细菌耐药性的发展[1]

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微生物检验与临床专题一、标本的采集、运输和储存 专题二、细菌耐药性与抗生素的合理应 用法国生物梅里埃

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感染性疾病的诊断一.微生物种类繁多细菌、真菌、支原体、衣原体、放线菌、立克次体、病毒、螺旋体

二、感染菌型变迁大致病菌、非致病菌 条件致病、正常菌群 菌群失调、二重感染

三、临床表现复杂多样同种微生物 不同临床表现 不同微生物 相似临床表现(例如：发热 腹泻 肺炎等) 老年 婴幼儿临床症状不典型

只凭临床表现难以明确诊断

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微生物检验的重要性

感染性疾病的明确诊断 医院内感染的监控 抗菌药物的合理使用

是医院诊疗和预防水平的重要反映

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一、标本的采集、运输和储存

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“正确的微生物学检验始自正 确的标本采取。临床医师、 护师及检验技师都必须通晓 其要领。”著名的临床微生物检验专著Manual of Clinical Microbiology 的主编Patrick Murray

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对于提高病原菌的分离率来说，没有什么比 标本的正确选择、采集和转运更重要的了。微生物实验室有责任为临床各部门提供包括 关于标本的选择、采集、运输、可接受性及 分类的具体标准和安全性的有关信息。必要 时可提供相关培训。

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基本原则1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.

发现感染应及时采集微生物标本作病原学检查， 二、三级医院微生物标本送检率不应低于70%。 尽量在抗菌药物使用前采集标本。 标本采集时应严格执行无菌操作，减少或避免机 体正常菌群及其他杂菌污染。 标本采集后应立即送至实验室。 以拭子采集的标本如咽拭或伤口拭子，宜采用插 入运送培养基送检。 盛标本容器须经灭菌处理，但不得使用消毒剂。 送检标本应注明来源和检验目的，使实验室能正 确选用相应的培养基和适宜的培养环境。

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(一)标本的选择

在采集标本之前，必须对标本和标本的采 集部位进行选择，以能够反映活动的病程 为标准。如果对标本没有进行选择，或从 有长居菌群的部位采集标本，即使是执行 了严谨的标本采集方法也不能够提供什么 有临床价值的资料。

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1. 临床价值不大的标本及替代方法和建议——————————————————————————————— 标本类型 替代方法或建议 ——————————————————————————————— 烧伤、伤口(拭子) 组织或抽吸物 褥疮(拭子) 组织或抽吸物 坏疽损伤(拭子) 组织或抽吸物 牙周损伤(拭子) 组织或抽吸物 直肠周围脓肿(拭子) 组织或抽吸物 静脉曲张性溃疡(拭子) 组织或抽吸物 结肠造口术排出物 不处理 Foley导管头 不处理 新生儿胃抽吸物 不处

理 恶露 不处理 呕吐物 不处理 ———————————————————————————————

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(二)标本的采集

即使标本选择得再好，如果采集不当也 不能分离到病原菌，结果甚至会被污 染菌所干扰。

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1. 标本最佳采集时机(1)在感染发生的早期或急性期采样； (2)最好在用抗菌药治疗之前进行采样； (3)如果已经使用抗菌药物，应停药1~2次再进 行采样，若病情不允许停药应在下次给药前进 行采样(此时药物浓度最低)。 (4)尿标本的采集应要求患者憋尿6h以上； (5)痰标本查结核杆菌，以晨痰为佳；

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(6)血标本的采集血标本的采集应在寒战后即刻采样，无寒战患 者应在发热的不同阶段进行采样。 ①急性感染患者:10min内从不同部位(两臂)分别采2~3套血样。

②感染性心内膜炎患者:24h内从不同部位采血3套, 每次间隔不少于30分钟。

③发热原因不明患者:24h内从不同部位采血2~3套，间隔不少于60分钟。

④若24h内为阴性，可再采血2~3套。

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2. 标本采集的最佳部位

即使是同一种细菌感染的不同阶段，标本 的采集部位也应该随之改变。例如，脑膜 炎奈瑟菌的感染分为上呼吸道感染期、菌 血症期、皮疹期和脑膜炎期。 发热患者通常采血部位为肘静脉。切忌在 静滴抗菌药物的静脉处采取血标本。多次 采血时, 应在不同部位进行。不要从血管插 管内采血。 脓肿标本应尽可能靠近脓腔底部或脓腔壁 采样。

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3. 标本最少采集量(1)固体标本不应少于2g; (2)一般液体标本不应少于2ml; (3)SCF不应少于1ml; (4)查真菌和结核菌的液体标本不应少于10ml; (5)用拭子采集标本时，应同时取两份，分别用 于培养和涂片。 (6)血液标本，成年人采血量为10ml, 新生儿 与婴幼儿为1~2ml,儿童采集3~5ml 。培养基与 血液之比以5~10∶1为宜。每增加1ml血量平均提高 阳性率3.2%。

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4. 药物与添加剂的影响

麻醉药和某些抗凝剂对一些病原体有抑制作用。 0.025~0.05%聚茴香脑磺酸钠(sodium polyanethol sulfonate, SPS) 。具有抗凝、抗吞噬、抗补体及拮 抗某些抗生素的作用。用拭子取材时，应选用合成纤维(藻酸钙)制作 的“绵”拭子及签杆(或金属制),最好不要用 天然棉纤维和木制签杆制作的棉签，因为在天然 材料的加工过程中会残留抑菌物质(棉花中的脂 肪酸或树脂及木棒中的甲醛)在其中。

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