动物免疫学第十二章 免疫学技术概述

第十一章 免疫学技术概述

一、免疫学技术基于免疫反应特异性的基本原理和其他技术、

方法，建立的各种用于抗体、抗原和免疫功能的检测及分析技术，一般包括三大类：

1.免疫血清学技术 2.细胞免疫分析技术 3.免疫制备技术

二、免疫学技术的应用1.用于许多疾病(如动物传染性疾病、免疫缺陷症、自身免疫病、肿瘤、超敏反应等) 的诊断和疗效评价 2.疫情监测 3.发病机制的研究

4.相关的生物科学学科(动物免疫学、生物化学、生理学、病理学、微生物学、分子和

细胞生物学等)的研究

三、主要内容本章及实验课学习常用免疫学技术的原理、基本 方法及应用。

1.免疫血清学技术抗原的检测技术 抗体的检测技术 2.细胞免疫分析技术 免疫细胞的分类和功能分析方法

细胞因子检测技术体内细胞免疫试验

3.免疫制备技术 抗原和抗体的制备技术 淋巴细胞分离技术 细胞因子纯化技术 抗体标记技术

第一节 免疫血清学技术概述

一、免疫血清学技术的类型1、凝集试验

2、沉淀试验3、补体参与的试验 补体结合试验、免疫粘附血凝试验 4、中和试验 病毒中和试验、毒素中和试验

5、标记抗体技术

荧光抗体技术、酶标记技术、

放射免疫测定技术、化学发光免疫测定技术

6、免疫核酸探针技术7、电免疫反应 免疫传感技术

8、 SPA免疫检测技术9、 胶体金免疫检测技术

10、生物素-亲和素免疫检测技术11、免疫电镜技术 12、免疫转印技术(即蛋白质转印技术) 13、免疫PCR技术 14、免疫沉淀技术

二、免疫血清学反应的特点

1、具有高度的特异性2、可能会出现交叉反应 交叉反应是区分菌(或病毒)株的血清型和亚 型的一个重要依据。 交叉反应的程度通常以相关系数(R)表示：

R=(r1×r2)1/2 ×100%r1=Ag1-Ab2效价/Ag1-Ab1效价

r2=Ag2-Ab1效价/Ag2-Ab2效价

一般地，R值大于80%,为同一亚型；在80%-25%,为不同亚型；

小于25%,为不同的血清型。3、抗原和抗体的最适比；带现象；方阵变量

测定法。

4、需要适宜的电解质溶液。

5、需要适宜的温度。6、需要适宜的酸碱度。 7、抗原与抗体以氢键、疏水键等发生结合； 结合后，如反应条件变化，也可再解离。 8、适宜的作用时间。 9、抗原、抗体及其它试剂的纯度会显著影响 试验。

三、建立免疫血清学反应 或技术的基本要求或原则

1、诊断抗原的制备和纯化 2、诊断

抗体的制备和纯化 3、试验操作程序的制定 4、试验材料、试剂的准备 和工作浓度的滴定 5、试验条件的优化 试验温度、时间、溶液的离子浓度、pH值

6、特异性试验 作交叉试验、抑制试验(或阻断试验) 7、敏感性试验 最小检测量或最小反应剂量的确定