高考生物：基因工程和蛋白质工程(3)

（1）构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶__________，对_______________进行切割。

（2）培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香

蕉细胞，应使基因表达载体A中含有_________________________，作为标记基因。 （3）香蕉组织细胞具有_________________________，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的

香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的____________。

考点定位：本题综合考查基因工程的应用。

指点迷津：基因工程是分子水平上的生物工程；构建基因表达载体时要选用限制酶对DNA进行切割，选出需要的目的基因，由图可知，目的基因是黑色部分，那么应该选择PstⅠ和EcoRⅠ两种限制酶切割后就可以得到目的基因。为了检测目的基因是否导入受体细胞，通常要在重组质粒上构建标记基因。 参考答案：

（1）PstⅠ、EcoRⅠ，含抗病基因的DNA、质粒， （2）抗卡那霉素基因

（3）全能性，脱分化、再分化。

8．农业科技工作者在烟草中找到了一抗病基因，现拟采用基因工程技术将该基因转入棉花，培育抗病棉花品系。请回答下列问题。

（1）要获得该抗病基因，可采用_____________、_______________等方法。为了能把该抗病基因转入

到棉花细胞中，常用的载体是______________________。

（2）要使载体与该抗病基因连接，首先应使用__________________进行切割。假如载体被切割后，得

到的分子末端序列为____________

，则能与该载体连接的抗病基因分子末端是

（3）切割完成后，采用_______酶将载体与该抗病基因连接，连接后得到的DNA分子称为__________。

（4）再将连接得到的DNA分子导入农杆菌，然后用该杆菌去____________棉花细胞，利用植物细胞具有

的_______________性进行组织培养，从培养出的植株中_________出抗病的棉 （5）该抗病基因在棉花细胞中表达的产物是（ ）

A．淀粉 B．脂类 C．蛋白质 D．核酸

（6）转基因棉花获得的______________________是由该表达产物来体现的。 考点定位：本题考查基因工程的整个过程。

指点迷津：基因工程有四步曲，解答本题时应紧扣这四步曲。获得抗病基因常用的方法是从细胞中直接分离目的基因或根据mRNA碱基顺序和蛋白质的氨基酸序列人工合成目的基因；在基因工程中，常用的载体是质粒可以先用限制性内切酶把目的基因和运载体切出相同

的粘性末端；再用 DNA 连接酶将运载体和目的基因连接起来,构成重组DNA分子；用导入重组DNA分子的农杆菌感染棉花细胞，并用组织培养的方法把这样的棉花细胞培育出个体，从中筛选出有抗病性状的棉花；最后进行鉴定，可把普通棉和抗虫棉在同等条件下让害虫吞食， 观察其效果即可。 参考答案：

(1) 从细胞中分离 化学方法人工合成 Ti质粒 (2) 限制性内切酶(限制酶) A (3) DNA连接酶 重组DNA (4) 感染 全能 筛选(选择) (5) C (6) 抗病性状

能力提升

1.

（1）饲料加工过程温度较高，要求植酸酶具有较好的高温稳定性。利用蛋白质工程技术对其进行改造

时，首先必须了解植酸酶的_________，然后改变植酸酶的___________，从而得到新的植酸酶。

（2）培育转植酸梅基因的大豆，可提高其作为饲料原料磷的利用率。将植酸酶基因导入大豆细胞常用

的方法是_________________________。请简述获得转基因植株的完整过程。 （3）为了提高猪对饲料中磷的利用率，科学家将带有植酸酶基因的重组质粒通过________________转

入猪的受精卵中。该受精卵培养至一定时期可通过_________________________方法，从而一次得

到多个转基因猪个体。

（4）若这些转基因因动、植物进入生态环境中，对生态环境有何影响？

考点定位：本题考查了基因工程，蛋白质工程，胚胎工程，生态工程的基本技术，并且深入考察基础知识。

指点迷津：对蛋白质改造时，首先要知道蛋白质的结构，有氨基酸序列构成的一级结构和折叠组装成的空间结构。转基因技术有四个基本步骤，经常采用农杆菌介导法，因为农杆菌容易侵染植物细胞，重组质粒被导入受体细胞时，经常用到显微注射法，而胚胎分割移植能快速繁育优良种畜，基因工程能够使个体表现出人们所需要的性状，减少环境中磷的污染，但可能会随个体的杂交。扩散到环境中去，造成基因污染。 参考答案：

（1）空间结构 氨基酸序列

（2）农杆菌介导的转化法 外源植酸酶基因→农杆菌→大豆细胞→大豆植株再生→鉴定 （3）显微注射法 胚胎分割移植

（4）减少环境中磷的污染，但该基因可能扩散到环境中。

2．根据实验原理和材料用具，设计实验确定细菌质粒的抗菌素基因所控制的抗菌素的类别。

实验原理：作为运载体的质粒，需要有标记基因，这一标记基因是抗菌素抗性基因。有抗性基因的质粒可用作运载体。

材料用具：青霉素、四环素各10万单位溶液，菌种试管，灭菌的含细菌培养基的培养皿，酒精灯，接种环，一次性注射器，无菌水，恒温箱 方法步骤：

第一步：取3个含培养基的培养皿，分别编号为1、2、3号，用三支注射器分别向3个培养基中注入1mL无菌水，、青霉素液、四环素液，并使之均匀分布之整个培养基表面。 第二步：_____________________。 第三步：_____________________。

结果预期：______________________________________________。 考点定位：标记基因和标记基因的作用。

指点迷津：运载体中所携带的一些抗性基因（如氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因）及发光基因等，能控制一些特殊物质的合成，利用这些特殊物质可以筛选运载体或重组运载体，这些基因就叫做标志基因。运载体中的标志基因最少要有2个，1个是用来检测运载体是否进入了受体细胞，另一个是用来检测目的基因是否被拼接到运载体上；第一个标志基因要保证其完整性，能够进行表达，若受体细胞表现出该基因所控制的性状，说明运载体已进入受体细胞；第二个标志基因是插入目的基因的部位，由于目的基因的插入破坏了其结构，不能表达其所控制的性状，若受体细胞没有表达出第二个基因所控制的性状，说明目的基因已进入受体细胞。本题较难理解，原因是对基因工程中的检测了解不深、不全造成的。两个基因的作用不同是导致做错该题的原因。 参考答案：

第二步：将接种环在酒精灯上灼烧，在酒精灯旁用接种环挑取等量菌种，分别培养在三个不同的培养基上，置于恒温箱内，培养一段时间。

第三步：将接种后的培养基放在37℃的恒温箱中培养24小时。 预期结果：

①1号培养基内细菌正常生长，2、3号内的细菌死亡，说明细菌无抗青霉素基因，无抗四环素基因；

②1、2号培养基内细菌正常生长，3号培养基内细菌死亡，说明细菌有抗青霉素基因，无抗四环素基

因；

③1、3号培养基内细菌正常生长，2号培养基内细菌死亡，说明细菌质粒无抗青霉素基因，有抗四环素

基因；

④1、2、3号培养基内细菌都正常生长 …… 此处隐藏：1495字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……