重医细菌学检验复习题(2)

32、细菌数量的测定：物理计数法 ；生物计数法 物理计数法

细菌总数计数法：利用工具和仪器对样本中的细菌进行计数，其结果表示样本中的所有细菌 (活菌＋死菌)。

Breed计数法：Direct microscopic count 比浊管计数法：细菌悬液的浊度与菌数成正比 分光光度计测定法：吸光度同细菌总数成正比

生物计数法

活菌计数法：利用各种培养方法检测样本中细菌的数目,计数培养基上生长的菌落数＝样本中活菌数。

半定量计数法；倾注平板法；旋管计数法；滴液计数法；琼脂表面计数法；膜滤过计数法； 微菌落快速计数法；最可能数(MPN)的估计

33、L-型细菌检查 L forms bacterium：一种细菌通过变异而产生的细胞壁缺陷型。 必须在高渗溶液中方能存活，并失去原有形态而变成圆球形或多形性。 致病?

第四章、细菌的分型及其检验技术

1、细菌分型—“传统方法”

仅进行病原的菌种鉴定是不够的，需要进一步的分型诊断。

血清学分型；生物化学分型；噬菌体分型；细菌素分型；耐药谱分型；质粒图谱分型;PCR技术；染色体酶切物脉冲场凝胶电泳分型

2、噬菌体的作用具有高度特异性（种、型）

一种噬菌体只能裂解一种或与该种相近的细菌，故可用于细菌的分类鉴定。 用己知型噬菌体鉴定细菌，可对细菌进行分型。

3、毒性噬菌体：Virulent Phage：能在宿主菌细胞内复制、增殖，产生许多子代噬菌体，最终裂解细菌。

4、温和噬菌体 ：Temperate Phage：与宿主菌的染色体整合，随细菌DNA的复制而复制，随细菌的分裂而传代，不产生子代噬菌体。

5、噬菌斑(plaque)

在液体培养基中，噬菌体可使浑浊的菌液变为澄清； 在固体培养基上，噬菌体对宿主菌细胞的裂解作用可使菌落溶解，导致在带菌琼脂平板上产生空斑，易于观察，称噬菌斑(plaque)。

6、噬菌体的效价测定

噬斑形成单位(pfu)的测定 ： 若将噬菌体按一定倍数稀释，通过噬斑计数，可测定一定体积内的噬斑形成单位(plaque forming units, pfu)数目，即噬菌体的数目。

7、 细菌素分型技术 细菌素(bactericin)：某些细菌产生的蛋白质类抗菌物质，这种物质只对产生菌亲缘关系近的细菌有抗菌作用，而对产生菌本身不敏感。

细菌素是蛋白质，质粒控制，多处于抑制状态。

细菌素的应用主要是细菌的分型和流行病学调查，是血清学分型的补充。 8、药敏试验(drug susceptibility test)

在体外测定抗菌药物抑制或杀死细菌能力的试验。

抗菌药物：具有杀菌或抑菌活性的抗生素和化学合成药物。 9、药敏试验方法

纸片法：测定抑菌环大小，其结果以敏感、中度敏感、中介度、耐药表示。 稀释法：找出能抑制细菌生长的最小抑菌浓度(MIC)或最小杀菌浓度(MBC)表示。 E试验(E-test)：

最小抑菌浓度 MIC：在特定环境下孵育24小时，可抑制某种微生物出现明显增长的最低药物浓度。

最小杀菌浓度 MBC：杀死99.9%（降低3个数量级）的供试微生物所需的最低药物浓度 10、纸片扩散法

是国际上推荐使用的标准实验方法 ；细菌耐药谱分析中最常用的方法。

原理：将含定量抗菌药物纸片贴在已接种待测细菌的琼脂平板表面，培养后，形成一个透明抑菌环。

抑菌环的大小反映待测菌对该药物的敏感程度，与MIC成反比。 0.5麦氏比浊度=1×108cfu/ml

结果判断：针对抑菌环直径测量值报告敏感、中介或耐药。

敏感(S)：被测细菌所引起的感染可以用常用剂量的该抗菌药物治愈。 中介(I)

耐药(R)：被测细菌不能被常用剂量抗菌药物抑制,或具有特定耐药机理，临床治疗效果不佳。 11、肉汤稀释法

原理：将药物按一定规律用M-H肉汤稀释成一系列浓度后，与一定量的细菌作用，经培养后定量测定其MIC，反映细菌的药物敏感性。

校正0.5麦氏比浊标准，1∶200稀释（1∶10×1∶20）。（5×105 cfu/ml） 结果判定：无肉眼可见细菌生长的药物最低浓度即为该待测菌MIC。 12、琼脂稀释法

原理：将待测菌接种于含不同浓度药物的琼脂平板上，经培养后观察菌落的生长情况，以能抑制细胞生长的最低药物浓度为该菌的MIC。

第五章、细菌的分类与命名P91

1、细菌分类等级

种是细菌分类的基本单位，将生物学性基本相同的细菌群体归成一个菌种； 性状相近、关系密切的若干菌种组成一个菌属； 2、细菌DNA中G＋C mol/%测定

细菌DNA中G＋C mol%含量不同是细菌的一个重要遗传特征。

单一菌种中许多不同菌株的G＋C mol%平均值极为接近或者是一致的。 3、细菌命名

细菌的科学名称(学名)为生物双名式。 属名＋种名(＋人名、地名)。斜体 属名在前，名词，首字母大写 种名在后，形容词，小写 属名可用第一个字母代表

M. tuberculosis(结核分枝杆菌)、S. typhi(伤寒沙门菌) 常见的细菌也可用习惯通用俗名

tuberculosis(结核杆菌)、typhoid bacillus(伤寒杆菌) 泛指某一属细菌：属名＋sp (菌种species) Mycobacterium sp，Salmonella sp 亚种的名称：属名＋种名＋亚种

Klesbsiella penumoniae subspecies pneumoniae 中文译名则种名在前，属名在后。

4、细菌分类系统 ：《伯杰氏鉴定细菌学手册》

第七章、消毒学试验技术

1、消毒学试验

原理：将试验微生物暴露于消毒因子(物理、化学、生物学)，作用预定的时间之后，检查试验的微生物是否被杀灭或抑制。

主要目的：检查一种消毒剂或消毒方法是否能达到杀灭或消除病原微生物的要求。

2、消毒 disinfection ：杀灭或清除传播媒介上病原微生物，使其达到无害化的处理。

灭菌：杀灭或清除传播媒介上一切微生物（包括病原体和非病原体的繁殖体和芽胞）的处理。 3、微生物学检验：中和试验、定性/量杀菌试验、病毒灭活试验、能量试验、现场试验等

4、消毒药械鉴定测试的项目

理化性能检验 微生物学检验

其他

消毒剂

有效成分含量；pH；金属腐蚀性

微生物杀灭

模拟现场试验与现场试验 稳定性试验

性

实验室杀灭微生物 模拟现场和现场试验 安全性试验(电器、毒理 ) 消毒器械

杀菌因子强度或浓度；金属腐蚀

5、菌片：用于测定各种消毒剂、消毒器械与方法对不同物品上微生物的杀灭作用。 6、残留消毒剂的去除方法：化学中和法（称中和剂法）、过滤冲洗法、稀释法等 中和剂法：在消毒剂与微生物作用到达规定时间的终点时，取样加于适宜种类和浓度的中和剂中，将残留消毒剂迅速中和，使其不再持续抑制或杀灭微生物的方法。

中和剂 ：能及时中止消毒剂的杀微生物作用

本身及其与消毒剂的反应产物对微生物无抑制或杀灭作用，对培养基无不良影响。 7、中和试验 操作方法

用PBS将指示菌制成5×105～5×106cfu/ml悬液。 将消毒剂用灭菌蒸馏水配制成3种不同浓度，在不加中和剂的情况下，测知该消毒剂10min抑杀指示菌99.9％以上的最低有效浓度。

取消毒剂10min抑杀指示菌的最低有效浓度与待选择中和剂进行试验，选出中和剂种类并依据等当量中和原则，调整中和剂浓度，选出试验浓度的消毒剂使用中和剂的浓度。

中和剂选择试验时，先将消毒剂1.0mL与中和剂溶液9.0mL混合，制成中和产 …… 此处隐藏：4368字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……