分子生物学笔记 - 图文(8)

㈡反密码子对密码子的准确识读：真核生物使用摇摆规则时比较严格：真核生物中有8

种tRNA使用G-U摇摆，每一种都要求反密码子序列为-GNN-；人类的另8种tRNA反密码子含有-INN-，它们只解读-NNC-、-NNU-，凡是反密码子摇摆位点为I的，都不对-NNA-密码子的识别。

㈢核糖体对进入A位的氨酰tRNA从结构和缔合能两个角度进行两次最后的校对。延伸因子EF-Tu、eEF-1（真核）确保只有正确的氨酰tRNA才能进入A位；错配的则

缔合能是正配的1/3000，核糖体会在它稳定结合到A位前将其清除掉。

比较原核生物和真核生物翻译过程的异同（参与的因子，功能上的对应关系，真核生物mRNA特殊结构对翻译的影响，结合第六章的内容）。

第六章 基因表达调控

1、基因表达：是指贮存在DNA序列中的遗传信息经过一系列步骤表现出其生物学功能的整个生物学过程。

2、看家基因：维持细胞的基本代谢过程所必需的、在不同的细胞类型和细胞生长时期组成型表达的基因。

3、奢侈基因：细胞分化、生物的发育以及生物适应环境所需要的基因。

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4、结构基因：是指编码蛋白质或RNA的任何基因，包括结构蛋白、具有催化活性的酶和调控蛋白。

5、调控基因：是指编码参与其他基因表达调控的游离产物的基因。

6、正调控：激活蛋白结合操纵基因促进转录；负调控：阻遏蛋白结合操纵基因抑制转录。 7、操纵子：原核生物中一组连续排列、协调表达、功能相关的基因。 8、操纵基因（操作子）：是指能被调控蛋白特异性结合的一段DNA序列。

9、效应物：能与调控蛋白结合，改变调控蛋白的空间构象，从而改变其对基因转录的影响的因子。凡能诱导操纵子开启的效应物称为诱导物；凡能导致操纵子关闭，阻遏转录过程发生的效应物称为辅阻遏物。

10、衰减子：存在于操纵子结构基因的上游，能形成类似终止子的发卡结构，受生理条件的变化而改变结构，最终实现对基因转录的精细调控。

11、衰减作用：当转录从起始位点启动后，RNA聚合酶在未到达结构基因编码区之前提前终止的现象。

12、抗终止蛋白：能与其他抗终止因子结合并相互作用，使RNA聚合酶顺利通读终止子的蛋白质。

13、抗终止作用：抗终止蛋白结合于终止子上游，与其底物蛋白以及其他抗终止因子相互结合并作用，促使RNA 聚合酶的构型发生改变，或减弱终止子的作用，最终RNA 聚合酶能够通过该终止子，顺利通读。

14、RNA 干涉:是指短的双链RNA可以降解内源的同源mRNA，而使相应基因表达沉默的一种现象。

15、siRNA：RNA干涉起始阶段，加入的小分子RNA或者内源产生的dsRNA被切割为21~23bp个核苷酸长度的小分子干扰RNA片段。

16、RNA 诱导的沉默复合体：siRNA双链与一个核酶复合物结合形成的复合物，RISC。 17、miRNA：存在于动植物细胞中的内源性、由茎环状单链RNA前体剪切而来的参与转录后基因沉默过程的21个核苷酸大小的RNA，micro RNA。 18、反义RNA：是指与靶RNA互补的RNA。

19、通读：①转录水平：在RNA的转录过程中，有些终止子的作用可以被特殊的称为抗终止因子的蛋白质所阻止，使RNA聚合酶越过终止子，继续转录的现象。②翻译水平：在蛋白质翻译过程中，当核糖体遇到终止密码时，核糖体任意结合一种氨酰tRNA，使蛋白质的合成得以延续，翻译出一条延长的多肽链。

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20、移码：核糖体在mRNA上解读密码时，向前或向后移动一个核苷酸，从而改变读码框，使多肽链的延伸得以继续。 21、乳糖操纵子结构：

22、乳糖操纵子的调控机理（根据环境条件中的乳糖，葡萄糖的存在情况分别叙述） 答：①当乳糖和葡萄糖同时存在时：葡萄糖的存在使腺苷酸环化酶受到抑制，则cAMP水平下降，不能与操纵子上cap基因的产物CAP结合成复合物，故不能发挥正调控；但是乳糖的存在以及调控的渗漏现象，微量合成的β-半乳糖苷酶使乳糖转变为异构乳糖，异构乳糖与乳糖阻遏蛋白结合，负调控的诱导作用可以发挥，所以lac在低水平上转录。②当乳糖不存在时：没有异构乳糖形成，阻遏蛋白完全结合在操纵基因上，lac无法转录。③当只有乳糖存在时：微量合成的β-半乳糖苷酶使乳糖转变为异构乳糖，异构乳糖与乳糖阻遏蛋白结合，负调控的诱导作用发挥，合成的酶会反过来进一步促进lac的转录；另外葡萄糖不存在时，cAMP水平高，能与CAP结合为复合物，增加RNA聚合酶结合效率，加快转录速度，这是正调控的诱导。正负调控相配合使lac高水平表达。 23、色氨酸操纵子在氨基酸充足和不足条件下的调控

答：色氨酸本身不是阻遏蛋白，但能与无活性的阻遏物结合而形成有活性的阻遏蛋白，所以称色氨酸为辅阻遏物。①当色氨酸充足时：色氨酸与调控基因编码的无活性阻遏蛋白结合成为完全阻遏物并结合到操纵基因上，使得RNA聚合酶不能与启动子结合，则色氨酸合成有关的五个基因的表达被关闭。另外，色氨酸合成酶操纵子中，因为Trp-tRNA含量丰富，核糖体顺利通过色氨酸的密码子区，边缘覆盖于区域2，阻止区域2与区域3的配对，则区域1与区域2配对，区域3与区域4配对，形成衰减子结构，转录终止。②当色氨酸不足时，阻遏蛋白由于没有色氨酸的结合而不具有与操纵基因结合的活性，所以色氨酸合成酶操纵子可以顺利开启。另外，色氨酸合成酶操纵子中，因为Trp-tRNA含量少，核糖体在色氨酸的密码子区延宕，故区域2与区域1不能配对，区域2与区域3配对，衰减子不能形成，转录继续进行。

24、cAMP-CAP 以及其参与的代谢调控

答：cAMP（环化一磷酸腺苷）由腺苷酸环化酶催化以ATP为底物合成，通过与cap基因产物CAP结合形成cAMP-CAP复合物。对于依赖CAP的启动子，必须要有该复合物的参与才能启动转录。该复合物具有结合DNA特异位置上的能力，并增加结合RNA聚合酶的

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