Pro Plus图像分析软件定量鸡胚尿囊膜血管新生面积的方法

来源：网络收集时间：2026-09-05

导读： Pro Plus图像分析软件定量鸡胚尿囊膜血管新生面积的方法医学医疗：Image?Pro Plus图像分析软件定量鸡胚尿囊膜血管新生面积的方法 http://doc.guandang.net 2009-5-12 15:35:58 点击： QQ次发送给好友和学友门交流一下收藏到我的会员中心保过辅导免费

Pro Plus图像分析软件定量鸡胚尿囊膜血管新生面积的方法

医学医疗：Image?Pro Plus图像分析软件定量鸡胚尿囊膜血管新生面积的方法

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【摘要】目的应用ImagePro Plus 5.0图像处理和分析软件，研究鸡胚尿囊膜 (chick chorioallantoic membrane，CAM) 血管新生面积定量的新方法。方法 20只发育良好的7日龄鸡胚，分为龙葵给药组和对照组，每组10只。将中药龙葵水提液及等量蒸馏水吸附于5 mm直径的定性滤纸，置于CAM上。利用ImagePro Plus 5.0软件，定量血管新生面积、蛋壳开窗处对应的CAM面积，计算出血管新生面积与CAM面积的比值。结果用ImagePro Plus 5.0可方便、自动、准确地进行给药前后的数据收集和面积计算。统计分析表明，受试物龙葵可明显抑制CAM血管新生，与对照组比较有极显著差异(P<0.001)。结论 ImagePro Plus 5.0图像处理和分析软件是一种高效、准确的统计血管新生面积的工具，用该软件定量蛋壳开窗部位下的血管新生面积占开窗部位所对应的CAM总面积，不仅操作简便，而且数据计算自动生成，可较准确地反映鸡胚血管新生情况。

【关键词】图像分析 Pro Plus 5.0 血管新生定量鸡胚尿囊膜

Quantitation of Angiogenesis in Chick Chorioallantoic Membrane

Using ImagePro Plus Software

XU Yang1，ZHAO Yingkai2，BI Minggang1，LIU Yan3

(1.Institute of Medicinal Plant Development，Chinese Academy of Medical Sciences and Peking

Union Medical College，Beijing 100094，China; 2.Institute of information on Traditional Chinese Medicine，

China Academy of Traditional Chinese Medicine，Beijing 100700；3.Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100029)

【Abstract】 Objective To evaluate the value of method for quantitation of angiogenesis in chick chorioallantoic membrane (CAM) using ImagePro Plus 5.0 software. Methods Twenty welldeveloped eggs were divided into two groups with 10 in each group: the Solanum nigrum group treated with 10 μL of its water extract，and the control group applied with the same volume of distilled water，respectively，absorbed on a piece of filter paper. ImagePro Plus 5.0 imaging software was used to quantify the angiogenesis with the vascular area，the total CAM area under the egg shell opening，the ratio between vascular and CAM area. Re

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sults ImagePro Plus 5.0 software could be used to delineate and calculate the angiogenesis area and CAM area under the open egg shell window automatically and accurately. The angiogenesis was significantly reduced in the Solanum nigrumtreated CAM compared with that in control group (P<0.001). Conclusion ImagePro Plus 5.0 is an effective tool for evaluation of angiogenesis in CAM models．The percentage of angiogenesis area vs. CAM area can be used to reflect angiogenesis in CAM models simply and quatitatively.

【Key words】 Image analysis，Software，ImagePro Plus 5.0; Quantitation，angiogenesis; Model，Chick chorioallantoic membrane

鸡胚尿囊膜 (chick chorioallantoic membrane，CAM) 血管新生模型已成为研究抑制和促进血管新生物质的作用效果的经典手段之一。通过众多的研究者的不断改良，造模方法渐趋完善。但是，在判定CAM上新生血管的面积方面，出现了数种方法并存的局面。为了寻求一种快速、准确，易于操作的方法，我们应用广泛使用的ImagePro Plus (版本5.0) 图像处理和分析软件，对于CAM模型中的血管面积定量方法进行了研究。

1 材料和方法

1.1 仪器

种蛋培养箱系上海跃进医疗器械厂生产，实验室用超净工作台系苏州净化设

备厂生产，ImagePro Plus 5.0软件为Media Cybernetics公司出品。

1.2 受精种蛋

购于中国农业大学实验动物研究所，每只55～65 g。

1.3 测试药物

取龙葵茎叶100 g，以沸水浸泡提取3次，每次用水2 L，30 min。过滤，

合并提取液，于水浴上蒸发浓缩至40 mL，即得2.5 g/mL 龙葵生药的提取液。

给药时离心除去沉淀，用0．45 μm微孔滤膜滤过除菌，4℃保存备用。

以定性滤纸为样品载体，用打孔器制成5 mm直径大小的纸片，灭菌冷却后

于超净台内，将滤纸排列于无菌铝箔上，分别加入10 L (灭菌蒸馏水稀释，含

生药20 mg) 龙葵药液，空白对照组只加入等量灭菌蒸馏水。滤纸样品均在超净

台内风干。

1.4 CAM模型

按参考文献方法［1］进行造模。20只发育良好的7日龄鸡胚，随机分为龙

葵给药组和对照组，每组10只，将种蛋表面用酒精消毒后，在超净台内用镊子

在蛋胚顶端小心戳一小口，然后剥去周围的蛋壳和壳膜，使开口约为（1.5×1.

5）cm大小。小心地用微型手术镊子从气室与卵黄囊分隔处挑破气室膜，轻轻去

Pro Plus图像分析软件定量鸡胚尿囊膜血管新生面积的方法

除上层的气室膜，暴露位于气室膜下层的CAM。将载样滤纸置于CAM 和卵黄囊膜处血管较少的部位，然后用灭菌透明胶封口，继续在37℃和60%的相对湿度下进行孵育48 h。

1.5 血管新生面积统计

孵育完毕后，去除鸡胚气室端密封的透明胶，小心地用镊子从气室端揭去周围的蛋壳，最大程度暴露CAM 便于观察和拍照。

体视显微镜接Nikon 4500数字相机，拍摄给药部位，保存图象文件。用图像处理软件ImagePro Plus 5.0读入保存的图象，进行数据收集及计算。

1.6 统计学方法

所有数据输入计算机，利用SPSS软件，根据资料要求进行方差分析。 2 结果

2.1 血管新生面积的定量及数据收集

（1）将存于计算机中的数字相机所摄图像文件，用图像处理软件ImagePro Plus 5.0打开，点工具条上的Manual Measurements图标，出现Measurements对话框，鼠标点Feature下面虚框中的不规则多边形图标处，鼠标移动到图像中，在所摄鸡胚CAM图中画出准确的蛋壳开窗大小所对应的CAM部位，软件即刻算出所定义的开窗部分的面积 (图1，A和D)。（2）鼠标点工具栏处的Irregular AOI (不规则的感兴趣区域) 图标后，再以鼠标在第一步标示好的CAM位置处重叠画出相应的范围。然后，点工具栏上的Measure按钮，在弹出的下拉菜单中选取count/size项，新出现一个对话框，选择Manual手动方式，点select colors按钮，选color cube base，通过鼠标选取血管处以定义血管范围，图像软件自动为选取的血管标上颜色 (图1，B和E)。关闭当前对话框，回到count/size，鼠标点对话框中的count按钮，软件就立即算出相应的血管面积 (图1，C和F)。

2.2 ImagePro Plus 5.0对给药后CAM血管新生的面积的定量

龙葵给药后，肉眼观察，CAM上给药载体旁边新生血管数明 …… 此处隐藏：3635字，全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……

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