UGTlAl＊6和＊28基因多态性与伊立替康毒性关系研究

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医药论坛杂志

2 0 1 3年 7月第 3 4卷第 7期

J Me d i c a l F o r u m V o 1 3 4.

No . 7 J u l y 2 01 3

U G T 1 A 1术 6和冰 2 8基因多态性与伊立替康毒性关系研究张睿诂，闫良，刘晓嘉，张磊，袁文华，张贝贝，张蓓，宋敏，张明智。,张莉蓉1 .郑州大学基础医学院药理教研室，郑州 4 5 0 0 0 1; 2 .郑州大学第一附属医院肿瘤科

摘要：目的探讨 U G T 1 A 6和 2 8基因多态性与伊立替康治疗癌症患者的不良反应发生率及严重程度之间的关系，为临床个体化用药提供依据。方法应。结果采用P C R扩增目的基因片段，通过直接测序法分析 8 5例接受伊立替康治疗的肺癌或消化道肿瘤等患者的 U G T 1 A 1 6和 2 8基因型。同时观察应用伊立替康治疗中出现的不良反 8 5例患者中， U G T 1 A 1 6野生型 G/ G有 4 6例( 5 4 . 1%),杂合突变型 G/ A有 3 0例 ( 3 5 . 3%),纯合突

变型 A/ A有 9例 ( 1 0 . 6%); U G T 1 A1 2 8野生型 T A 6/ 6有 6 4例( 7 5 . 3%),杂合突变型 T A 6/ 7有 1 9例 ( 2 2 . 4%), 纯合突变型 T A 7/ 7有 2例 ( 2 . 3%)。8 5例肿瘤患者中， 6突变型 ( G/ A和 A/ A)可以增加发生 3级以上腹泻( 1 2 . 8%v s 2 . 2%, P<0 . 0 5 )的风险； U G T 1 A 1 6和 2 8 8突变型个体， 3级以上中性粒细胞减少 ( P>0 . 0 5 )、白

细胞减少 ( P>0 . 0 5 )等的发生率与野生型相比有升高趋势。结论或 2 8突变型个体其他不良反应的发生率有增加趋势。

中国患者中 U G T 1 A 1 2 8突变分布频率较

低，而U G T 1 A 1 6突变分布频率较高； U G T 1 A1 6基因突变可以显著增加患者发生 3级以上腹泻的风险，而 6 关键词：伊立替康；基因多态性； U G T 1 A 1;不良反应；个体化用药中图分类号： R 7 3 0 . 5 3 文献标识码： A 文章编号： 1 6 7 2— 3 4 2 2 ( 2 0 1 3 ) 0 7 - 0 0 9 8— 0 3

伊立替康系喜树碱半人工合成物，广泛应用于结肠直肠癌、肺癌、胃癌、卵巢癌等实体

瘤的治疗。

纯度合格。 U G T 1 A 1 6和 2 8基因分型采用 P C R 扩增目的片段，产物直接测序分析。P C R扩增引物序列为：正向引物序列 5’一C C T G C T A C C T T F G T . G G A C T G A C一3’,反向引物序列 5’一 T G C . C C G A G A C T A A C A A A A G A C T一3’; P C R扩增采用

伊立替康可显著改善胃肠肿瘤患者的生存期，显示出很好的疗效和生存优势，但应用受到其可能发生的严重毒性的限制，伊立替康的剂量限制性毒性主要为迟发性腹泻和中性粒细胞减少，两者的发生率分别可达到 4 6%和 3 0%,严重可导致死亡。因此

2 5 L体系包括：正向引物、反向引物各 1 t x L,基因组D N A模板 2 , P C R m i x预混液 (大连宝生物工程有限公司 ) 1 2 . 5 I x L, d d H 2 0 8 . 5 I x L。P C R反应条件为： 9 4℃预变性 5 a r i n,然后 9 4￣ C 1 5 s、 6 0￣ C 2 5 s、 7 2℃3 0 s,共3 5个循环，最后 7 2%延伸 7 mi n。2% 琼脂糖凝胶电泳观察 P C R产物条带是否清晰单一

急需探寻能够预测化疗毒性的指标用于指导临床， 本课题对 8 5例接受含伊立替康治疗的肺癌或消化道等肿瘤患者进行分析，检测 U G T 1 A1 6和 2 8基因的多态性，观察记录患者对药物的反应，以探讨

U G T 1 A 1基因多态性与伊立替康不良反应之问的关系，从而使伊立替康在临床上得到安全有效的应用， 达到个体化用药的目的。1材料与方法

,

符合标准后，直接测序，测序结果用 C h r o m a s软

件显示，采用人工校读分析 U G T 1 A1 6和 2 8基因型。

1 . 2 . 2不良反应

观察记录每一个化疗周期中患

者发生腹泻、白细胞和 (或)中性粒细胞减少、呕吐等不良反应的情况，依据美国国立癌症研究院 ( N a t i o n a l C a n c e r I n s t i t u t e, N C I )提出的肿瘤药物不良反应分级标准 N C I—C T C ( 4 . 0 )对药物的毒性进行评价。

1 . 1 资料

收集 8 5例 2 0 1 1年 1月至 2 0 1 2

年 9

月期间在郑州大学第一附属医院住院并采用含伊

立替康化疗的肺癌或消化道等肿瘤患者的外周血液样本，进行 U G T 1 A 1 6、 2 8基因多态性的检测。观察记录在化疗过程中出现的不良反应情况。所

1 . 2 . 3统计学分析

应用 S P S S 1 3 . 0软件对所有

有患者均采用伊立替康或含伊立替康的化疗方案进行治疗。1 . 2 方法

数据进行统计学分析，不同基因型之问不良反应的比较采用 x检验或 F i s h e r’ S精确慨法率，以P <0 . 0 5为差异有统计学意义。

1 . 2 . 1 U G T 1 A1基因分型

化疗前抽取患者外周

血3 m L,采用 E D T A抗凝；使用酚一氯仿法抽提基因组 D N A,采用 N a n o D r o p 2 0 0 0测定 D N A浓度和

2结

果

2 . 1 病人特性 8 5例患者中， 5 4例为男性