第十二章 种质保存与人工种子宜职院08.9
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第十二章
种质保存与人工种子
宜职院08.9
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目的与要求 了解植物种质离体保存的类型与特点,及其基本操 作技术。了解植物人工种子的概念与发展概况、特点
与制备方法。具备利用植物组织培养技术进行种质资源保存的 认知,具有人工种子制备基础能力。
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第一节 种质资源保存 一、植物种质资源低温保存意义 防止资源灭绝、节约人力物力、便于交流 二、超低温保存的概念 低温从4℃往下推 -80℃以下的低温称为超低温 干冰温度(-70℃)称为极低温
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超低温保存方法分类: 冷冻诱导保护性脱水的超低温保存 玻璃化处理的超低温保存。 细胞超低温保存重要操作步骤: 一、细胞预冻 二、细胞在-196℃下长期贮存 三、细胞解冻。
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三、超低温保存的方法 超低温保存植物种质资源的程序包括培养材 料的准备、预处理、冰冻及保存、化冻处理、 细胞活力和变异的评价、植株再生等几个步聚。
(一)传统的降温冰冻方法1.快速冰冻法 2.慢速冰冻法 3.两步法 4.逐级冰冻法
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(二)玻璃化保存方法玻璃化是指液体转变为非晶体(玻璃态)的固 化过程。 1.玻璃化法 将生物材料经极高浓度的玻璃化溶液快速脱水
后,直接投入液氮,使生物材料连同玻璃化溶液发生玻璃化转变,进入玻璃态。 2.包埋玻璃化法 包埋玻璃化法是包埋-脱水法和玻璃化法的结 合。
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四、其它超低温冻存方法1.干燥法
2.预培养法3.预培养-干燥法 4.包埋脱水法
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五、化冻方法 液泡小、含水量少的细胞,可快速化冻。液 泡大、含水量高的细胞则采用慢速化冻法。生长
季节中的材料, 37~40℃温水浴中快速化冻。木本植物的冬芽,必须在0℃低温下进行慢速化冻。 玻璃化冻存的材料要求快速化冻,
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第二节 人工种子 人工种子又称合成种子或体细胞种子。
任何一种繁殖体,无论是在涂膜胶囊中包裹的、裸露的或经过干燥的,只要能够发
育成完整的植株,均可称之为人工种子。
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一、人工种子分类: 1、裸露的或休眠的繁殖体。 如可以适当干燥的体细胞胚、休眠的微鳞茎和 微块茎等。 2、人工种皮包被的繁殖体。 一些体细胞胚、原球茎等,不能过度干燥,但 只需人工种皮包被即可维持发芽状态。 3、水凝胶包埋再包被人工种皮的繁殖体。 大多数体细胞胚、不定芽、茎尖等,先包埋在 半液态凝胶中,再经人工种皮包裹,避免失水,维 持发芽能力。
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包有人工种皮的种子
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二、人工种子优点
1、高效快速的无性繁殖方法,既能保持原有品种的种性,又具有实生苗的复壮效应。 2、可快速获得大量优异杂种种子。 3、三倍体、非整倍体等特殊植物材料
,可通过人 工种子短期内加大繁殖应用。
4、可不受季节限制工厂化生产,还避免种子携带病原菌的危险;
5、可以避免移栽困难,且可以实现机械化操作,同时还便于储藏和运输。
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三、人工种子生产方法 (一)繁殖体的生产 1.体细胞胚生产 2.微型营养变态器官培养 3.芽培养
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(二)人工种子包被1、繁殖体的预处理 体细胞胚适度脱水干燥和强制休眠;微型变态器 官繁殖体表面消毒处理;芽为繁殖体的老化处理。 2、繁殖体的包埋
海藻酸钠溶液中加入繁殖体混匀—逐滴滴入2.0%~2.5% CaCl2溶液中—20~30 min的离子交 换作用—形成含繁殖体并有一定刚性的小球珠—水 漂洗20 min。—得到人工种子(胶囊状)
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(三)人工种皮的研制 理想的人工种皮:
1、具有一定的封闭性以保证人工胚乳的各种成分不易流失;
2、有良好透气性,保证繁殖体维持生理活性的需要; 3、有一定的坚硬度,加强人工种子的耐储运 性和适于机械化操作; 4、无毒无害,能保证繁殖体顺利穿透发芽。
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四、人工种子应用前景:首先,人工种子可以贮藏,因而可以周年 生产,避免了试管苗应用中由于季节性生产而 带来的诸多矛盾。 其次,人工种子可以直接播种,减少了试
管苗移栽在操作和管理上的困难,可以实现机械化操作和常规的田间管理。 其三,由于可以长距离运输,因此,人工 种子可以建立相对集中的大型生产企业,实现 资源和技术优化。
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