长春花生物碱的提取_分离_鉴定_制剂研究概述

生物相关的

!""#年第$%卷第$&期综述报告

长春花生物碱的提取、分离、鉴定、制剂研究概述

于兆海，陈

刚

#$$%&&）

（山东省青岛胶南人民医院，山东胶南

及科学研究提供一定的借鉴作用。

关键词：长春花；长春新碱；长春碱；提取；分离；鉴定；制剂

中图分类号：!"#"$%&；!"#’

文献标识码：(

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文章编号：&))*+’,-&.")),/&’+))#0+)-化学合成法

长春瑞滨是一种广谱的抗癌药物，其主要原料为7(?。陈永江对关键步骤氯化反等B!C用硫酸长春碱合成抗癌药酒石酸长春瑞滨，应和缩环反应均作了相应改进，使之更适合于生产。!")

生物技术法

但它们在植物中的目前主要从天然植物中提取7(?和789，

含量极低，而化学合成法和半合成法的制备效果也不太理想。为了更有效地生产长春花生物碱，科学工作者正致力于将生物技术应用于长春花的研究与开发。

组织培养：张秀省等BJC以长春花叶和子房诱导的愈伤组织为材并对%种不同愈料，进一步通过化学诱变得到了#种变异细胞株，伤组织的生长以及吲哚生物总碱、阿玛碱、长春质碱的生物含量进行了分析比较，期望为今后长春花细胞工业化生产药物的开发提供比较理想的细胞株。

细胞工程：用不同质量浓度的乙烯利、乙酰水杨酸、色氨酸溶液分别处理温室盆栽长春花植株，于#I后测定叶片中的总吲哚生

（9RPSR(8）法测定7(?和长物碱含量，并采用反相高效液相色谱春质碱的含量，结果发现经处理后植株中E种成分的含量均有明显提高，并确定了最合适的处理质量浓度B/&C。

发酵工程：通过对长春花叶内生真菌进行分离，筛选出了/株

（U(8）无孢菌群菌株JQ8TE，并对其发酵提取物进行薄层色谱法和（SR(8）法分析，结果表明此菌株能够产生789B//C。高效液相色谱

真菌易于培养，可以通过育种手段和控制培养条件等措施来大幅度提高其有效成分的含量，便于组织工业化生产。

遗传转化工程：遗传转化系指利用重组,VW、组织培养或种质系统转化等技术将外源基因导入植物细胞或组织中获得转基因植物的技术。孙敏等B/#C用发根农杆菌感染长春花，诱导出毛状根，通过离体培养、株系筛选，提取出了7(?和789，为长春花生物碱的工业化生产和产业化开发奠定了基础，同时也为应用转化毛状根技术获得药用植物次生代谢产物开辟了一条新的有效途径。随着培养技术的改进和合理反应器的设计，以及控制789及7(?、文多灵合成的关键酶基因克隆出来并转化成功，寻求高产的长春花植株或细胞株一定会成为现实。

化学诱变：用不同质量浓度的甲基磺酸乙酯’OXM*处理长春花愈伤组织，挑选成活愈伤组织块继代扩大培养。结果发现，用OXM处理的长春花愈伤组织发生了突变，与对照组相比，不仅生长快，而且总吲哚生物碱含量高B/EC。化学诱变是人工获取突变体常用的手段之一，可筛选高产吲哚生物碱OXM又是较常用的化学诱变剂，的稳定细胞系，并利用细胞工程技术获取药用成分。它有可能成为一种理想的方法。"#"!

分离*+,法

对长春碱硫酸盐B/%C的分离常用氧化铝板、硅胶+板。U(8法分

摘要：综述从天然植物长春花中提取、纯化抗肿瘤药长春生物碱的方法，同时介绍相关生物碱的含量测定方法与制剂概况，以为工业生产

（!"#$"%"&#$’(%)(*’(）’()*长春花为夹竹桃科植物长春花

性凉，味微苦，具有平肝、抗癌、解毒的功效，可用于+),-.)的全草，

治疗高血压、恶性肿瘤、疮疡等。迄今已从中分离出/&&余种生物碱，其中以长春新碱’01.231451.6，789*和长春碱’01.2:;6<=->;:451.6，现将长春类生物碱的药学研究进展综述如下。7(?*最具价值。&提取!"!

溶剂提取法

醇类溶剂提取法：@:;A:.等B/C和D-0:.-0124等B#C将全草用氨水浸润后再用甲苯提取，但此法会使生药中的一些中、强生物碱以游离形式被提取出来，导致纯化难度加大。随后改为含水甲醇浸提，再用硫酸酸化，所得生物碱含量比碱水浸取高E&F%&倍。利用甲醇使得成本降低，也减少了提取步骤，但甲醇极性较大，因此其选择性不够理想。醇提取液中含有生物碱及其盐，尚含大量脂溶性杂质，且稀醇提取液含水溶性杂质，尚需进一步处理。

亲脂性有机溶剂提取法：由于大多数游离生物碱极性低G可用氯仿、二氯甲烷、苯等提取。为了只提取药材中的弱碱性生物碱，可采用水甚至稀有机酸水代替碱水润湿药材，再用有机溶剂提取。若提出总生物碱后再行分789及7(?在总生物碱中含量极微，

离，不仅操作烦琐，而且得率极低，故生产上采用药粉用水湿润后用苯提取，使大部分碱性较强的生物碱未被提出，这样有利于进一步纯化。

BEC

酸水提取法：常用&)"HF/H的乙酸、硫酸、酒石酸等为溶剂。此法提取所得溶液体积较大，浓缩困难，故可配合离子交换树脂法或有机溶剂萃取法进行处理。+6I6-.等B%C用含少量硫酸的因7(?等成分可转化为盐，更易被甲醇提出，J&H甲醇提取全草，提取率也有所增加。+<.:46=63:等B"C将甲醇改为乙酸水溶液提取，再用氨水碱化，最后用二氯甲烷萃取。该法提取率高、步骤简单、有机溶剂用量少，增加了操作安全性，利于环保，但提取物中杂质较多，需有成熟的柱色谱方法配合，方可得到高纯度产品。酸提液中含有树脂、叶绿素等杂质，若碱化后直接用氯仿、二氯甲烷等萃取，易形成乳化层，使7(?不易被萃取完全；若先用石油醚脱脂，然后碱化再萃取，则乳化现象将大为改观。长春生物碱对光和热不稳定，在提取和储存过程中注意避光与避热。

（$%&法）!"#超临界流体萃取法

以前的提取法周期长、步骤繁杂，且需用大量有毒溶剂。2K-1等B$C

以碱化的超临界8L#为溶剂提取，从该植物中分离得到了789与无毒、环境友好、使用安全方便、萃7(?B$C。MNOP8L#法具有常温、取时间短、产品质量高等特点，但对油溶性成分溶解作用强而对水溶性成分溶解作用低。!"’

超声波提取法

罗猛等BQC以超声波法提取7(?，并确定了最佳提取工艺。超声而且提高了长春质波提取法提取7(?不但较其他方法更具优势，

碱、文多灵等E种生物碱的提取率。789、

中国药业!"#$%&"%’(%)*+,#)%-.!"

生物相关的

综述报告

离量太少，常用来研究少量的样品制备或筛选工业生产中的柱色谱流动相，不适合于大生产。!"!

柱色谱法

一次过柱：一般是过一次碱性氧化铝柱，除去极性较低的碳氢化合物及部分中性、酸性物质。流动#$%及#&’均为中极性物质，

苯(氯仿、苯(二氯甲相的极性不宜太高，一般用苯(石油醚)*+,、烷、二氯甲烷(氯仿、乙酸乙酯(石油醚等作流动相，以不同比例等度或梯度洗脱，洗脱产物依次为#&’、长春次碱和#$%的混合物、该法是目前大规模生产的方法，缺点是产品纯度不够高。#$%。

两次过柱：将粗提的生物-./0123240)5,采用两次过柱的方法，

（6278092:&;<=）柱，以二氯甲烷(碱先过羟丙基交联葡聚糖凝胶

甲醇或氯仿(甲醇作流动相，分段收集流分；然后二次过硅胶柱进

一步纯化，用*>?*=>甲醇(氯仿梯度洗脱即得所需的生物碱。多次过柱：先经氧化铝@AA0.4%08B0/等)*5,经C次过柱纯化，

均用乙酸乙酯(石 …… 此处隐藏：7179字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……