遗传学设计性实验方案

遗传学设计性实验方案

实验课题：果蝇有关性状的遗传学分析 一、目的和要求：

1、掌握处女果蝇和雌雄果蝇的选取方法； 2、掌握果蝇的性状遗传分析方法

3、了解由性染色体上基因所控制的性状分离规律；

4、要求能独立查阅相关资料，要求每组做正反交，并进行预假设和适合度检验。 5、掌握实验结果的统计分析方法 二、实验材料、试剂及仪器

（1）实验材料：长翅白眼、残翅红眼果蝇、玉米粉、糖、琼脂、酵母粉 （2）实验试剂：乙醚、苯甲酸、水

（3）实验仪器：40试管、白瓷板、毛刷、小烧杯、显微镜、解剖针、玻璃棒、量筒、电炉、旧报纸、高压蒸汽灭锅、试管架、标签纸橡皮筋、万分之一天平、麻醉瓶、培养瓶、培养皿、胶带、棉球 三、实验方法 1、培养基的制备

A、称量，配方及用量如下:

果蝇培养基成份（800ml）

B、溶解（一部分煮玉米粉，一部分溶琼脂）

C、分装 按要求将配置的培养基分装到试管，并标号为1—10号 D、加棉塞、包扎 E、高压蒸汽灭菌

加水——装物——加盖——排气——加热（121摄氏度20分钟）——取物 2、取材

取亲本果蝇即野生型和白眼残翅型，并将原种瓶中的成虫全部清除。 3、果蝇的饲养

将装有果蝇的试管放在阴暗室温下饲养 4、处女蝇的鉴别与收集

此后隔6个小时收集刚羽化的成虫，并麻醉，将准确鉴别的雌性和雄性果蝇分别放入1号（♀）和2号（♂）试管中备用。（注♀：腹部背面有五条黑条纹； ♂：腹部背面有三条黑条纹，最后一条极宽，并延伸到腹面） 5、杂交

（1）、将1号管中的雌蝇麻醉后用鉴别雌性蛹的方法分离出处女蝇，并将长翅白眼处女蝇放在3号试管中，将残翅红眼处女蝇放在4号试管中。

（2）、处女蝇与雄果蝇正反交。按下述将2号管中相应雄蝇分离出来分别放入3、4号管中。 正交：长翅白眼（♀）X残翅红眼（♂） 4对 （置于3号试管） 反交：残翅红眼（♀）X长翅白眼（♂） 4对 （置于4号试管）

蒸馏水 玉米粉 糖 琼脂 丙酸（苯甲酸） 酵母粉 480ml 68g 52g 8.0g 4.0ml (2.0g) 少许

分别培养得到F1，贴上标签（注明亲本表现型、 杂交日期、实验者姓名）

（3）、将F1培养7天后，待幼虫出现后移去P亲本果蝇（记录日期），再过4天取出F1 观察其表

型（眼色、翅形）统计各种性状，并挑出3号试管中F1的处女蝇（置于5号试管）和雄果蝇（置于6号试管）；挑出4号试管中F1的处女蝇（置于7号试管）和雄果蝇（置于8号试管）。

（4）、7天后移去F1成虫果蝇

（5）、将5号和6号的6对F1雌雄蝇（置于9号试管）做兄妹交；将7号和8号的6对F1雌雄

蝇（置于10号试管）做兄妹交。（注明亲本表现型，日期，实验者姓名）

（6）、6～7d后清除F1代（记录日期）。

（7）、3～4d后，F2代成蝇出现，连续观察统计各种性状及性别比例，F3代出来后停止统计。 （8）、进行遗传分析 6、结果预估及分析

P: 1、长翅白眼（♀）X残翅红眼（♂） 2、残翅红眼（♀）X长翅白眼（♂） ↓ ↓ F1: 红眼长翅（雌性）：白眼长翅（雄性） 雌雄全部为 红眼长翅 1 ： 1

↓ ↓

F2: 长翅红眼（♀）3|16 长翅红眼（♂）3|16 长翅红眼（♀）6|16长翅红眼（♂）3|16 长翅白眼（♀）3|16 长翅白眼（♂）3|16 长翅白眼（♂）3|16残翅红眼（♀）2|16 残翅红眼（♀）1|16 残翅红眼（♂）1|16 残翅红眼（♀）1|16 残翅白眼（♂）1|16 残翅白眼（♀）1|16 残翅白眼（♂）1|16

长翅红眼:长翅白眼:残翅红眼:残翅白眼 长翅红眼:长翅白眼:残翅红眼:残翅白眼 3 : 3 : 1 : 1 9 : 3 : 3 : 1

如实将各代正反交的结果填入表格。将记录结果整理，分别做X2测验，看其是否符合遗传规律。记录好放飞时间（亲代和F1代），对结果进行分析。 世代 统计日期 F1雌 F1雄 F2雌 F2雄 比例 χ2检测表 合计 合计 正交：长翅白眼（♀）X残翅红眼（♂） 反交：残翅红眼（♀）X长翅白眼（♂） 长翅红眼 长翅白眼 残翅红眼 残翅白眼 长翅红眼 长翅白眼 残翅红眼 残翅白眼 F2表型 理论数（E） 偏差（O-E） （O-E）2/E 长翅红眼 长翅白眼 残翅红眼 残翅白眼 实验观察数（O） 2

合计 χ2=∑（O-E）/E

χ2的定义为： O是实测值；E是理论值；S是各项比值的总和

确定实得结果跟假设有显著性差异的概率水平： 当P＜0.05时，存在显著性差异； 当P＜0.01时，存在极显著差异； 当P≤0.05时，没有显著性差异。 四、注意事项

1、 麻醉剂的使用：乙醚有毒, 挥发性强，使用时，要注意随时盖好瓶盖,防止乙醚挥发。 2、麻醉深度：麻醉果蝇时，要防止麻醉过度，影响继代培养。 3、雌雄果蝇的准确识别。

4、做好标记：新转移的培养瓶上需贴好标签，注明继代培养日期及实验者姓名。 5、处女蝇的选择要准确。 6、若F1性状混杂，暂停；

7、培养基不够用，自行配制，注意配方和数量；