LC-20AT高效液相色谱仪操作规程

1、目的

明确LC-20AT高效液相色谱仪的使用要求、基本操作步骤、维护、保养方法， 以便于按照规程进行仪器操作。

2、范围

本规程适用于LC-20AT高效液相色谱仪的使用操作。

3、责任者

分析员执行本规程，QC经理及指定人监督本规程的实施。

4、内容

4.1 系统组成：本系统由1个LC-20ATvp溶剂输送泵、Rheodyne 7725i手动进样阀、SPD-20A紫外-可见检测器、N2000色谱工作站和台式电脑等组成。

4.2 准备

4.2.1使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20min。

4.2.2 根据待检样品的需要更换合适的色谱柱（柱进出口位置应与流动相流向一致）和定量环。

4.2.3 配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45μm滤膜过滤。

4.2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。

4.3 开机

4.3.1接通电源，依次开启不间断电源泵、检测器、工作站，待泵和检测器自检结束后，打开电脑显示器、主机。

4.3.2 启动N2000色谱工作站

4.3.2.1确认仪器、工作站启动后，打开计算机电源，并从Windows的桌面双击N2000色谱工作站图标开启。

4.3.2.2 显示通道对话框，选择“打开通道1或2”后，点击确定。

4.3.2.3 进入实验信息对话框，输入相应的实验标题、实验者、实验单位、实验 简介。

4.3.2.4 点击“方法”，在“采集控制”对话框中输入“采样结束时间”。

4.3.2.5 分别点击“积分”、“组分表”、“谱图显示”、“报告编辑”、“仪器条件”， 进行相应的设置。

4.3.2.6 单击“数据采集”，进入“数据采集”窗口，点击“查看基线”进行采 集数据。

4.4 设置分析参数

4.4.1 设置新的波长参数时，请从通过SPD-20A检测器中“func”按钮打开的列表中选择PARAMETER，设置所需的波长，按enter确定。

4.4.2设置新的波长参数时，请从通过LC-20AT检测器中“func”按钮调至流速位置，设置所需的流速，按enter确定。

4.5 测定样品

4.5.1观察屏幕图象的基线达到平衡，按一下SPD-20A上的“Zeros”键，使检 测器回零。

4.5.2 点击计算机“N2000online”中的“零点校正”按键，使绘图基线自动回零。

4.5.3进样后，顺时针方向旋转进样阀至底，“N2000online”自动开始进行数据采样，同时自动进行实时分析。

4.5.4 样品检测完成后，点击“N2000online”中的“停止采集”停止数据采集，终止实时分析，采样及计算，定量计算结果随即在屏幕上自动绘出。若选择了打印图 谱及打印机开启，则同时在打印机上输出定量计算结果。

4.5.5 进样，揿计算机上的“F7”，启动采样，工作站开始进行实时分析及计算处 理。

4.5.6 揿“F8”键，终止实时分析，采样及计算处理，定量计算结果随即在屏幕 上自动绘出。若选择了打印图谱及打印机开启，则同时在打印机上输出定量计算结果。

4.6 清洗系统和关机

4.6.1数据采集完毕后，关闭检测器，继续以工作流动相冲洗10min后，换水冲洗。

4.6.2 清洗进样阀

4.6.2.1 用启动注射器吸10ml超纯水；

4.6.2.2 将注射针导入口冲洗头（Rheodyne部件号7125-054）连接到注射器出口上（不要针），并将它们一起接到进样口上；

4.6.2.3 使进样阀保持在Inject位置，慢慢将水推入，水将通过注射针导入口、引导管、注射针导入管和注射针密封圈，由样品溢出管排出。

4.6.3 清洗柱

4.6.3.1色谱柱先用甲醇：水（1：9）以1ml/min冲洗40min以上，再用甲醇或乙腈冲洗20min。

4.6.4 用水冲洗柱后，分别用20ml超纯水冲洗柱塞杆外部和法兰盘上小孔。

4.6.5 清洗完成后，先将流速降到0，再依次关闭泵、检测器，断开电源。

4.6.6 填写使用记录。

4.7注意事项：

4.7.1本仪器属精密仪器，环境应防尘、防震、防潮，色谱系统完成试验后，应 进行必要的清洗，包括色谱柱。

4.7.2本系统使用流动相为有害挥发性物质，应具通风条件。

4.7.3关注柱压，不得大于300bar，否则必须找出原因，排除原因后才能再使用。

4.7.4严格采取措施防止静电的聚集，并作好仪器的接地工作。

5、相关文件及记录

5.1 记录表：

R-SOP/2-0015-01《仪器使用记录》

R-SOP/2-0016-03《液相色谱柱使用记录》