锌指核酸酶技术在动物转基因中的研究进展1

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遗传育繁

中国畜牧兽医 2 01年4第 4 1卷 8期第

锌核指酸酶术技在动物基转中的研因究进展袁玉国 彭，秋。玲 1(.扬州 学大兽学医院 ,江苏动省物重要疫 与病人兽共患病控防协同新创心，中江苏扬 2州 25 0 09;

2.扬大学动物州科与学技术学院，江 扬州苏2 250 0 9; 3 .宜春学 院化学与生物工程学 ,院西宜江春

33 6 0 00)

要摘：锌指核酸 ( z酶 i n c—f i n ge r un cl e as es, Z F sN) 术技近是年 来展起发来的种一基因修饰技 术，用利ZF s可 N特异识靶别位

点DNA序列并使 断裂其。与传统基 同于源重组基因的打靶相比 ,ZF N能使打靶效率s提高1 0 0 0 0倍，并 0使基因断裂与变突修复达同到效果样。Z FNs经已应用于多种 物生，括昆包虫、 两栖类生物、虫线、植物、多 动种物和人类细 胞。这些 应用提高了人们对复杂生理系统的理解，Z使 NsF成一为种生产 转因基动物 细、胞系和植的有物力工具，并在疗治人类疾病中发挥重要 作用。章对 Z文F Ns技 术原理及其应用于哺乳类动转物基的研因进行究了顾回和 望展关键词。:锌指核酶；动酸物转基因；因基靶打中图分类：号Q7 8 文标献识码：A文章编号：1 6 71 - 7 23 ( 62 01 4 ) 80— 1 80— 8 0 5

因组基靶修饰是近向来年生科学命研究热点的之，一特别在基因是能功分析、 生模产式动物、治 人疗类疾病和优良畜家育种等方，面都具有广阔应的收稿期日： 2 01 4 -0 1 —1 7

用前景 H( a su hci l -d uQ int er n,等2 0 2 1;M eye r等 2, 01 0;

U r n vo等，2 1 00 )基于。源同组重的传统基 因组向靶修技饰术，由于费时、效低率 1( 0~ 10 ) 特、异性不 高等缺点，没被有广应用 ( P泛o r t e su等，2 00 5)。对大 多模数生式物研的证究，实染在色体靶位点引入上双链断裂 (d ou b l e -s tr a nd b re a k s D S B s )可，大幅提高体供DN和靶A基因座之间同重源组的效。率锌指核酸酶 z ( nic -f ni g er n u c l e sa e sZ,ENs )引入 NDA点定D S Bs 作者简 介：袁玉(国 1 9 7 一8),,男西人江，博士，研究向方：物胚动胎工程转与因基克隆。

通作信者：彭秋(玲1 97 8一，女，)西人江，究方向研：动物遗传 育种。 E—am il:9 7 8 3 5 3 86 5@q q . con r

基金项且：家国自然 科学基金项目(3 1 101 8 7 1 );江苏高校优 势学科建设工程资项目；助国中士后博科基学金资助项;目国家 转基生因物新 品种培育重大专( 2项 0 1 3ZX08 0 0 8— 0 04 )并高效导介基因定点变，突给因基组向修靶饰带来了新望希 L(e,等 2 01; R06 m等 y, 2O1 0 )。

F Ns技Z术是近年 来发展起来的种基一修因饰t i on o f o l i ve o i s lb y ne ar— nif r ar de s p ec tr s oc o py[ ] .JJA O C,S1 9 95, 3 (7 2): 28 92~9 2 .

1 5 No d a I A. dv a n c e s in t w - od mein s io n l cao rre l at i o n p se c tr o s c op[yJ] .Vi br a i tnoa l Sp e tc ros o c p, 2 y00, 3 64( 2:) 41 3~1 6 .5

1 6 S Mea S, O z aki Y. W a v ele ng t h— wa vel e n g th n da asmp el— a mspl e t o—w d ime n i osn a l co r er la t i o ann a lys e s o f s oh t— raw ve n ea r— n f ria r e d

81 Y a n g R J Li, u R,uX K , Xe t a 1. lCa ss if i c a t i n o of d aul t r ea t d emi l kw i th t he pa ar me t e r iz at i o n o f 2D o r cre l a t i no s pe ct or sc o p a y nd

s pe ct ra o f

arw i ml[k J] .A ppl i e d Sp e ct r o sc o p, y 02 10, 5( 5 )2: 16 3~ 1 7 2 .

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17 W es e y lI j,B ran e R s,j M Ge[I ! .A E j .M e s a ru eme n t o f a du t elr 一a

St u d y o n FAB PT ra n g se in c M cie b a uo t t e h f fE ec t s o f Gr wt ho a n d e v Del op me n tANF a n - lHu, IDNG X i nga— bin , ILU Xi n - f eg n, ILU Hal— u x e,GU O on g (H1 Co.l l e ge o f nA ima Sc ile n c ae nd V et e rin a yr eM idc i n,Te ian j i n gA r icu lt u ra l n Uiv e r s i ty, Ti n a j n i 3 0 0 3 8 4, Ch i na;

2. C e t n er f o r A gr ic ul u r tal A n al ys is a nd Me as u e remn t, T i an j in A g irc ult u r l a nU v eir s i t ,y iTa n j i n 3 0 0 38 4 , C ih a n ) Ab st r a tc: n I he t r ese ra hct,i s se u b io s ipe s,f u ori e r i nf ra r d esp c te ru m,and t h e ap p a re tn g r wot h i nedx we r e u sed t o t e s t a n d

an al y s ehe a rt ,s l iv e s,srk e le t a l m us c l ,eut e r u s, o a r v a n si o t fhe fi sr tan d t h e s e c on d fi l i a l g en er a t i o n AB P F

t r nas g n ei c m i e cTh. er e s u tls show ed t h at t h r e e w sa on si n i g f c ain t i dff er ence b t ee w e FnA BP t r a n gse ni c im c e a dn wi l d— tp ey mi c e a nd g e n e i tc s t abi ilt y. K ye wo rsd: m ice t;ran s egni; c in fr a re d psec t r os cop y;ti ss eu se c t i o;n g r ot hw an d d e evl o mpe n t

中

国畜牧兽医 2 0 1年4第 41第卷8期

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术技。由该技于术理已原逐阐明渐，部且构建方分 操作简法单可对各，体种外培养的细胞胚和胎细胞进基行因操作 ,已成一为种新型基因打技靶术之一。

可结合9个及以上 基碱度长的位靶点 B ( eu me r等， 0 2 80)。

FZN s一由个别识特定 DN A序列锌的指蛋白人工 ZF Ns是由锌指蛋白和非特异性核酸内酶切 ( F o k)工成组融的蛋白，合其锌指 构结域特异识别靶 点两位端D AN,同时依赖Fo k I的用作切割相双应 D链AN从，而致导双链D AN断 裂。已有 究研结

域和F ok组工成， D其NA结合域与特定D AN序列结合，并与非特异性核酸内切酶形成异源二体聚后，

在结合位点处挥剪发切作用使 D N双A链发生断裂 ( L i u等， 2 0 1 0。当 Z )F Ns行进DN A定切点割 时，果如存在一段同源序列，则促使基因 组实现 DAN定点置换，当不存同在源序列时，剪位点切以非同源末连接端( non h o—m loo g o u s e nd j o in i n g,NH J E方)果表，明ZF Ns可大极提高基因组靶向修饰的效率。 同时，随 Z F Ns着介导因打靶基技 术的发展成和，熟为业农育种、基治疗因人和类器官移植等提了供新思路 ( Ha u s ch li— Qud in t re n,等 2 01;2L等 e,2 0 10 ; P o r t u se等，20 05; 4R ym等 2, 010; U rn o v等，2 0 1O )。式修复，发基引因定点变或突入插基碱序列因。此，过基通因程工造锌指改结构域，增加指数目锌使，锌利用 Z FsN对人体细胞、胎胚细干胞和诱 多导干能细的不胞同靶因基座进行靶修向饰，可正纠某些遗传陷缺为，服克许多现阶段无法治愈的疾病提了供强大治疗工 具( Zo u等， 020 9 ),且而可快速建立医学动物模型并节省大量实验经 费 (e y eMr等， 201 )0。

核指酶对复酸基杂因组中的长特更定DA序N列进 定行点切割 ,并借 …… 此处隐藏：19087字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……