青霉素课程设计(2)

酵前期工艺优化实验，实验过程中主要控制参数：温度25℃ ，罐压0．090～0．100MPa，搅拌转速130r-min-。，空气流量和

补料根据发酵过程中的参数变化进行控制。

3、参数测定和计算方法

【菌浓测定】取发酵液lOml于离心管中，离心(3000 rmin_。)5min，测得沉淀物在培养液中的体积比即为菌浓。

【发酵效价测定】

发酵液经滤纸和微孔滤膜过滤后进行HPLC测定，高效液

相色谱仪为Agilent 1100型；

色谱条件：以HAc-NaAc缓冲液一乙腈(体积比80：20)作流动相。检测波长为254 nm，流速1．2ml-min-。 进样量20 l，柱温25℃ ，柱型Diamonsil C18(4．6mm ×250mm)，采用外标法测定样品中的青霉素效价。 【发酵指数计算】发酵指数=发酵效价×发酵液体积／发

酵罐体积×发酵周期

【发酵提炼的生产指数计算】发酵提炼的生产指数：发

酵指数×提炼收率 四、【结果与讨论】

第一次pH 自控时间影响最为明显，然后依次是起始补糖率、前期空气流量和苯乙酸补加时间。最佳工艺条件为A2Bl

ClD3，即起始补糖率为0．5％，苯乙酸补加时间为6h，第一次pH 自控时间为6h，前期空气流量为0．7vvm。按正交实验得到的最佳工艺条件实验5批，与原工艺条件对照，5批的平均生产指数升高了3．6％。表明实验所确定的工艺条件为较优的工艺条件。【结论】混合接入两种种源，其中种罐种子液的接种量为20％ ，60 h左右的前期发酵液的接种量为10％ ，总接种量为30％ ；优化发酵前期工艺，调整起始补糖率为0．5％ ，苯乙酸起始补加时间为6h，第一次pH 自控时间为6 h，前期空气流量为0．7 vvm。改进后的接种工艺大幅提高了生产指标，其中发酵指数提高了10．8％ ，提炼收率提高了0．4％，发酵提炼的生产指数提高了II．2％ 。显著提高了青霉素的生产效益。