茶多酚的提取分离和分析鉴定研究(2)

茶多酚单体的分离在 l 9世纪就开始了，始采开用的都是化学法。14,罗赫连达尔从绿茶 87年 .中分离出没食子酸；87, . 1年 x赫拉茨维采从红茶中 6分离得黄酮醇和槲皮素；99,村从日本绿茶中 1年迁 2

2 13常压吸附层析 ..成贵仁等[]用硅胶得到 2新黄酮甙类化 2利 7个

合物，现茶叶的不同产地品种其化学成分也不同。发 胡忠勤等[J 2利用聚酰胺薄膜从绿茶中分离得到 3 8个已知黄酮类化合物。

提炼出 f一表儿茶素，又提炼出 f之后一表没食子儿茶素、表儿茶素没食子酸酯和鞣花酸； f一大岛义康还从绿茶中分离得到少量飞燕草素； . R卡脱拉爱脱得到对香豆酸。但他们使用的这些方法只能得到茶多酚总

22高压液相制备分离 .高压液相制备与常压柱色谱分离没有本质的不

成分中很少的部分，依靠层析技术，就是色谱只有也法才能达到系统分离。前文已谈到，色谱分离可分为吸附分离、离子交换分离、排阻分离和分配分离。而按流动相流动时压力的大小，又分为常压色谱、加压色谱和减压色谱。由于茶多酚分子之间结构的相似性，主要用分配分离和排阻分离才能得到单体。 2 1常压层析法 .

同，只是为提高流速而加压，硅胶填料更细，且分离效果更好。杜琪珍等[】 Spae H2分离，∞用 ehdxL . 0预 经高压液相分离制备了儿茶素单体。戴军[] 2也做 9了类似工作。近年来国外采用连续制备柱分离成功的报道很多。

23高速逆流色谱法 .该法是 18年以后发展起来的新技术，特点 92其是靠高速运动的重力场使固定相能在分离柱中实现

该法是将茶多酚粗品经一定溶剂溶解后，上柱分离，洗脱剂洗脱，用收集洗脱液。柱层析的关键是柱填料与洗脱剂的选择，国内外报道的柱填料主要有两大类：分配层析的填料为硅胶、维素等；胶纤凝层析的填料为 Spae H 2等。 ehdxL .0 2 11常压分配层析 .. 14 . 4年， r fl等[,]硅胶柱反复上 971 8 Ba id 12用 9 de 90柱分离出 6

个儿茶素单体。流动相为含水乙醚、含水四氯化碳和乙酸乙酯，建立了儿茶素类的系统分

高度保留，从而大大提高分离能力。这种分离是在两相中进行的，克服了使用固体吸附材料造成的样品不可逆吸附后降解的缺点。 在分离茶多酚单体的过程中，葡聚糖凝胶柱用层析，常需结合其他方法如重结晶法、流分配法、逆

高压液相制备法等才可得到单体。因为在回收水时需较高温度，为使茶多酚不被氧化，通常需要采用冻

干回收，以用该法制备大量单体不经济，所而且周期长，生产效率低。采用高压液相法也常因需结合其他方法，成本高，回收困难，合工业化生产。高不适速逆流色谱法可很好地将儿茶素单体分开，目前但只能得到少量儿茶素单体，如果进行工业化生产，还要进一步改进分离技术，而且其投资也十分大。常压正相层析分离需反复上柱，分离步骤烦琐。笔者

离方法。用硅胶分离法从阿萨姆变种的茶叶中分离出两种花白素即飞燕草花白素和蔷薇花白素。另据

报道，人用 10张滤纸组成柱，有 0 0从茶叶中分离出 6 种黄酮醇l] 99年，ut等[用纤维素柱色谱 l。15 8 Vaz a法对茶多酚进行了分离， l个单体化合物，得 2分离

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20年第 2卷第 2 05 9期第 7页 5P o rs n P a ma e t a ce c s r g esi h r c ui lS in e c

豹学进展34其它色谱法 .

综述与专论 7 5

20 0 5, V 1 2 o . 9, No. 2

参考文献 9和 0, 1 2]已改进一种常压分配柱层析的方法，价廉的几种常见试剂，用可得近 10的 0% E C。成本极低，回收， GG易一次性投资少。3茶多酚的分析

随着色谱技术的发展，一些新的色谱方法逐渐得到应用。魏泱等[] 报道，采用毛细管区带电泳在

分析绿茶时，高压液相法在准确性和灵敏性方面比毛细管区带电泳法更有优势，而且高压液相法可用于样品的制备和半制备；毛细管区带电泳法的分但

在早期研究中，色谱法只能测定茶多酚的总非量，到 2世纪 5一6直 0 O 0年代才将色谱法用于茶多

离效率更高，可解决反相高压液相法分离多酚化合物出现的峰展宽现象，

由于所需样品少，而且分析速度快，品分析中更具有实用性和经济性。采用在样胶束电动色谱法在某些方面比高压液相法更优越， 如某些物质的分离效果更好，其毛细管壁对分离但物质有吸收是有待解决的问题。另外，还可采用逆流色谱法分析多酚类化合物，流色谱法可避免高逆压液相法中固定相对分析物的吸附及峰脱尾。 总之，在儿茶素的色谱分析中，相高压液相法反已成为目前使用最广泛，技术最成熟的方法。一些

酚的分析。目前，对儿茶索类分析方法的研究已比较全面。

3 1平板色谱法 .

主要有纸色谱法、薄层板色谱法和聚酰胺正相薄层法。纸色谱是最先用于分析茶多酚的色谱分析方法。二维纸色谱是最先应用于茶多酚的色谱分析方法[] 3。廖小蓓 _层析分析了茶叶花青甙及 1 3用纸 2甙元。该方法成本低，简单易行，但定量不够准确， 分析时间长。正相薄层板色谱法是当前平板色谱法的主要方法。朱敏等[用高效薄层硅胶板 6测 ] 0

新方法有自己的独特之处，但其技术还有待完善。4茶多酚的鉴定 4 1茶多酚结构鉴定的化学方法 .

量了茶多酚主要单体含量。该法优点是分析时间短，易行，用于定量；点是高效薄层板价格简单可缺

高，有干扰，杂质分离度有待提高。聚酰胺薄层法可用于配合制备分离时对馏分的检查。杜琪珍等[] 3 0采用高速逆流色谱法分离、检查了馏分中儿茶素单体。优点是分析灵敏，快速；为分离度不高。缺点32气相色谱法 .

在早期的结构研究中，化学法占主导地位。茶多酚由碳、、氢氧三种元素组成，水分的含量将影故响元素的组成。在进行元素分析前需充分脱水，然后进行水解和醇解才可以获得茶多酚的有关结构信

气相色谱法具有快速、量分析方便的优点。定 据报道，人采用三甲基硅烷衍生化分析儿茶有素¨之后又作了进一步改进：乙酸乙酯预处理，,用使用三甲基氯为衍生剂，采用程序升温法，只用一个

息。衍生物制备是茶多酚结构研究的常用方法。通常将茶多酚制成甲醚、乙酸酯、苄醚、甲基硅醚、 三甲基醚乙酸酯等。重氮甲烷法和硫酸二甲酯一酮一丙 碳酸钾法常用于将茶多酚结构上大部分或全部的酚羟基转化为甲

醚，乙酸酐一啶法则使结构上全部吡的酚羟基和醇羟基转化为乙酸酯；甲基醚进一步乙 酰化，生成甲基醚乙酸酯。从甲氧基、乙酰基的数目 可以判断酚羟基及醇羟基的数目，衍生化过程如其下[] 3: 5T ( H)+— -O y T ( C 3 ( H)— .o H ) 0 y T ( C 3 O O H ) -o H )( C C 3

内标物就可以实现多种儿茶素的同时分析。但由于该法烦琐，应用还不多。目前33液相色谱法 .

据报道，96 17年反相高压液相已用于儿茶素的分析【, 以后的研究主要是对流动相的改进。于海

宁等 J以经磷酸或硫酸调节至 p ~ H3 4的重蒸水一 乙氰一乙酸乙酯 (6 1:)为流动相，茶素类 8:22作对儿的分离度好，检测快，且较梯度洗脱方法简单。茶多酚类若经衍生化处理可用电化学检测器，敏度更灵高，但操作较烦琐。正相高压液相法类似于目前采用的正相薄层板法，主要根据混合物中分子聚合程度不同将单茶多酚类、寡茶多酚类和多聚茶多酚类分离，单独用于儿茶素分离的极少。

42茶多酚结构鉴定的波谱法 .进入 2世纪的 6 o 0—7 0年代，由于波谱法提供的信息丰富、准确，仅需微量样品，且已几乎取代了化学法。特别是其中的 N R谱和 M谱法。 M S 4 2 1紫外光谱 ..

儿茶素类化合物均有两 …… 此处隐藏：3006字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……