大孔吸附树脂分离富集土贝母总皂苷的研究

大孔吸附树脂分离富集土贝母总皂苷的研究

马挺军 屠鹏飞 3 吕飞杰

1北京大学药学院 北京

1中国农业大学食品科学与营养工程学院 北京

北京 1中国农业科学院

优化大孔吸附树脂分离纯化土贝母总皂苷的工艺条件 方法 以土贝母总皂苷的吸附量和解≈摘要 目的

大范围筛选树脂 并通过单因素试验!正交试验及方差分析确定了土贝母总苷分离富集的优选操作条吸率为指标

优选吸附条件为上样含生药量 # 树脂色谱柱的件 结果 树脂具有较好的吸附性能和解吸效果 药材Β树脂为 Β 吸附完全后 先以水洗脱 除去杂质 再以 乙醇洗脱 可以得到纯度较好的土贝径高比 Β

解吸容易 确定的吸附与洗脱条件简单可行 所得产品的色泽母总苷 结论 树脂对土贝母总苷的吸附量大 此工艺具有良好的产业化前景 好!纯度高

土贝母总苷 生产工艺 大孔吸附树脂 ≈关键词 土贝母

≈中图分类号 1 ≈文献标识码 ≈文章编号 2 2 2

土贝母为葫芦科植物土贝母Βολβοστεµµαπαν22 方法与结果211 含量测定

21111 标准曲线考察 精密称取土贝母苷甲对照

有清热解ιχυλατυµ ¬ 1 ∏ 干燥的块茎 毒 消肿散结之功效 主治乳痈 瘰疬痰核 疮疡肿毒 疣赘 蛇虫咬伤 其主要成分为甾醇!三萜皂苷等≈ 土贝母皂苷主要组分为土贝母苷甲!乙!丙苷甲含量达 1 具有抗 ∏ 肿瘤!抗病毒等多种药理活性≈

为了更好地开发和应用土贝母资源 对土贝母总苷的提纯工艺进行了研究 结果表明 利用

型大孔吸附树脂纯化土贝母总苷具有工艺简单 操作方便 总苷纯度高等优点 试剂与仪器1 药材!

土贝母采自山西省绛县 经北京大学药学院屠鹏飞教授鉴定为葫芦科植物土贝母Β1πανιχυλατυµ的干燥块茎 紫外分光光度计 °≤ ≥ 2大孔树脂 2 南开大学化工 ∏ 厂 ° ° ° 沧州宝恩化工有限公司 天津农药总厂 土贝母苷甲对照品 自制 光谱鉴定结构为苷甲 ° ≤检测纯度大于 香草醛!冰醋酸!高氯酸和甲醇均为分析纯

≈收稿日期 2 2 ≈通讯作者 1 ∏1 ∏

3

品 1 置 量瓶中 加甲醇超声溶解并定

备用 分别吸取对照品溶液 容至刻度 1 1

ε 1 1 1 1 置 具塞试管中

水浴蒸干 然后放入 ε烘箱中烘 待冷却后分别加入 的香草醛2冰醋酸溶液 1 振摇溶解后加入浓硫酸 1 摇匀后置于 ε水浴中加热 然后冰水冷却 再各加入冰醋

冰水冷却 酸 后于 测定吸光

度 得到回归方程 Χ 1 1 Α Ρ

在 1 1 Λ 时 线性关系良好 1

21112 样品含量 精密量取供试液 放入 然后放入 ε 具塞试管中 ε水浴蒸干

烘箱中烘 待冷却后按标准曲线制备项下

的方法测定吸光度 并计算总皂苷的含量

21113 上样溶液制备 称取粉碎的土贝母药材

加入 乙醇 加热回流提取

次 每次 减压蒸干得浸膏 上样时加入适

配制不同含量备用 量水

212 大孔吸附树脂选择

21211 静态吸附量考察 分别精密称取预处理过的大孔吸附树脂 ° ° 2 ° 各 置于

屠鹏飞 × ∞2 ∏

# #

量瓶中

分别加入 土贝母药材提取溶液 含生药量为 #

放置过夜 滤过 分别测定原液和滤液中土贝母总苷的含量 测定 种树脂的含水量 计算各干树脂的静态净吸附量 结果见图

图 不同树脂对土贝母总皂苷的静态最大吸附率

从图中可以看出 不同类型的大孔吸附树脂对土贝母总苷的静态吸附效果有较大的差异 种树脂中吸附效果最好的为 其次为 °

和 ° 的吸附容量最小 因此 选择吸附效果较好的 种树脂 °

° 进行进一步考察

21212 大孔吸附树脂洗脱度考察 称取预处理过

的 种大孔树脂 ° ° 各

干重 装柱 分别取 土贝母水提液 每毫升 生药 上样 然后分别依次用去离子水

乙醇各 洗脱

收集洗脱液 测定总皂苷的含量 计算不同含量乙醇的洗脱量 结果见图

图 不同大孔树脂对土贝母总苷的解吸曲线可以看出 种大孔树脂吸附土贝母总苷后均能由不同含量的乙醇解吸出总皂苷 在

乙醇含量区间内 随着乙醇含量的增大 洗脱量也随之增大 且 乙醇洗脱效果最好 此外 可以看出 树脂的洗脱量整体上均超过其他 种树脂 综合以上试验 表明 种树脂中 大孔树脂对土贝母总苷吸附量最大 解吸率最高 其最佳的洗脱溶剂为 乙醇 因此以 大孔树脂为吸附填料进行进一步的考察

21213 最大动态吸附量考察 精密称取

树脂 干重 装柱 柱体积约 徐徐注入含

量为每毫升 生药的土贝母水提溶液 上柱流速

调节为 # 收集流出液 每份 × ≤检识直至出现苷甲斑点 以流出液体积为横坐标 总皂苷含量为纵坐标 作图 即得 树脂对土贝母

总苷的动态吸附曲线图 结果见图

图 树脂对土贝母总苷的动态吸附曲线

从上图可以看出 树脂对土贝母总苷具有良好的动态吸附性能 泄漏时间较长 才开始出现泄漏 并较长时间保持低浓度泄漏 直到流出液达到 时 流出液中总皂苷的含量才达到

1 #

左右 当流出液的体积到达 时已达到吸附平衡 此时大孔吸附树脂的饱和动态吸附量约为每克干树脂 总皂苷 相当于 1

生药 与静态吸附特征基本一致

213 大孔树脂吸附条件的优化

为考察上样时样品溶液的浓度!树脂柱的径高比和生药与树脂的比例 个条件对 树脂吸附土贝母总苷的影响

采用表 的正交设计分别装柱!上样 并计算各柱子对应的树脂的吸附量 实验结果及方差分析分别见表

表

正交试验因素水平

ΑΒΧ

水平上样含量

树脂色谱柱药材Β树脂

#

径高比 …… 此处隐藏：2252字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……