sTLR4的研究进展(2)

　　在研究MBL对白色念珠菌诱导的细胞反应的影响时， 发现MBL能减低白色念珠菌诱导的TLR4表达， 用抗TLR4抗体能抑制MBL与白色念珠菌诱导的细胞结合， 提示TLR4是MBL作用位点。免疫共沉淀试验显示MBL能与s TLR4共沉淀， 进一步验证了MBL与TLR4的相互作用[15].

　　在研究人类β防御素 （Humanβ-defensin 3, HBD-3） 调节免疫反应的机制时， 用s TLR4代替TLR4胞外域， 发现s TLR4能与HBD-3结合， 且s TLR4能竞争性抑制HBD-3与im DC结合， 证明HBD-3与im DC的结合位点与TLR4有关[16].

　　在研究代谢标记的脂低聚糖 （Lipooligosaccharide, LOS） 和MD-2的纯化复合物[3H]LOS-MD-2与放射性碘化标记内毒素-MD-2复合体LOS-MD-2[125I], 这两种复合物与TLR4的结合性能， 用s TLR4直接比较两种标记LOS-MD-2的与细胞膜上TLR4受体结合性能[17].

　　2.3 作为炎症诊断工具

　　TLR4作为先天性免疫应答的重要受体， 能识别病原体相关分子模式 （Pathogenassociated molecular patterns, PAMPs） 和危险相关分子模式 （Danger-associated molecular patterns, DAMPs） , 偶联信号转导途径， 诱导NF-κB的活化， 产生大量的炎症因子。TLR4基因敲除可使机体尤其是内脏脂肪组织处于低度炎症状态， 免疫细胞的数量和比例失调[18].s TLR4被认为是TLR4的负调节机制之一， 在炎症时水平会升高， 可作为炎症诊断的生物标志物。

　　在口腔扁平苔藓患者的静息唾液中， 检测到s TLR4水平显着升高[7].Ten等深入探究各种炎症疾病中s TLR4的水平， 发现感染性炎症患者的血清s TLR4水平显着高于非感染性炎症患者；对比病毒感染患者， 细菌感染患者的超敏C反应蛋白和s TLR4浓度更高[8].在患骨关节炎的患者的掌腕关节和膝关节的关节液中s TLR4水平显着高于正常人[9].在动脉瘤蛛网膜下腔出血患者的脑脊液中， s TLR4水平随时间推移显着上升， 但是有一定的延迟[19].在非酒精性脂肪肝和肝纤维化患者中， 血清s TLR4水平显着高于正常人[20], s TLR4水平随肝纤维化程度加深而升高， 在一定程度上能预测非酒精性脂肪肝和肝纤维化以及疾病的进展。在乙型肝炎病毒e抗原 （HBe Ag） 阴性的慢性病毒性乙型肝炎患者的血清s TLR4水平显着高于正常人[21], 且与HBV DNA及丙氨酸氨基转移酶水平成正相关。

　　2.4 s TLR4在癌症中的作用

　　研究证明在结肠癌、乳腺癌[22]、胃癌等不同的肿瘤组织中， TLR4的表达较正常组织均有所升高。TLR4的活化能引起促炎因子和其他介质的产生来抵抗病原微生物， 而TLR4的过度表达则会促进肿瘤的发生、发展、免疫逃避[23].而s TLR4作为TLR4的负调节机制之一， 在癌症患者的血清中水平显着升高， 与癌症患者的预后有密切关系。

　　在研究非小细胞型肺癌 （NSCLC） 患者的预后时发现NSCLC患者血清中s TLR4水平显着高于正常人， Ⅱ期或Ⅲ期NSCLC患者的血清s TLR4水平明显高于Ⅰ期NSCLC患者， 而Ⅳ期NSCLC患者血清s TLR4明显低于Ⅲ期NSCLC患者， 即在局限性NSCLC中血清s TLR4水平随TMN分期增加而增加， 而在转移性NSCLC患者中， s TLR4水平显着降低[24].此外， TNM分期Ⅰ期和Ⅱ期的癌症组织中TLR4表达水平与血清s TLR4水平呈负相关， 而在全阶段患者和Ⅲ期患者中TLR4表达与血清s TLR4水平无明显相关性[25].血清s TLR4水平与NSCLC的病理类型也有关系， 鳞癌患者血清s TLR4水平显着高于腺癌患者。在血清s TLR4水平高组的NSCLC患者的平均总存活数显着高于s TLR4低组， 证明血清s TLR4高预示癌症预后良好。

　　探究结直肠癌的新型治疗方法时， 发现s TLR4/MD-2复合物可在体外和体内试验中通过下调长链非编码RNA （IncRNA） H19表达来抑制结直肠癌的迁移和侵袭[26].此外， 研究人员发现在多发性骨髓瘤患者的血清中， s TLR4的浓度显着高于正常人， 而且多发性骨髓瘤不同时期的血清s TLR4浓度也有差异， Ⅱ期组血清s TLR4浓度显着高于Ⅰ期组， Ⅲ期组血清s TLR4浓度显着高于Ⅱ期组， 表明血清s TLR4浓度检测可用于多发性骨髓瘤的早期诊断[27].

　　3 总结

　　s TLR4作为TLR4的负调节机制之一， 在炎症反应中水平显着升高， 因而能作为炎症反应的生物标志物。然而， s TLR4在鉴别感染性炎症与非感染性炎症以及细菌性感染与病毒性感染时的准确性并不能超过超敏C反应蛋白[8], 因而只能作为鉴别炎症类型的辅助诊断手段。而且， 脑脊液中的s TLR4释放延迟， 会对炎症的及时诊断产生影响。在研究罗素伐他汀对于未治疗的HIV患者的免疫活化标志物的作用时发现， HIV患者血清s TLR4与正常人相比无显着差异[28], 这与其他研究有很大差异， s TLR4作为炎症标志物的准确性有待进一步验证。

　　s TLR4在结构上与TLR4胞外域极为相似， 可竞争性抑制细胞膜上TLR4与其配体结合， 因而能阻断TLR4信号通路， 从而抑制相关配体引起的炎症反应。但是s TLR4单独并不能结合LPS等配体， 必须要与单体MD-2形成复合物才能与细胞膜表面TLR4竞争性结合配体， 大剂量的MD-2很难制备， 状态不稳定， 易沉积形成大量无活性的二硫化低聚体， 为s TLR4的应用带来了困难。此外， 这些试验只是验证在体外和小鼠体内， 在其他动物甚至人类体内s TLR4/MD-2能否抑制炎症反应还有待进一步验证。

　　总之， 尽管存在种种限制和未知， s TLR4的发现意义重大， 不仅能作为TLR4的一种负调节机制， 还能作为炎症的拮抗剂， 抑制炎症；作为炎症的生物标志物， 预示体内出现炎症反应；作为某些肿瘤的标志物， 反映肿瘤预后；代替TLR4胞外域， 验证各种信号分子与TLR4的相互作用。

　　参考文献

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　　[2]Iwami KI, Matsuguchi T, Masuda A, et al.Cutting edge:naturally occurring soluble form of mouse Toll-like receptor 4 inhibits lipopolysaccharide signaling[J].Immunology, 2000, 165 （12） :6682-6686.　　

　　[3]杜金苓， 韩红兵， 张宝路， 等。绵羊s TLR4基因的克隆表达及定位[J].中国畜牧杂志， 2011, 47 （9） :28-30.Du JL, Han HD, Zhang BL, et al.Cloning expression and localization of s TLR4 gene in sheep[J].Chinese Journal of Animal Science, 2011, 47 （09） :28-30.　　 …… 此处隐藏：1703字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……