山东省微山县动物粪便中产志贺毒素大肠埃希菌血清型鉴定及耐药性

·70·中华预防医学杂志2017年1月第51卷第1期Chin J Prev Med，January2017,Vol.51,No.1

·论著·山东省微山县动物粪便中产志贺毒素

大肠埃希菌血清型鉴定及耐药性分析

邵纯纯胡彬毕振旺寇增强房明陈保立毕振强

【摘要】目的分析山东省微山县动物粪便中的产志贺毒素大肠埃希菌（STEC）的血清型及耐药状况。方法于2015年9月，采集山东省微山县共500份新鲜动物粪便样本（猪粪便145份，牛粪便

140份，羊粪便130份，鸡粪便61份，鸭粪便10份，狗粪便8份，鹅粪便6份），从中共分离出16株

STEC。采用血清凝集试验对STEC分离株进行血清分型，采用抗菌药物敏感性试验探讨其药敏性及

耐药性。采用PCR方法检测四环素类耐药基因（tetA、tetB、tetC、tetD）以及β-内酰胺类耐药基因

（blaSHV-1、blaCTX-M、blaTEM）共7种耐药基因。结果16株STEC中，13株来自猪粪便样本，2株来

自牛粪便样本，1株来自羊粪便样本。O157:H7型STEC为2株，非O157型STEC为14株;非O157型

STEC的血清型分布较为分散。在检测的16种抗生素中，对萘啶酸、强

力霉素、阿奇霉素、四环素、链霉素、氯霉素等8种抗菌药的耐药率分别为12/16、11/16、11/16、9/16、

9/16、9/16、8/16、8/16，对萘啶酸耐药率最高（12/16），（11/16、

11/16），对头孢吡肟、亚胺培南均不耐药。16株STEC中15

株5株，四重、五重耐药菌株各4株，六重、七重耐药菌株各1株。16株分离菌株中共检测出3种耐药

基因，分别为tetA、tetB、tetC。结论从微山县分离出的STEC菌株血清型多样且分布较为分散，对常

见抗生素具有多重耐药性，血清型复杂性及出现多重耐药性可能与菌株变异有关。

【关键词】产志贺毒素大肠杆菌；血清分型；耐药

基金项目：国家科技重大专项（2013ZX10004-203-002）

Serotype identification and antibiotic susceptibility of Shiga toxin-producing Escherichia coli in the

Weishan area in Shandong Province,China Shao Chunchun*,Hu Bin,Bi Zhenwang,Kou Zengqiang,

Fang Ming,Chen Baoli,Bi Zhenqiang.*Department of Epidemiology and Health Statistics,School of Public

Health,Shandong University,Jinan250012,China

Corresponding author:Bi Zhenqiang,Email:bzq63@8e7ee2e005a1b0717fd5360cba1aa81144318fe0

【Abstract】Objective To determine the serotypes and drug resistance profiles of Shiga

toxin-producing Escherichia coli(STEC)in animal stools from the Weishan area in Shandong Province,

China.To provide the basis for further study.Methods Five hundred animal stool samples(from pigs,

cattle,sheep,dogs and birds)were collected from the Weishan area and STEC strains were isolated from

these samples.Strains were serotyped by a serum agglutination test,and their drug resistance profiles were determined through antimicrobial sensitivity experiments.In this study,PCR was used to detect tetracycline resistance genes(tetA,tetB,tetC,tetD)and beta-lactam resistance genes(blaSHV-1,blaCTX-M,blaTEM).

Results Sixteen strains of STEC were isolated from animal stool samples.Thirteen strains were isolated

from pig stool samples,two from bovine stool samples and one from a sheep stool sample.Two of the strains

were identified as E.coli O157:H7,and other14strains were non-O157STEC of different serotypes. Antimicrobial sensitivity experiments showed that15of the strains were multidrug resistant.The rates of resistance were as follows:nalidixic acid(12/16strains),sulfisoxazole(11/16),trimethoprim and sulphame-thoxazole(11/16),doxycycline(9/16),azithromycin(9/16),tetracycline(9/16),chloramphenicol

(8/16)and streptomycin(8/16).Therefore,nalidixic acid showed the highest rate of resistance among the

strains,followed by trimethoprim and sulphame-thoxazole,and sulfisoxazole.Resistance to cefepime or imipenem was not detected.In total,three types of drug resistance genes(tetA,tetB and tetC)were detected

DOI：10.3760/cma.j.issn.0253-9624.2017.01.014

作者单位：250012济南，山东大学公共卫生学院流行病与卫生统计学研究所（邵纯纯、毕振强）；山东省疾病预防控制中心细菌性传染病防制所山东省传染病预防控制重点实验室（胡彬、毕振旺、寇增强、房明、陈保立、

毕振强）

通信作者：毕振强，Email：bzq63@8e7ee2e005a1b0717fd5360cba1aa81144318fe0

万方数据

中华预防医学杂志2017年1月第51卷第1期Chin J Prev Med，January2017,Vol.51,No.1·71·among the16strains.Conclusion The results showed that STEC strains isolated from animals in the

Weishan area were of a range of serotypes.The16strains of STEC isolated from animal stools in this area

were resistant to a number of antibiotics,with many strains displaying multidrug resistance.

【Key words】Shiga toxin-producing Escherichia coli;Serotyping;Drug Resistance

Fund program:National Science and Technology Major Project(2013ZX10004-203-002)

产志贺毒素大肠埃希菌（Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC）是产1种及以上志贺毒素

(Shiga toxin,STX)的大肠埃希菌的总称，是重要的食源性病原菌，可引起水样腹泻、出血性肠炎、溶血性尿毒综合征等病死率高的疾病[1]。WHO已将其列入新型食源性致病菌。

据统计，在患者体内已经分离出了472种血清型的STEC[2]。其中O157:H7是典型的致病血清型，但近年来在某些地区，非O157型STEC菌株比O157型STEC菌株在腹泻或溶血性尿毒症综合征患者体内更加常见，2011年5月，德国出现一起由O104:H4感染引起的暴发疫情，且随后波及法国等其他欧洲国家，非O157型的STEC菌株的重要性也日渐被人们关注[3]。

抗生素药物在人类临床治疗、农业、畜牧业生产等领域的广泛使用，使细菌耐药已经成为世界性的公共卫生难题。目前，大肠埃希菌已经被确定为耐药性检测的指示菌株[4]，因此，及时准确地了解产志贺毒素大肠埃希菌对常用抗生素的耐药性，并检测其携带的耐药基因，可以为临床用药提供相应信息，并对相关疾病的预防具有重要意义。

材料与方法

一、材料

（一）菌株来源

于2015年9月，以山东省微山县为研究场所，采用随机数字表法抽取5个符合条件的村落（村内养殖家畜家禽农户数量较多，且地理位置散在分布于微山县各个方向）。通过与当地兽医站医生联系，获取养殖家畜、家禽农户数量较多的农户名单，采用随机数字表法抽取20户，入户采集农户家中散养家畜或家禽的新鲜粪便，每户采集5份，共采集500份新鲜动物粪便样本（猪粪便145份，牛粪便140份，羊粪便130份，鸡粪便61份，鸭粪便10份，狗粪便8份，鹅粪便6份），从中共分离出16株STEC。

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