生命科学导论复习资料(5)

PCR的三个步骤为一次循环，约需5－10分钟。每经一次循环，所找到的目的基因扩充

一倍。经过20次循环，即可扩增106倍，总共只需几个小时。

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（3）构造重组DNA分子

首先要有载体。

载体有好几种，常用的有：

质粒－－环状双链小分子DNA，适于做小片断基因的载体。

噬菌体DNA－－线状双链DNA，适于做大片断基因的载体。

其次，要把目的基因―装‖到载体中去。“安装”的过程，需要的关键酶叫限制性内切酶。 此酶识别一定碱基序列，有的还可切出“粘性”末端，使得目的基因和载体的连接非常容易。

（4）转化/转染

把构造好的重组DNA分子送进寄主细胞，亦需要适当的技术方法。若受体细胞是细菌，通常称转化；若受体细胞是动/植物细胞，通常称转染。

（5）目的基因表达及蛋白质分离

进入到寄主细胞的目的基因还要能表达产生有活性的目的蛋白，这些目的蛋白可以是某种

蛋白质药物，也可以表达某种抗性性状（如植物的抗病性和抗旱性）。

蛋白质的分离纯化——生物分离技术

重组DNA分子进入寄主细胞后，其中的目的基因能否表达，表达效率高低，还有很大差别。表达通常是指目的基因编码的蛋白质合成。基因工程的最后一步，是把所获得的蛋白质

分离纯化，得到蛋白质产品。

2、基因工程的应用

（1）在医学上的应用

基因工程被用于大量生产过去难以得到或几乎不可能得到的蛋白质－肽类药物。

（2）提高奶酪产量

生产奶酪的凝乳酶传统上来自哺乳小牛的胃。现在可以通过基因工程办法，用酵母生产凝

乳酶，大量用于奶酪制造。

（3）转基因动物和植物

转基因动物首先在小鼠获得成功。 ―乳腺反应器‖工程：转基因动物技术已用于牛、羊，使得

从牛/羊奶中可以生产蛋白质药物。

转基因植物亦已在大田中广为播种。

（4）工程菌在环境工程中应用

美国GE公司构造成功具有巨大烃类分解能力的工程菌，并获专利，用于清除石油污染。