硒化壳聚糖诱导NB4细胞分化作用的研究

目的研究硒化壳聚糖(Sc)对人急性早幼粒白血病NB4细胞分化的影响,探讨这种作用与细胞CD11b和c-fos抗原表达的关系。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;硝基蓝四氮唑(NBT)还原法检测细胞分化;流式细胞术检测细胞CD11b和c-fos抗原表达。结果 50～200mg/LSc对NB4细胞增殖有抑制作用,呈时间剂量依赖趋势;经50mg/LSc作用48h后,NBT阳性细胞数明显增多,CD11b及c-fos抗原的表达

山西医药杂志 2 1 0 0年 1 0月第 3 9卷第 l o期上半月 S a x Me, tb r2 1, 13,。 0 h n i dJOco e 0 0 Vo. 9 No 1

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硒化壳聚糖诱导 NB 4细胞分化作用的研究郧阳医学院附属人民医院 ( 4 0 0 4 20 )湖北省十堰市妇幼保健院

邓守恒俞远东张 军

李芳邰云燕陈萍徐华

【摘

要】目的

研究硒化壳聚糖 ( c对人急性早幼粒白血病 N 4细胞分化的影响，讨这种作用与细胞 s) B探

C 1 b和 efs原表达的关系。方法四甲基偶氮唑蓝 ( Dl -抗 o MTT法检测细胞增殖；基蓝四氮唑 ( T)原法 )硝 NB还检测细胞分化；式细胞术检测细胞 C l流 D1b和 cfs原表达。结果 5~ 2 0mg LS 抗 o 0 0/ e对 NB 4细胞增殖有抑制作用，时间剂量依赖趋势； 5/ c用 4呈经 0mg L S作 8h后， T阳性细胞数明显增多， D l NB C 1 b及 cfs原的表—抗 o达较对照组明显增强[ 5 .± 3 2与 ( .± 1 3,( 2 3 3 7与 (2 7 1 6%,< 0 0 ), 10 (5 4 .) 21 . ) 4.± . ) 1.± .) P . 1]而 0mg I及以上浓度 S组 C 1/ c D1 b及 c o抗原表达则逐渐减小。结论— s f原表达来促进细胞分化。 S可通过上调 N 4细胞 C 1及 cf s c B D1 b—抗 o

【键词】细胞分化；壳聚糖；白血病，幼粒细胞，性关 早急

Ef e to ee um hio a n t e dif r nta i n o c t omy l c tc luk m i fc f s lni c t s n o h fe e ito fa u e pr e o y i e e a NB4 c lsi ir DE N G el n vt o Sho— u

h n ,yU Yu n do g,ZHA NG Ju eg a— n n,LJFa g,T IYu— a n A n y h,CH EN Pi g,XU H u Re mi g H o pi l n a. n n s t, aYun yan M e c le g dialCo l ge,Shi yan 4 0 42 00,Chi na

[ sr c] Ob et e Tosu yt eef

c fslnu c io a ( c n dfee t t n o 4 c l ut rd Abta t jci v t d h fe to ee im hts n S )o i r n i i fNB el c lu e f ao si i r d e pl eisr l tons p w ih t e CD1l nd c l s a i n m o e u e . M eho s The d fe e iton a n v to an x or t ea i hi t h b a— o ntge l c l s t d if r nta i nd pr ier ton e fc s m e s r d by NBT e c d m e h n TT e ho olf a i fe tofSc wa a u e r du e t od a d M m t d,r s e tvey;FCM s u e o e p ci l wa s d t

e a n h x rs ino ba dcl sa tg nmo eue n tmo el.Reut 5 / t 0 / fS x miet ee p e so fCD1 n o n ie lc lsi u rc l 1 s sl s Omg I O2 0mg L o cc ud ihbtc l p oiea in i o ea dtmed p n e tma n r An e p s r fNB el o 5 / fS o l n ii el r l rt n ad s n i e e d n n e. f o x o u eo 4 c l t 0 mg L o c sf r 4 oul n r as BT r duc d ostv c ls A t he a e i e t a nda c o 8 h c d ic e eN e e p ii e el. t s m tm he bu n e ofCD J nd—os b a cf we e l r

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e,t ev leo r h au fCD1 b a dcf swe ed ce s d i 1 n —o r e ra e n NB4c l r ae t 0 / t 0 / o c el te tdwih 1 0 mg I O2 0 mg I fS .Co cu s n

l-so Sc c d pr m ot B4 c ls dif r nta i — e ul i he a nd c fCD1l n —os a tg n m o e in oul o eN e l fe e iton by up r g atng t bu an e o a d c f n ie l— b c e. uls

[ ywo d] C ldfee t t n; Cht sn; L u e a r my lc tc c t Ke r s el ifr n i i ao i a o e k mi,p o eo yi,a u e

壳聚糖是存在于自然界中的一种碱性生物多糖，有抗肿瘤、炎、菌等多种生物活性，生具抗抗且物相容性良好，乎无毒性，现代药物制备中常几在作为良好的药物材料进行开发 j硒化壳聚糖 。 J

靶细胞，重点观察了硒化壳聚糖对其产生的抑制增殖和诱导分化作用并探讨了可能的原因。1材料与方法1 1材料：化壳聚糖由福建医科大学药化系合成，硒 .硒含

是将硒酸根吸附于壳聚糖单体 2NH一和 6OH上一制备成的低相对分子质量有机硒，可有效克服无机硒不易被细胞吸收，活性和毒性范围较窄，死量致相对较小等缺点，和砷属同族，氧化二砷在临硒三

量为 0 4;甲基偶氮唑蓝 ( .四 MTT)维甲酸 ( A)佛波酯、 R、( P、基蓝四氮唑 ( B、化丙啶 ( I为美国 Sg T A)硝 N T)碘 P) ima

产品；抗人 cls多抗、抗兔异硫氰酸荧光素 ( I C一兔— o羊 F T )I G二抗、 D l— I荧光标记单克隆抗体购自美国 g C 1 b F TCBe k n公司。 c ma

床上早已作为一种抗急性早幼粒白血病 ( c t au ep o e c t e k mi,AP药物使用，硒化 rmy l yi lu e a o c I )故

12方法：细胞培养：NB .① 4细胞引自福建省血液病研究所，养于体积分数为 1新生牛血清，0 mL青霉培 O 10U/素、0 mL链霉素和 2U/ 1 0U/ mL谷氨酰胺的 R MI14 P 60

壳聚糖也应具有相同作用，不良反应应该比无机且硒和砷小得多。本试验以人 AP细胞株 NB I 4为基金项目：北省教

育厅项目( 2 0 2 0 4;北省十湖 B 0640)湖

培养基内， 3于 7℃、和湿度，积分数 5 C条件下培饱体 O养，细胞接种 2 4 h后进入指数生长期。② MT法检测细 T

堰市科学技术局项目(科通[o 6 1十 2o] 8号 )通信作者：萍，Emaly c e pn@ 1 3 C N陈 i: y h n ig 6 .O

胞增殖：9孔板上接种处于指数生长期的 NB 6 4细胞，孔每1 0 L接种量 5 1个/。试验孔加入等体积、同 0,× 0 mL不