动物细胞工程课堂笔记(2)

同。有人认为重组需要的因子存在于MⅡ期卵母细胞的胞质中，而在原核形成时这些因子已被降解或用光，因此，原核扩张后受精卵去核可引起胞质中重组因子缺乏。成熟促进因子（MPF）是卵母细胞细胞质中重要的胞质影响因子，MPF的活性在卵母细胞减数分裂的MI期和MⅡ期达到最高，受精或激活后，MPF迅速灭活，因此，MⅡ期卵母细胞中MPF活性高，而受精卵中MPF活性低。MPF水平的高低可影响供体核染色质的状态和复制。MⅡ期卵母细胞细胞核、细胞质已成熟，而MI卵母细胞细胞核、细胞质尚未成熟，其细胞质不能支持胚胎的全程发育，因此，尽管MI期卵母细胞MPF活性也高，但不能用作受体卵母细胞。

也有人认为用去核合子做受体时，可能由于合子去核时一些早期发育必需的因子随原核的去除而被去掉了，而使去核受精卵缺乏发育能力。因此，目前广泛采用MⅡ期卵母细胞做受体。 三、动物细胞融合

(一)动物细胞融合的概念

杂交细胞:

（二）动物细胞融合的过程

原理： ， 与植物原生质体融合原理相同。 诱导的手段：

融合后细胞的类型？

诱导细胞融合的病毒必须灭活。 为什么灭活的病毒能作诱导剂？

因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 不灭活的病毒能作为诱导剂吗？

不能，因为不灭活的病毒会感染细胞。 比较动、植物细胞杂交技术 比较项目 细胞融合的原理 细胞融合的方法 诱导手段 用途 植物体细胞细胞膜的流动性 杂交 动物细胞融细胞膜的流动性 合 纤维素酶、果胶酶去离心、电刺激、振克服远源杂交不除细胞壁后诱导原生动、聚乙二醇 亲和的障碍，获得质体融合 杂种植株 用胰蛋白酶使细胞分除应用植物细胞杂获得杂种细胞、制散后诱导细胞融合 交手段外，还有灭备单克隆抗体 活病毒 (三)动物细胞融合的应用

1.突破有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。

鼠—鸡、鼠—兔、鼠—猴、人—鼠、人—兔、人—鸡、人—蛙、酵母菌—鸡 、人—胡萝卜等 2.成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。 3.为制造单克隆抗体开辟了新途径。 二、单克隆抗体 什么是抗体？

抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋