幽门螺杆菌分型检测90例临床分析

幽门螺杆菌分型检测90例临床分析

自从1984年warren和marshall从人胃黏膜中分离培养出幽门螺杆菌(hp)后，20多年的研究表明幽门螺杆菌感染是慢性活动性胃炎的主要致病菌，消化性溃疡的重要致病因素，是胃癌重要的诱发因素，世界卫生组织将其列为一类致癌物。最新的研究表明hp的致病性与菌型差异、敏感的年龄及机体的反应性有关［１］。作者采用免疫印迹法检测90例hp感染者血清中多种hp抗体，并依此对hp进行免疫分型，探讨不同血清分型hp与慢性胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡和胃癌的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2005年1月至2007年6月本科门诊及住院病人90例。男52例，女38例；年龄21～58岁，平均37.7岁。均经胃镜检查诊断确诊为hp阳性；其中内镜下胃十二指肠无病变者为对照组，共15例，其余75例为病例组，并依据病理诊断分为慢性胃炎(cg) 31例，胃溃疡(gu) 12例，十二指肠溃疡(du) 23例，胃癌(gca) 9例。

1.2 方法 幽门螺杆菌免疫印迹检测试剂盒选用深圳××有限公司。抽取待检者静脉血1.5～2 ml，分离血清，按说明书操作。将提取的hp全菌体抗原(含有caga、vaca和尿素酶a、b亚单位等)用聚丙烯酰胺凝胶电泳按分子量大小不同依次分开，电转印至印迹膜上，与待检者血清反应，如果被检血清中含有hp抗体，会与印迹膜上相应hp抗原结合，加入酶联第二抗体和显色剂，hp抗原位置即出现显色带，与hp抗体标准区带比较，即可判断出何种hp感染。

1.3 hp感染判断标准 hp i型：免疫印迹技术显示caga和/或vaca抗体阳性；hp ii型：免疫印迹技术显示仅尿素酶抗体阳性，caga和vaca抗体阴性；hp阴性：caga、vaca和尿素酶抗体均阴性。

1.4 统计学处理 采用χ2检验。

2 结果

在90例确诊的hp感染者中，免疫印迹检测hp抗体阳性88例，阳性符合率97.78%。病例组中hp i型阳性率在慢性胃炎(cg)，胃溃疡(gu)，十二指肠溃疡(du)，胃癌(gca)中分型结果见表1。

表1 90例hp感染者免疫印迹分型结果(n,%) 略

3 讨论

近年来对hp生物学特性、分型和致病作用等进行了较深入的探讨，在hp致病因素中，空泡形成毒素(vaca)、细胞毒素相关蛋白(caga)起重要作用。国外研究将hp分为两型［２］，i型hp菌株能产生空泡毒素(vaca)和细胞毒素相关蛋白(caga)，可破坏细胞顶端连接复合体的结构及功能。caga不仅能够破坏顶端连接，而且干扰上皮细胞分化，降解基膜，使上皮细胞失去极性及细胞黏附性，伸出迁移伪足，具有侵袭性［３］；因此i型hp能导致广泛的组织炎症，促使溃疡病的发生发展。ⅱ型hp为不产生细胞毒素菌株，即caga和vaca阴性株，

这一类hp菌株毒性较小，感染后一般只是引起轻度慢性浅表性胃炎而无明显临床症状。

作者检测了90例确诊的hp感染者血清中caga、vaca和尿素酶抗体，其中对照组为内镜下胃十二指肠无病变，共15例，病例组75例又根据病理诊断结果分为cg 31例，gu 12例，du 23例及gca 9例。免疫分型是指采用免疫学方法，利用抗原抗体反映检测hp感染者血清中针对hp特异抗原的抗体进行检测［４］。作者应用免疫印迹技术显示血清中其免疫活性蛋白区带，细胞毒素相关蛋白(caga)与128、116和110kd区带有关，空泡毒素(vaca)蛋白与95和91kd区带有关。因此通过免疫印迹试验，可成功检测出细胞毒素相关蛋白a(vaca)和空泡毒素相关蛋白a(vaca)抗体的情况，从而将hp分为i型及ⅱ型。

本结果显示，胃、十二指肠疾病病人（病例组）血清hp i型的阳性率73.33% (55/75)，而对照组仅为20.00%(3/15)，差异有显著性(p<0.01)，说明i型hp能产生vaca和caga，有较强的致病力，是胃、十二指肠疾病的主要致病因素。其中hp i型阳性率在cg，gu，du，gca中分别为58.06%，83.33%，86.96%，77.78%，提示i型hp感染更易导致较严重的消化道疾病。而ii型hp可能多数引起慢性胃炎，很少引起严重的消化道疾病。

免疫印迹法检测幽门螺杆菌抗体结果分析

【摘要】 目的 评价免疫印迹法检测ⅰ型和ⅱ型幽门螺杆菌抗体的价值。 方法 采用免疫印迹法对门诊随诊患儿227例进行分型检测。 结果 检出hp阳性85例,阳性率为37.44%,其中ⅰ型58例,占68.23%;ⅱ型27例,占31.76%。 结论 免疫印迹法检测幽门螺杆菌抗体具有较高的敏感性和特异性。方法简单，时间短,对临床治疗有重要的指导意义。

【关键词】 幽门螺杆菌 免疫印迹法 空泡毒素 细胞毒素相关基因a

幽门螺杆菌（helicobacter,简称hp）是慢性胃炎﹑消化性溃疡和非溃疡性消化不良的重要因素，是胃癌的危险因子。hp在全球人群的感染率超过50%，而且随着年龄的增加有递增趋势［1］。表达空泡毒素（vaca）蛋白和细胞毒素相关基因a（caga）的hp菌株致病力强。本文对患儿血清用免疫印迹法进行检测并分型,探讨不同型别hp与患者的关系，及时指导临床治疗。

1 材料与方法

1．1 样本 于2006年8月～2007年8月到我院门诊患儿，抽血2ml，留取血清待查。

1．2 试剂与方法 采用免疫印迹法进行分型，试剂盒由上海元谷科技发展有限公司提供。本试剂原理是先将幽门螺杆菌的混合抗原用sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳，按分子量大小不同分开，再将其转移至硝酸纤维膜，如果被检血清有相应抗体，应用酶联免疫吸附反应，就会在抗原的相应位置出现显色区带，即可判断hp感染类型。

1．3 抗体判断 将印迹膜上端起始线与标准带起始线对齐，在对应位置出现带型既可判断为相应的抗体:①128kd﹑116kd出现显色带或128kd单独出现，可同时伴有110kd

显色判断为caga（+）抗体；②95kd﹑91kd出现显色或95kd单独出现，可同时伴有87kd显色带判断为vaca（+）抗体；③66kd出现显色带判断为尿素酶b(ureb)(+)抗体;④30kd出现显色带判断为尿素酶a(urea)(+)抗体。

1．4 分析结果 ①caga或vaca抗体同时阳性或任意一种阳性，为ⅰ型hp感染；②仅出现尿素酶a和尿素酶b抗体阳性，为ⅱ型hp感染；③caga， vaca及ureas三种抗体阴性，既为hp抗体阴性。

2 结果

2.1 227例患儿 hp感染85例，阳性率为37.44%,其中ⅰ型58例,占68.23%;ⅱ型27例,占31.76%,见表1。

表1 227例患儿hp感染结果（略）

2.2 不同年龄段hp感染情况 见表2。

表2 1～14岁不同年龄段hp感染情况（略）

3 讨论

目前临床上根据hp菌株及是否表达相应蛋白将hp分为两种类型：ⅰ型为产细胞毒素hp菌株，能产生空泡毒素和细胞毒素相关蛋白，其致病力强，能导致广泛的炎症，ⅱ型为不能产生细胞毒素的hp，不含细胞毒素相关基因a(caga)，不表达vaca毒素和caga蛋白，这类菌株毒性小，感染后一般仅引起轻度慢性浅表性胃炎而无明显的临床症状［2］。据文献［3,4］报道，caga蛋白是ⅰ型hp致病性的标志物，现已确认hp是慢性活动性胃炎﹑消化性溃疡﹑胃黏相关淋巴组织（malt）淋巴瘤和胃癌的致病因素。1994年世界卫生组织/国际癌症研究机构（who/iarc）将幽门螺杆菌定为ⅰ型致癌原。hp作为胃癌的ⅰ类致癌因子，其中caga与 vaca是在致癌过程中关键的毒力因子。hp穿透粘液层在胃上皮细胞表面定居，对胃上皮细胞和胃粘膜屏障等造成破坏作用，刺激上皮细胞增殖，改变增殖与凋亡的关系。vaca可使上皮细胞空泡样变性﹑损伤﹑坏死及溃 …… 此处隐藏：4797字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……