分子生物学笔记 - 图文(4)

8、启动子：指DNA分子上被RNA聚合酶、转录调节因子等所识别并结合形成转录起始复合物的区域。是控制转录起始的序列，决定基因转录的起始位点和表达强度等。+1转录起始点碱基只能是A或G。

9、核心启动子: RNA聚合酶首先识别和结合-35 site，RNA聚合酶识别位点，R Site，或称RNA聚合酶松弛结合位点，保守序列TTGAC; -10 site，RNA聚合酶结合位点，B Site，RNA聚合酶紧密结合位点，保守序列TATAAT; +1 site，RNA聚合酶转录起始位点，I Site，保守序列A/G。这三个位点合称核心启动子。

10、核心启动子上游的-70~-40区域含有与CAP-cAMP复合物结合，激活转录的正控制位点，称为上游控制因子。 核心启动子与上游控制因子统称为扩展的启动子。

11、综上，原核生物启动子由-35区序列&17+1bp间隔序列&-10区序列组成，共约40碱基。 12、-10 序列，-35序列对转录效率的重要性：-10序列和-35序列可以直接与RNA聚合酶全酶中的σ因子相互作用。-35区是σ因子的识别位点，该区突变影响σ因子结合效率；-10区富含AT对，是启动子的解链发生位置，σ因子可选择模板链并促使RNA聚合酶与之结合，突变影响开放复合物形成的速度。

13、强启动子和弱启动子的本质区别在于启动子序列与标准启动子序列同源性程度的大小。如果发生一个突变使启动子偏离标准序列，启动子效应减弱，该突变表现为下调突变，成为弱启动子；如果一个突变使启动子更接近于标准序列，启动子效应增强，表现为上调突变，成为强启动子。

14、真核生物基因转录的顺式元件包括两类：

①与基本转录水平相关的：也称启动子，负责管家基因的组成型表达。它包括核心启动子和上游控制元件核心启动子中的帽子位点和-30区保守序列是转录必需因子。

②与特异诱导表达相关的：增强子和沉默子，不直接与RNA聚合酶互作，它们与其他蛋白质结合后激活或阻止RNA聚合酶对结构基因的启动，负责对特殊基因的诱导表达。 15、真核生物RNA转录由三种RNA聚合酶完成：

①RNA聚合酶Ⅰ负责转录rRNA，启动子由核心启动子和在起点5’上游100bp左右的控制区域两部分组成。

②RNA聚合酶Ⅱ负责转录结构基因mRNA及部分snRNA，启动子由启动子上游元件和核心启动子两部分组成。

③RNA聚合酶Ⅲ负责转录tDNA和5S rDNA，启动子位于转录起点的下游。启动子分三类：

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Ⅰ型启动子转录5S rDNA，需要通用转录因子的结合来定位RNA聚合酶；Ⅱ型启动子转录tDNA，只需TFⅡB、TFⅡC的结合定位聚合酶；Ⅲ型启动子用于scRNA的基因转录，具有TATA盒和类RNA聚合酶Ⅱ结合的顺式元件序列，需要TFⅡB和其他辅助因子结合定位聚合酶。

16、RNA聚合酶：催化RNA转录的酶称为依赖DNA的RNA聚合酶。它可以自行发动RNA链的合成，不需要引物，没有转录物的校正功能。

17、原核生物中所有类型的RNA都由同一种RNA聚合酶转录。原核生物RNA聚合酶全酶由核心酶与σ亚基结合构成，核心酶又由两个α亚基和一个β亚基、一个β’亚基组成。核心酶依靠静电力与DNA 发生非专一和非特异的结合，全酶则与启动子特定序列专一性结合。

18、σ因子的特点：只有它的存在才赋予全酶识别R位点、B位点，选择并紧密与模板链发生特异性结合的功能；降低了RNA聚合酶的移动速度；可以从全酶中释放出来，重复使用；不同生物中，种类繁多。