分离和计数金黄色葡萄球菌的选择培养基

金黄色葡萄球菌的选择培养基

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分离和计数金黄色葡萄球菌的选择培养基B.M . Ka Tmo a等 p& B在现有的葡萄球菌种类中，金黄色葡萄

物生长的同时，对金黄色葡萄球菌的生长和特性的产生也无不良影响，最适宜的使用浓度是 2。

球菌对入和动物是有病原性的，而个别的金黄色葡萄球菌菌株在一定的条件下能够大量产生肠毒素。

对含和不含奴佛卡因的血琼脂以及含7 5氯化钠的盐血琼脂同时进行对比试验。 . 在这 3种培养基上接种了细菌培养物、处于

为了从各种病料中分离葡萄球菌，曾经推荐采用含 6 5氯化钠的乳一琼脂和含 .盐

75 .%氯化钠的盐血琼脂。当存在这种浓度的盐类时，不仅金黄色葡萄球菌能生长，而且其他种类葡萄球菌也生长。盐血琼脂比乳

不同状态个别乳牛的牛乳、混合乳和乳房乳头皮肤、挤乳器的洗脱物。在试验中，利用了 1 5菌株培养物，其中包 3种葡萄 4个括

盐琼脂的优点是在前一种培养基上可同时出现作为病原性重要特征之一的溶血活性。 此外，氯化钠不能充分抑制无关微生物的生长，而对部分葡萄球菌却抑制溶血活性，以至不能对金黄色葡萄球菌生长进行计数。

球菌保存菌株和野外菌株、各血清型的链球菌、枯草杆菌和肠杆菌。制备了每 ml含有1 0、 0和 l个金黄色葡萄球菌的稀释物。 0 0 10 O

在每个培养基上做 l个接种 ( 1略)。 8表、 在没有抑制剂的血琼脂和奴佛卡因璩脂上， 生长的葡萄球菌菌落数耳是相同的。在盐血琼脂上，金黄色葡萄球菌的生长数量相当少，氯化钠抑制1%的病原性葡萄球菌生 9

为了寻找不妨碍葡萄球菌溶血括性而又能抑制无关微生物区系生长的抑制剂，我们

曾经试验了大约7种不同的化学物质。奴佛 O卡因就是这样的抑制剂，它在抑制其它微生

长，这是选择培养基的主要缺点。在盐血琼脂上，其他种类葡萄球菌的生长量，只比没已证明，在用免疫扩散检测牛 B V阳性血 L

( i n Mo z )对 B V阳性牛的抗血清 Pt - o e ma L,进行双相扩数够形成相同的

沉淀线，从而 B表明，P G处理和胶柱者不产生明显的病毒 E臣蛋白损失或变性。作者用 P l - O聚丙烯酰胺基质胶球是因为其大小分界值足于滞留P G E 8 0聚合体。主要的病毒蛋白g 5和P 4 00 p1 2,甚至更小的成分如果同完整病毒子相连，那么就可排阻在胶球外，而容易流过柱床尽

清、包被E IA板以及制备兔抗 B V抗体方 LS L面，所获得的病毒制备物作为抗原是有效的。

本文所报道的 B V L浓缩法作为常规方法

已作者实验室应用一年。该方法很适于大在规模制备病毒，是获得 B V抗原的一种快 L

速、可靠，简便和廉价的方法。一,

管通过脱盐柱时， E B V浓缩物一次通过 P G/ L不能像想象的那样从抗原制备物中腺去全部 P G但大多数P G仍滞留在柱中。后来， E, E 从 AGI P D, AGE R T、 E对超速离心法 M和 P G沉淀法制备的 BL E J原进行比较的结 v抗果，肯定了P G/盐法的效果，并证明过 E脱夜沉淀 ( es n R sa g等， 1 8 )是不必要的。 91

(参考文献 2篇、圈 2丧 2,从略 ) 7、.

V e . M i￣ h o . 19 8。 1 (2 ) t co i1, 8 7:

17 1 0￣ 16 (文 )英

廖国鲁

译

范书右校 (刊删节)本

金黄色葡萄球菌的选择培养基

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有抑制剂的血琼脂少 2 .。在奴佛卡因血 17琼脂上，它们不生长 ( 2,略 )。表 当接种牛乳，乳房、乳头皮肤和设备洗物试样时，不论在没有抑制剂的血琼脂培养基，还是在盐血琼脂培养基上均见微生物、

解聚酶作用带面积最大。试验表明，这种培养基具有很高的敏感性和抑制特性，个别肠球菌菌落的生长，对金黄色葡萄球菌菌落发 育和统计无重大影响。

K奴佛卡因琼脂制备方法如下：向一 10 5 ml溶化灭菌的 2%内汤一白陈琼脂蛋( ' MIA,p . )中添￣ l 0 I H8 6 S mlⅡHK(先预

大量生长，其中包括不溶血的葡萄球菌。生长的溶血葡萄球菌菌落拄往有不大的溶血带，不可能统计其数目。而通常在奴佛卡因血琼脂上，溶血葡萄球菌生长有明显溶血

带 的单独菌落，这样就有可能计算出每 mlg (￣

溶解在经用 2滴 1%苛洼钠溶液碱性化的 01 ml馏水里 )和 3奴佛卡因 ( 0蒸 g 2% ),混

和后，在煮怫的水浴里将培养基加热3分 0钟，冷却至4~ 5℃,加入 7 8牛血清 5 0~ ml (5% )和 1 氯化钙溶液 1 2,混台， 0 .m! 倒入培养皿。 为了从牛乳或乳制品试样中分离和计数

被控物的菌落。用显微镜和血浆凝固反应捡查和检验了

在奴佛卡因血琼脂上接种牛乳和洗出物所生长的微生物菌落将牛乳和洗脱物接种在奴怫卡因血琼脂上所生长的大多数 ( 5 7~ 10 0%)溶血葡萄球菌培养物呈现阳性血浆凝固反应对，这表明，可以测定出混合乳和其它目的物中金黄色葡萄球菌的密度奴佛卡因血琼脂剖备方法如下：向溶化

金黄色葡萄球菌，用灭菌生理盐溶液作1:1和 1 1 0释。含奴佛卡因琼脂的培养皿 0:0稀于里加入 1:0稀释物 0 1,并用玻璃刮子 10 . ml

均匀分布在整个培养基的表面。3~3℃ 7 8下孵育 2~ 2小时。在ⅡHK奴佛卡园琼脂 2 4

的琼脂培养基中加入最终浓度为 2的奴佛 卡因，再将琼脂水浴煮沸，当冷却到4~ 6

上，金黄色葡萄球菌生长出边缘整齐的圆型菌落。 为查明金黄色葡萄球菌ⅡH一的活 K酶性，把 5~ 7 N盐酸溶液柳入生长有培 ml1

5℃时，添加终浓度为 5的脱纤或枸橼酸 0 盐抗凝的牛血，倒入培养皿，层厚为 2 6 .~3.O m m …

养艘培蓁基表面，留置 2 ~分钟，此时，’落蜀围形成圆形透明带，然后把盐酸菌仔绷地劂出。对着透射光观察培养皿，发现

当鉴定金黄色葡萄球菌时，测定脱氧核糖按酸 (且HK酶活蛀，是国际葡萄球茸 )分类学委员会分会推荐的必须试验的一个项目。为此，在奴佛卡因琼脂培养基中，用牛血清代替血液，并加入肼 K,以揭示金黄色葡萄球菌的且HK-活洼，这样可以获得酶

有边缘清晰、圆形透明带的菌落，表明在赦检病科中有金黄色葡萄球菌的存在。为了算出每 l赦检材料中金

黄色葡萄球菌数量，计算整个培养基表面有透明带的菌落，并把获得雕数量乘以1 ( 0因为接种 0 1 )和病料 .mI的稀释度结一

分离和计数金黄色葡萄球菌的新盼选择培养。这种培养基是含有 l/且HK’%牛 mg ml 5血清、 2奴佛卡目的 2肉汤一白胨琼脂 蛋

论

血液奴佛卡因 MnA和且HK

培养基 ( H .)。【浓度是用试鹱方怯 p 8 6 HK测定的，以获得最适宜的解聚酶作用的良好带。加入正常牛血清作为葡萄球菌生长的促进剂，以提高培养基敏感：}。把奴佛卡因用作微生物区系的抑制剂。当培养基 p . H8 6时，葡萄球菌产生菌落数量最多和菌落周围

奴佛卡因MⅡA具有良好选择特性、鉴别

特性，并能从原始材料中分离和计数金黄色葡萄球菌根据可能性，者可择其一用之。两Be e H a s, 38 3, 1 6 (文 ) T p R pH 1 9, 6~ 3饿

谢敏康

译

衣立

枝 (刊删节J奉