副猪嗜血杆菌的分离鉴定和药敏试验研究

从山东某繁育猪场送检的疑似病例中分离到4株革兰氏阴性细小杆菌,通过培养特性试验和生化试验初步诊断为副猪嗜血杆菌,根据副猪嗜血杆菌16SrRNA序列设计引物,进行PCR鉴定,结果表明4株分离菌株为副猪嗜血杆菌。对4株分离菌株进行小白鼠毒力试验和药敏试验,结果表明,4株分离菌能致死小白鼠,对头孢他啶、头孢噻呋、氧氟沙星、多西环素、环丙沙星敏感,对土霉素、链霉素、林可

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山东畜牧兽医

2O年第 2卷 O8 9

副猪嗜血杆菌的分离鉴定和药敏试验研究宋风香①②闰振贵①姜世金 (山东农业大学动物科技学院泰安① 2 11②德州市畜牧局 ) 70 8 摘要从山东某繁育猪场送检的疑似病例中分离到 4株革兰氏阴性细小杆菌，通过培养特性试验和生化试验初步诊断为副猪嗜血杆菌，根据副猪嗜血杆菌 1SrNA序列设计引物，进行 P R鉴定，结果 6 R C表明 4株分离菌株为副猪嗜血杆菌。对 4株分离菌株进行小白鼠毒力试验和药敏试验，结果表明，4株分离菌能致死小白鼠，对头孢他啶、头孢噻呋、氧氟沙星、多西环素、环丙沙星敏感，对土霉素、链霉素、林可霉素抵抗。 关键词副猪嗜血杆菌分离鉴定药敏试验 中图分类号：￥ 5 .8 882文献标识码：A文章编号：10 .7 320 )50 1.3 0 7 13 (0 80 .0 00

近年来，呼吸道疾病成为继繁殖障碍性疾病、 胃肠道疾病之后危害养猪业的三大症候群之一，其中以副猪嗜血杆菌 ( e p i sp rs i H s的 Hamo hl aaus p ) u,危害越来越严重。副猪嗜血杆菌是猪格拉泽氏病 ( lse’ dsae的病原菌，属于巴斯德菌科嗜血 G asrs ies) 杆菌属。H s p是一种多形态、非溶血性、不运动、 N AD依赖型、革兰氏阴性细小杆菌 l。对营养要求】】比较苛刻，培养时必须供给含有 V因子 ( D)或 NA ( D) NA P的新鲜血液才能生长。不仅如此， p还引 Us起猪的多发性浆膜炎、多发性关节炎、脑膜炎、支气管炎和败血症。副猪嗜血杆菌于 11 90年由 Gl sr ae s 首次报道，是常规饲养猪群上呼吸道的一种常在菌， 但在特定条件下可以侵入机体并引起严重的全身性疾病，以纤维素性多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎为特征，可以影响 24月龄的猪，通常见于 4 8周龄，￣~ 发病率和死亡率均很高。本试验对副猪嗜血杆菌的感染进行了初步研究，分离鉴定了 4株副猪嗜血杆菌，并进行了药敏试验。

1材料和方法

1材料 . 1 1 .病料来源待检病料无菌采自山东某繁育 .1 1 猪场疑似 H s p的发病仔猪的肺脏、心血、关节液。 剖检病变表现为胸膜炎、心包炎、腹膜炎、

关节炎和脑膜炎等。 1 .主要试剂及培养基 N D购自中国医药( .2 1 A集团)海化学试剂公司。草酸铵结晶紫溶液、革兰氏上碘液、石炭酸复红、犊牛血清、鲜血培养基等实验室自制，犊牛血清使用前经过滤除菌，5℃灭活 3 6 0 mi。胰蛋白大豆琼脂 T A,胰蛋白大豆肉活 T B n S S购自 D fo公司。微量生化鉴定试剂购自杭州天和 i c微生物试剂有限公司。药敏纸片购自北京天坛生物科技公司。 a NA聚合酶、d T s L 0 0DN T qD N P、D 2 0 A Ma e均购自大连宝生物有限公司。其他常规试剂 rr k均为分析纯。

1方法 . 2 1 .直接涂片镜检 .1 2

无菌采取病猪的心血、关节

病如消化不良、营养转化障碍等，久而久之就会造成反刍动物的膘情差，以及体质瘦弱等现象。临床上很多反刍动物的消化系统疾病可以用此原因解释，所以在对反刍动物用药前，一定做相关的药敏试验。参考文献

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