0 );格列酮干预后 TC、 .1吡 TG、 DL—C下降， L HDL—C

13血脂和脂蛋白测定实验结束时，鼠尾取血，置后， .经禁300rmi心 1 i备血清，照试剂盒要求测定 3大 0/ n离 0r n制 a按组

升高，高脂饮食组比较有统计学意义 (< O 0 )与 P . 5。详见表 1。mmo/ lL

表 1各组血脂水平变化 ( ±s )

2 3病理切片内膜及肌层厚度对比高脂组的主动脉内膜及 .

肌层厚度明显高于正常对照组 ( 0 0 )也明显高于吡格列 P% . 1,