抑癌基因甲基化与肺癌(2)

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可检测到CDH13基因超甲基化，而健康人群却没有[12]，提示血清CDH13启动子甲基化可作为一种检测早期肺癌的方法。 1.11 TIMP3( Tissue inhibitor of metalloproteinase

3)

基因 即金属蛋白酶组织抑制剂3，属于金属蛋白酶组织抑制剂家族(TIMPs)的一员，定位于22q12.3区域。这个家族具有对抗基质金属蛋白酶(MMP)活性作用，能够抑制肿瘤生长、血管发生、侵袭及转移。TIMP

3的缺失被认为与肿瘤的发生有关。研究表明在从人类癌瘤获

得的细胞株中，TIMP3表达失活与基因异常启动子区域甲基化相关。TIMP

3异常甲基化可发生于原发肾、脑、结肠、乳腺和肺肿瘤中，

3的表达情况与肿瘤

而在41例正常组织中无一例发生[13]。TIMP

的病理分级、结节浸润密切关联，可作为NSCLC患者手术切除的一个独立的预后因素。

1.12 RARβ(Retinoic acid receptor β) 即维甲酸β受体基因,与肿瘤的分化及恶性转化有关,是一种潜在的肿瘤抑制基因。刘晓黎[14]等通过观察经顺维甲酸(9cisRA)处理前后肺癌组织和对照肺组织维甲酸受体α、β及维甲酸类受体α转录水平的变化，证明肺癌组织中RARβ受体表达异常可能与肺癌发生有关。另有研究表明，在经相关环境因素暴露下诱导的肺癌裸鼠模型中，RAR

β的

异常甲基化是一种早期且常见的改变[15]。这些研究结果提示，RARβ受体的异常甲基化可作为肺癌早期检测的一项指标。

1.13 SEMA3B(Semaphorins) 信号素SEMA3B是定位于3p21.3区域的候选抑癌基因。目前的研究表明， SEMA3B作为一种抑癌基因，

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以等位基因缺失及启动子区域甲基化的形式使其表达失活频繁发生在肺癌中。Tamotsu[16]等的研究证实，SEMA3B基因的变化，通过“二次打击”学说，包括后天修饰和等位基因缺失致使抑癌基因失活，可能在NSCLC的恶性转化方面起重要作用。这些研究结果提示，SEMA3B启动子区域甲基化可作为肺癌发生的一项检测指标。

2 多基因甲基化联合检测在肺癌早期诊断及预后判断中的意义 从上述报道中可以看出，肺癌相关抑癌基因异常甲基化的研究,对肺癌尤其是NSCLC具有一定的早期诊断及预后判断的价值。尽管有些抑癌基因在NSCLC中的甲基化发生的频率偏低,但是对这些基因的联合检测可以极大地提高肿瘤的阳性检出率或预后判断价值。

有研究表明，单独根据ECad或HCad发生甲基化的频率与NSCLC患者的总体生存率没有显著差异，但两者同时发生超甲基化的患者生存率明显提高[17]。这提示，对于NSCLC患者，ECad和HCad基因同时发生甲基化的联合监测可作为一种较可靠的预后指标。 在林勍[18]等的研究中，NSCLC患者血清DAPK基因甲基化检出率为30.3% (27 /89),p16基因甲基化检出率为43.8% (39 /89),联合检测两基因甲基化检出率为76.4% (68 /89),而正常对照组和良性肺部疾病组血清未检出DAPK基因、p16基因甲基化，结果提示DAPK基因、p16基因检出启动子区域异常甲基化是NSCLC早期辅助诊断的分子标志物之一，联合检测两基因优于各单基因检测。

Anglim[19]等通过用敏感的高通量DNA甲基化分析技术MethyLight,检测了45例肺鳞状上皮细胞癌患者癌组织及癌旁正常

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肺组织中42个基因位点的甲基化状态。结果显示肺癌组织中22个基因位点表现出比非瘤组织中更显著的高甲基化水平，其中有8种基因(GDNF,MTHFR,OPCML,TNFPSF25,TCF21,PAX8, PTPRN2 and PITX2)表现出非常显著的超甲基化水平。用这8种基因位点的联合体标本联合检测，显示出95.6%的敏感性和特异性。可见采用对多个基因甲基化进行联合检测对肺癌具有很好的临床应用前景，还可以构建“甲基化基因谱”用于肺癌高危人群的筛查。 3 针对肺癌抑癌基因甲基化的治疗

3.1 DNA甲基转移酶抑制剂 由于甲基化并不改变DNA碱基序列，可以发生逆转，近年来人们将注意力集中在DNA甲基转移酶小分子抑制剂的研发上。DNA甲基转移酶及其关联的组蛋白脱乙酰基酶抑制剂，通过重激活肿瘤抑制基因和诱导细胞凋亡显示出抗增殖的效应。5氮杂胞苷(5azacytidine)及5

脱氧胞苷酸(5aza

deoxycytidine)是目前常用的甲基转移酶抑制剂。已有研究表明,肺癌中因启动子区发生甲基化而去表达的抑癌基因,经去甲基化药物5

脱氧胞苷干预后可以恢复表达。Cantor[20]等人的试验，通过遗

传后修饰调节恢复肿瘤抑制基因的表达，体现了甲基转移酶抑制剂用于肺肿瘤防治的潜力和前景。

3.2 RNA干扰技术与小干扰RNA RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术是近年来发展起来的新技术，是一种在生物体细胞内,由特异的内源性或外源性双链RNA ( double

stranded

RNA,dsRNA)诱发其同源信使RNA(messenger RNA,mRNA)降解的基因沉

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默机制。特异的dsRNA被特异核酸酶切割成21～23个碱基对的小干扰RNA(small interference RNA,siRNA),转染至靶细胞后与细胞内的内切酶形成RNA诱导沉默复合体。DNA甲基化主要是由DNA甲基转移酶(DNMT)催化的,DNMT活性增加可使DNA发生异常甲基化、基因活性改变和染色体不稳定。DNMT1作用于半甲基化(母链甲基化而子链未甲基化)的DNA而催化其甲基化。Suzuki等[21]实验显示人NSCLC细胞系NCIH1299中,用DNMT1siRNA抑制了DNMT1的表达,减少启动子区域甲基化,从而使抑癌基因p16INK4A、CDH1、RASSF1A重新激活，提示siRNA可能成为肺癌治疗的一种新途径。 4 展 望 …… 此处隐藏：904字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……