重医细菌学检验复习题(4)

检验方法：

脓汁、咽拭、痰液和渗出物可直接涂片检查。 增菌培养接种肉浸液葡萄糖肉汤或匹克肉汤。

分离培养接种血平板做需氧和厌氧培养，观察菌落形态。 鉴定试验

β溶血者做杆菌肽敏感试验，敏感者为A群链球菌，耐药者做胆汁-七叶苷试验（阳性为黑色反应），阳性者为B群链球菌，同时做CAMP试验也应为阳性；阴性者为A、B、C群以外的其他链球菌；

α溶血者做Optochin试验，敏感者为肺炎链球菌，耐药者做胆汁-七叶苷试验，阴性者为草绿色链球菌；

不溶血者做6.5%氯化钠试验，阴性者为其他链球菌。

链激酶试验：取草酸钠血浆0.2ml，用生理盐水稀释，再加入链球菌培养物0.5ml和0.25%氯化钙溶液0.25ml混合，放37℃水浴，观察血浆凝固。从血浆凝固起记录溶化时间，溶化时间越短，链激酶越多。

马尿酸钠水解试验： B群链球菌阳性。阳性产紫色或深紫色。

第十章 肠科杆菌

1、简述肠道杆菌共同特点，怎样初步区别肠道致病菌与非致病菌？ 肠杆菌科共同特性

相似的形态染色 中等大小，G –杆菌，无芽胞，多数有动力，致病性菌株多有菌毛，具有质粒。 简单的培养条件 活泼的生化反应

抗原构造: 包括菌体（O）抗原、鞭毛（H）抗原和表面抗原3种。O抗原和H抗原是分群和分型的依据。

抵抗力: 不强，不耐干燥，对一般的化学消毒剂均敏感。

变异性: （1）S-R变异：新鲜分离的细菌菌落为光滑性，反复传代或保存过久，菌落变成粗糙型。

（2）H-O变异：鞭毛从有到无。

（3）质粒、转座子、结合子等的转移改变菌株遗传信息，如耐药菌株的出现。 乳糖发酵试验------初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌 肠道致病菌------不发酵乳糖 肠道非致病菌----发酵乳糖

2、何谓肥达试验？肥达试验结果判断须注意哪些要点？

肥达试验(Widal test):用已知伤寒沙门菌的O、H抗原，以及引起副伤寒的甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌的H抗原(称为PA、PB)作为诊断菌液，与受检血清做试管或微孔板凝集试验，检测受检血清中有无相应的抗体及其效价的一种半定量试验。可辅助诊断肠热症

结果分析及临床意义：

1）正常值 ：首先应考虑当地人群的正常效价。

伤寒沙门菌O凝集价 >1：80，伤寒沙门菌H凝集价 > 1：160 甲型副伤寒H凝集价 >1：80，肖氏沙门菌H凝集价 >1：80 或在疾病早期及中后期分别采集两次血清，若第二份血清比第一份的效价增高4倍或以上具有诊断的参考价值。

2） O与H抗体的诊断意义：

O抗体出现较早，为IgM，持续时间短（约半年），消退后不易受非特异性病原刺激而重现。H抗体出现较晚，为IgG，持续时间长达数年，消退后易受非特异性病原刺激而重现。

① O、H凝集价均超过正常值，则肠热症的可能性大； ②若两者均低，肠热症的可能性小；

③若O不高H高，可能为疾病的晚期，是预防接种或非特异性反应；

④若O高H不高，则可能为感染早期，或与其他沙门菌有交叉反应，或H-O变异的沙门菌引起的感染等，建议一周后复查，如一周后H也有升高，可证实为肠热症。

3）注意事项：

确诊为伤寒的患者中约有10%肥达反应始终为阴性，故阴性结果不能排除伤寒的确诊。其原因可能由于早期使用抗生素治疗，患者免疫功能低下或与肥达反应诊断菌液等有关。

采血的时间不同，肥达反应的阳性率也不同。发病第一周阳性率为50%，第二周为80%，第四周90%，恢复期凝集价最高。以后逐渐下降以至转阴。临床上一般以双份血清（早期和恢复期）的凝集价有4倍增高作为新近感染的指标。

3、疑似伤寒病人在病程不同阶段应采取何种标本？ 不同疾病、不同病程采集不同标本

伤寒、副伤寒：第1、2周采血；第2、3周采粪、尿；全程可采骨髓。 血清学检查：第二周起即可采血清。 败血症：采血。

肠炎：粪便、呕吐物、可疑食物

4、SS培养基中有哪些成分，各有何作用？ 用途:用于志贺菌和沙门菌分离

成分（g/L）牛肉浸粉5；眎胨或多价蛋白胨5；乳糖10；胆盐8.5；枸橼酸钠8.5；硫代硫酸钠8.5；枸橼酸铁1；琼脂17.0；中性红水溶液0.025；煌绿水溶液0.33ml；蒸馏水1LpH7.0～7.1（25℃）

原理:SS琼脂为强选择性培养基。其成分除了有必要的胨、牛肉膏等氮、碳源外，其他则为选择性抑制剂和缓冲剂。

枸橼酸钠、胆盐、硫代硫酸钠的协同作用与煌绿共同来抑制肠道非病原性细菌及部分大肠埃希菌的生长；对志贺菌属及沙门菌属相对抑制性较弱。

硫代硫酸钠有助于大肠菌的菌落着色，枸橼酸铁能缓解某些药物对病原菌的毒性作用，同时与细菌产物起反应呈黑色菌落。

中性红可把分解乳糖和不分解乳糖的细菌鉴别开，前者为红色菌落，后者为无色菌落 琼脂是培养基的凝固剂

【观察结果】沙门菌其菌落呈无色半透明，产生H2S者菌落中心呈黑色，部分菌株如亚利桑那亚属Ⅲ有分解乳糖的菌落呈红色、中心黑色，志贺菌属的菌落呈无色透明。大肠埃希菌呈红色混浊。宋内志贺菌能延缓发酵乳糖，培养24h厚可以出现红色菌落。肠道致病菌的菌落均可达1.5mm以上。

5.名词解释：

1）KIA: 克氏双糖铁琼脂,常用于观察微生物发酵葡萄糖和乳糖的能力，可以把肠杆菌科细菌和其他科细菌区别出来以及区别肠道内的致病菌和大肠埃希菌。

KIA成分中含有葡萄糖和乳糖，二者比例为 1：10； 指示剂为酚红，其在PH<6.8时变为黄色，而KIA的PH为7.4(红色)，产少量的酸就可导致颜色变化。

2）MIU：动力、吲哚及脲酶（MIU）复合试验

【原理】：培养基为含尿素、蛋白胨的半固体培养基，指示剂为酚红。具色氨酸酶的细菌能分解色氨酸产生吲哚，加入吲哚试剂后，培养基上层的吲哚会变红；具脲酶的细菌能分解尿素产氨，使整个培养基变碱呈红色；有动力的细菌沿穿刺线扩散生长。

【方法】：将大肠埃希菌和普通变形杆菌穿刺线接种于MIU培养基，35ºC，18-24h，观察动力和脲酶反应后，再滴加吲哚试剂。

【结果】：扩散生长为动力阳性；滴加吲哚试剂后呈玫瑰红色为阳性；培养基变红脲酶阳性。 用途：生化培养基，用于细菌脲酶检测（GB、SN标准） 3）IMViC：用来测定菌的生理生化特征的4个实验. 主要是用来快速鉴别大肠杆菌和产气肠杆菌，多用于水的细菌学检查。I:吲哚试验 ；M:甲基红试验 ；V:V.P试验 ；C:柠檬酸实验

4）V-W变异:异：指沙门菌失去Vi抗原的变异。

——初次分离得到的具有Vi抗原、O不凝集的沙门菌称为V型菌；

——Vi抗原部分丧失，既可与O抗血清发生凝集又可与Vi抗血清凝集者称VW型菌； ——Vi抗原完全消失，与O抗血清发生凝集而与Vi抗血清不凝集者称W型菌。

V-W变异的过程是V型菌经人工培养，逐渐丧失部分Vi抗原而称为VW型菌，进而成为W型菌 5）Vi抗原:由聚-N-乙酰-D-半乳糖胺糖醛酸组成。不稳定，新从患者标本中分离出的伤寒杆菌、丙型副伤寒杆菌等有此抗原。Vi抗原存在于细菌表面，具有微荚膜功能，能抵抗吞噬细胞的杀伤和吞噬，并阻挡抗体、补体等破坏菌体作用。测定Vi抗体有助于对伤寒带菌者的检出。

6）外斐反应：变形杆菌属的X19,X2.Xk菌株的菌体O抗原与斑疹伤寒立克次体和恙虫病立克次体有共同抗原，故可用OX19，OX2，OXk代替立克次体作为抗原与相应患者血清进行交叉凝集反应，此称外斐试验，辅助诊断立 …… 此处隐藏：3632字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……