分子生物学笔记 - 图文(7)
③ 30S预起始复合物→30S起始复合物。
④IF2刺激 50S亚基参与形成70S三元起始复合物。 IF1和IF3释放。IF2的活性形式是IF2·GTP, 50S亚基作为GTP酶活化蛋白,激发IF2的GTP酶活性,GTP水解成GDP和Pi。 IF2释放。fMet-tRNAfmet占据着50S亚基的肽酰位(P)。而A位则空着。
40、真核mRNA5’端帽子到翻译起始密码AUG的序列为引导序列,又称5’非翻译区(5’UTR),对准确起译和保证翻译效率起作用;从终止密码到3’末端为拖尾序列,称3’非翻译区(3’UTR),对提高翻译效率起作用。
41、真核生物蛋白质翻译的起始过程:①装配“前起始复合物”:包括40S核糖体、eIF-2-Met-tRNAiMet-GTP构成的三联复合体和eIF-1、eIF-1A、eIF-3共3个起始因子。 ②在帽子结合复合物起始因子eIF-4F(包括eIF-4A、eIF-4E、eIF-4G)作用下,前起始复合物与mRNA5’端结合成“起始复合物”,eIF-4E与帽子接触,eIF-4G连接eIF-4E和eIF-3(它连接在前起始复合物上)。③起始复合物沿着mRNA分子向3’端扫描,寻找起始密码子AUG。mRNA引导序列比较长,可能形成发夹等二级结构,而起始复合体中的eIF-4A、eIF-4B具有RNA螺旋酶活性,可消除这类结构;④一旦40S起始复合物检测并结合到起始密码子后,60S大亚基就结合上来,形成80S核糖体。
42、polyA尾可以促进前起始复合物与mRNA的结合。
43、并不是所有真核mRNA都使用上述扫描系统,这些无帽子的mRNA内部有核糖体进入位点(IRES)。
44、Poly A 结合蛋白(PABP)通过与起始因子的相互作用,使真核mRNA在翻译过程中首尾相连。
45、多肽链延伸(原核、真核同理)由许多循环组成,每加一个氨基酸就是一个循环,每个循环包括:进位、 转肽和 移位反应(translocation)。
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46、核糖体50S大亚基中的23S rRNA具有肽基转移酶活性。 47、多肽链的翻译终止:
? 当终止密码子进入核糖体的A位时,没有相应的AA-tRNA能与之结合,而释放因
子(RF)能识别这些密码子并与之结合,水解P位上多肽链与tRNA之间的二酯键,释放新生的肽链和tRNA,核糖体大、小亚基解体,蛋白质合成结束。 ? 释放因子RF3具有GTP酶活性,它催化GTP水解,使肽链与核糖体解离。 ? RRF核糖体循环因子和EF-G·GTP使mRNA和空载tRNA与核糖体解离。 48、释放因子(RF):功能是识别mRNA上的终止密码子,终止肽链的合成并释放出肽链。
? RF-1:识别密码子UAA及UAG ? RF-2:UAA及UGA
? RF-3:结合GTP,并促进RF-1及RF-2与核糖体的结合,使它们完成翻译终止后解离
出来。
? 支原体和线粒体没有RF2
49、核糖体的解离不是RF负责的,原核中是核糖体释放因子RRF,真核中可能是eRF-3。 50、真核生物蛋白质翻译有时会发生通读,遇到弱终止密码时核糖体更容易滑过终止密码而发生通读,反映了RF因子与tRNA之间对A位点的竞争。 51、保证蛋白质翻译准确起始机制(一、二、三)
(蛋白质生物合成过程中,保证正确氨基酸进入的机理是什么? “一”中相同字体。) 答 ㈠tRNA对氨基酸的专一性负载:由专一性的氨酰tRNA合成酶(AARS)负责的,氨基酰-tRNA合成酶对AA和tRNA都具高度特异性,并具有校正活性。
它催化如下反应:AA+ATP→氨酰-AMP+PPi 氨酰-AMP+tRNA→氨酰-tRNA+AMP
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1种AARS只能识别装载同一种氨基酸的一组同工受体tRNA,它的高级结构中形成3个功能位点:氨基酸结合位点、tRNA结合位点、ATP结合位点。前两个有专一性。AARS在两大方面収挥作用:⑴特定氨基酸准确进入并稳定结合依赖“双筛效应”。“双筛结构”是指在AARS的氨基酸结合位点上的“结合位点”和“水解位点”两个功能域。对于与靶AA具有相似R基团的AA,结合位点将大分子AA给阻隔在外面无法进入,小分子AA全部进入并被ATP活化;随后除了靶AA以外的AA-AMP因为分子较小,全部通过水解位点而被水解,只剩下靶AA-AMP顺利装载于tRNA。⑵特定tRNA的准确识别与结合依靠AARS对副密码子的识别。副密码子:tRNA中与AARS的“tRNA结合位点”发生特异分子楔合的一种空间密码。它的特征:①被一种AARS所识别的一组同工受体具有相同的副密码子;②副密码子是被AARS分子中特定氨基酸序列所识别的若干碱基;③AARS对副密码子的识别和结合是通过氨基酸与碱基之间的连接实现的,属生物Ⅱ型空间密码;④副密码子也是进化进程留下的足迹,tRNA可能起源于可以携带氨基酸的寡核苷酸,由AARS特异识别tRNA使氨基酸的负载更准确而成为进化优势;⑤副密码子位于tRNA的各种环或臂上,不同tRNA定位不同。 …… 此处隐藏:359字,全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……
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