山东大学微生物各个章节学习辅导 - 图文(2)

2）电镜镜筒中要求高真空（在电子的运行中如遇到游离的气体分子会因碰撞而发生偏转，导致物象散乱不清）。电子显微镜因需在真空条件下工作，所以很难观察活的生物。

3）以电子透镜（电磁圈）代替光学透镜，通过电磁圈使电子“光线”汇聚、聚焦。 4）电子像人肉眼看不到，需用荧光屏来显示或感光胶片作记录。 电子显微镜按结构和用途可分为：

透射电子显微镜(transmission electron microscope): 电子束穿过薄切片 扫描电子显微镜(scanning electron microscope): 观察样品的表面结构 7、扫描隧道显微镜

是目前分辨率最高的显微镜，其横向分辨率可以达到0.1-0.2 nm，纵向分辨率可以达到0.001 nm，足以对单个的原子进行观察。由于在扫描时不接触样品，又没有高能电子束轰击，因而可以避免样品的变形。不仅可以在真空，而且可以在保持样品生理条件的大气及液体环境下工作， 所以对生命科学研究领域具有十分重要的意义。 8、细菌染色法

由于微生物细胞微小，含水量多，因此在光学显微镜下为透明状态，与背景没有反差，无法进行观察，因此通过各种染色方法提高其反差。 细菌菌体(等电点一般pH 2-5)在中性\\碱性\\或弱酸性溶液中带负电荷，易于碱性染料(正电荷)进行结合，所以常用碱性染料进行染色。常见碱性染料:结晶紫，番红，美蓝，孔雀绿；中性红等。 常用的染色方法：

染色操作的基本程序为：

制片?干燥?固定?染色?水洗?干燥?镜检

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革兰氏染色（C.Gram于1884年发明的一种鉴别不同类型细菌的染色方法。）

结晶紫初染 ? 碘液媒染 ? 酒精脱色?番红复染

第三章：微生物细胞的类群、形态、结构与功能------原核微生物

重点与难点剖析

1、微生物的主要类群：

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2、原核微生物

指细胞核无核膜包裹，只存在由裸露DNA组成的核区（nuclear region) 的原始单细胞生物。主要类群包括细菌与古生菌。细菌又称真细菌（eubacteria），包括普通细菌、放线菌、蓝细菌、 支原体、立克次氏体和衣原体等 (三菌三体）。古生菌，在进化谱系上与真细菌及真核生物相互并列，且与后者关系更近，而其细胞构造却与真细菌较为接近，同属于原核生物。 3、细菌细胞的基本形态

基本形态：球状、 杆状、螺旋状和其他形状。

球状菌：细胞个体呈球形或椭圆形，球菌在细胞分裂时形成的不同空间排列方式，常被作为分类依据。 杆状菌：细胞呈杆状或圆柱形，一般其粗细（直径）比较稳定，可作为分类依据；而长度和排列方式常因生长阶段和培养条件不同而发生较大变化，一般不作为分类依据。

螺旋状：包括（1）弧菌，其菌体只有一个弯曲，其程度不足一圈，形似“C”字或逗号，鞭毛偏端生。（2）螺菌, 菌体回转如螺旋，螺旋数目和螺距大小因种而异(1-20)。鞭毛二端生。细胞壁坚韧，菌体较硬。（3）螺旋体菌,菌体柔软，螺旋数目因种而异(3-70)。用于运动的类似鞭毛的轴丝位于细胞外鞘内。 其它形状：包括柄杆菌、星形细菌、方形细菌及各种条件下细胞正常发育受阻而产生的异常形态 4、细菌细胞的大小

一般细菌大小的度量单位为微米（micrometer, μm）， 目前发现的细菌中最小的与无细胞结构的病毒相仿（约50 nm）；最大的肉眼可见（0.75 mm）。一般细菌的大小范围：球菌，0.5 ~ 1μm （直径）；杆菌0.2~ 1μm （直径） × 1~ 80μm（长度）；螺旋菌0.3~ 1 mm （直径） × 1~ 50 mm（长度）(长度是菌体两端点之间的距离，而非实际长度)。 5、细菌细胞的基本结构

6、细胞壁的主要功能

①固定细胞外形和提高机械强度，从而使其免受渗透压等外力的损伤。

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②为细胞的生长、分裂和鞭毛运动所必需。失去了细胞壁的原生质体，也就丧失了这些重要功能； ③阻拦酶蛋白和某些抗生素等大分子物质（分子量大于800）进入细胞，保护细胞免受溶菌酶、消化酶和青霉素等有害物质的损伤；

④赋予细菌具有特定的抗原性、致病性以及对抗生素和噬菌体的敏感性。 7、革兰氏阳性（G+）和革兰氏阴性（G-）细菌细胞壁的化学组成和结构特点 革兰氏阳性（G+）菌细胞壁特点：厚度大（20~80nm），化学组分简单，一般只含90%肽聚糖和10%磷壁酸。肽聚糖是真细菌细胞壁中的特有成分。磷壁酸为革兰氏阳性细菌细胞壁中特有的一种酸性多糖。

革兰氏阴性（G-）细菌细胞壁特点结构分为肽聚糖层和外膜层。其特点是肽聚糖层薄 (2-3nm)，层次多，化学组分复杂，强度低。

8、肽聚糖单体的化学组成和结构

肽聚糖单体中的化学组成：①双糖单位，由由N-乙酰胞壁酸（ NAM or M ）和 N-乙酰葡萄糖胺（ NAG or G ）l两种单糖之间以β-1,4-糖苷键[ M(1)-G(4)]连接形成。该糖苷键很容易被溶菌酶 (lysozyme) 所水解，从而引起细菌因肽聚糖细胞壁的“散架”而死亡。双糖单位是肽聚糖中糖链骨架的基本结构单位。②四肽侧链，由四个氨基酸分子按L型与D型交替方式连接而成，连接于糖骨架的N-乙酰胞壁酸分子上。③肽桥连接一条肽侧链的4位氨基酸和另一条肽侧链的3位氨基酸，变化多样，是不同微生物肽聚糖多样性的基础。目前所知的肽聚糖已超过100种，主要的变化发生在肽桥上。（附结构示意图）

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9、磷壁酸

革兰氏阳性细菌细胞壁上特有的化学成分，主要成分为甘油磷酸或核糖醇磷酸。

膜磷壁酸(又称脂磷壁酸)跨越肽聚糖层并与细胞膜相交联的，由甘油磷酸链分子与细胞膜上的磷脂进行共价结合后形成。其含量与培养条件关系不大。可用45%热酚水提取，也可用热水从脱脂的冻干细菌中提取。

壁磷壁酸，它与肽聚糖分子间进行共价结合，含量会随培养基成分而改变，一般占细胞壁重量的10%，有时可接近50%。用稀酸或稀碱可以提取。 磷壁酸的主要生理功能 (p41)

①其磷酸分子上较多的负电荷可提高细胞周围Mg2+的浓度，进入细胞后就可保证细胞膜上一些需Mg2+的合成酶提高活性； ②贮藏磷元素；

③增强某些致病菌如A族链球菌(Streptococcus)对宿主细胞的粘连、避免被白细胞吞噬以及抗补体的作用；

④赋予革兰氏阳性细菌以特异的表面抗原； ⑤可作为噬菌体的特异性吸附受体；

⑥能调节细胞内自溶素(autolysin)的活力，借以防止细胞因自溶而死亡。因为在细胞正常分裂时，自溶素可使旧壁适度水解并促使新壁不断插入，而当其活力过强时，则细菌会因细胞壁迅速水解而死亡。

10、革兰氏阴性细菌的细胞壁 （1） 肽聚糖

它的肽聚糖埋藏在外膜层之内，是仅由1~2层肽聚糖网状分子组成的薄层(2~3nm)，含量约占细胞壁总重的10%，故对机械强度的抵抗力较革兰氏阳性菌弱。 四肽尾的第3个氨基酸不是L-lys，而是内消旋二氨基庚二酸(m-DAP),一种只有在原核微生物细胞壁上才

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有的氨基酸。 没有特殊的肽桥，其前后两个单体间的连接仅通过甲四肽尾的第4个氨基酸——D-ala的羧基与乙四肽尾的第3个氨基酸——mDAP的氨基直接相连 ,只形成较为疏稀、机械强度较差的肽聚糖网套。 （2）外膜

位于革兰氏阴性细菌细胞壁外层，由脂多糖、磷脂和脂蛋白等若干种蛋白质组成的膜，有时也称为外壁。 a 脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）

位于革兰氏阴性细菌细胞壁最外层的一层较厚（8~10 …… 此处隐藏：2899字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……