实验报告3-微生物细胞形态及菌落特征观察

微生物细胞形态及菌落特征观察实验报告

马子午

生命科学学院 食品科学与工程专业 14101班 02号

1. 引言

1.1实验目的

学习细菌的一般接种方法；了解放线菌、蓝细菌、酵母菌、霉菌的菌落特征；学习并掌握如何观察细菌的形态特征，掌握常用霉菌制片方法。

1.2实验原理

放线菌的菌落会产生大量的基内菌丝和气生菌丝，并进一步分化产生孢子丝和孢子，表面呈粉状、颗粒状或絮状；部分蓝细菌可以形成孢子，由成串细胞连成丝状的蓝细菌，在细胞断裂时形成片段，这个片段由异形胞、营养细胞以及极节组成；酵母菌无性繁殖有芽殖、裂殖和产生掷孢子，有性繁殖可以形成子囊和子囊孢子，当酵母菌繁殖旺盛时，母细胞出芽产生的子细胞没有脱离母细胞的时候，子细胞又开始繁殖，这样许多细胞连在一起，形成藕节状的假菌丝；霉菌有青霉和曲霉，青霉的菌落形态特征呈扫帚状，曲霉的形态特征为菊花状的头和足细胞。

霉菌的有些结构在制片过程中容易被破坏，影响观察，采用载玻片培养法。简单易行，并且还可以在同一标本上观察到微生物发育的不同阶段的形态。[1]

2. 材料与方法

2.1材料与试剂

曲霉（Aspergillus spp.），青霉（Penicillium spp.），放线菌，蓝细菌，啤酒酵母菌（Sac.cerevisiae），复红染液，美蓝染液，棉蓝染液，酸性酒精。

2.2仪器与设备

显微镜，酒精灯，盖玻片，载玻片，镊子，接种环。

2.3方法与步骤

2.3.1放线菌的形态观察（插片法）

准备玻片：取一块干净的载玻片烘干，放于桌面。

接种与观察：用镊子从含放线菌菌种的培养基中取一块盖玻片，再用镊子在盖玻片上取菌种置于载玻片中央位置，直接镜检。

2.3.2蓝细菌形态观察

准备玻片：取一块干净的载玻片烘干，放于桌面。

接种：在载玻片中央滴一滴无菌水，取少量含有蓝细菌寄生的藻类于无菌水中，用镊子的头端慢慢敲碎至无菌水开始呈至绿色，盖上盖玻片。

镜检：直接镜检。

2.3.3啤酒酵母子囊孢子形态观察

准备玻片：取一块干净的载玻片烘干，放于桌面。

取菌涂片：在载玻片中央滴一滴无菌水，用接种环从含有啤酒酵母菌的试管中取菌种涂于无菌水中。

干燥固定：将已接种的载玻片放于酒精灯上方用文火干燥，待干燥后将载玻片穿于火焰中间固定。

染色：向载玻片滴加复红染液，与酒精灯上方加热，5-10分钟即可。 脱色：用酸性酒精脱色30-60s，水洗。

再染色：用美蓝染色5-10s，水洗，干燥。

镜检

2.3.4霉菌形态观察

准备玻片：取两块干净的载玻片烘干，放于桌面，往两块载玻片中央分别滴加一滴无菌水和棉蓝染液。

取菌涂片：在滴无菌水的载玻片上取曲霉菌涂于载玻片中央，在滴棉蓝染液的载玻片上取青霉菌涂于载玻片中央。

镜检：分别盖上盖玻片，直接镜检。

2.3.5微生物菌落特征观察

观察培养基中不同菌落的特征

3．结果与分析

3.1放线菌形态观察

40X 显微镜观察

3.2蓝细菌形态观察

40X 显微镜观察

3.3啤酒酵母形态观察

40X 显微镜观察

3.4霉菌形态观察

40X显微镜观察曲霉 40X显微镜观察青霉

3.5微生物菌落特征比较

菌种

放线菌

细菌

酵母菌

霉菌 观察特征 多数放线菌有基内菌丝和气生菌丝的分化，气生菌丝成熟时分化成孢子丝并产生成串的干粉状孢子，使菌落干燥，不透明、表面呈致密的绒丝状，正反面颜色不一致，并常有辐射状褶状等 多数细菌的菌落一般呈现湿润、光滑、透明、较粘稠、质地均匀及颜色较一致等 酵母菌的细胞形态一般呈乳白色或红色，表面湿润粘稠，出芽形成的子细胞尚未和母细胞分开，又长出新芽，形成成串的细胞，呈假丝状等 菌落质地比较疏松，外观干燥，不透明，呈现或紧或松的蛛网状、绒毛状或棉絮状，与培养基的连接紧密，不易挑取，菌落正反面的颜色和边

缘与中心的颜色不一致等

4.讨论与结论

4.1注意事项

实验过程中要严格控制无菌操作，取菌过程中试管塞不能放在实验台上，整个过程要在酒精灯的火焰旁完成，接种环取菌前后都应该在火焰上灼烧灭菌。复红加热染色的时候不要让染料蒸干，边加热边滴加染料，脱色的时候用的是酸性酒精，不是平常用的酒精。

4.2结论

不同菌有不同的形态，比如：放线菌、蓝细菌、酵母菌、霉菌的菌落特征各不相同，各有各的特征，要仔细的观察予以区分。

参考文献

[1]樊明涛，赵春燕，朱丽霞，等.食品微生物学实验[M].北京：科学出版社，2015