Schiff试剂(雪夫希夫试剂)
Schiff试剂又称为雪夫试剂或希夫试剂等,是Schiff于1866年发现的一种有效的醛试剂,用于检测醛基(—CHO)。Leagene Schiff试剂主要用于糖原、黏液物质等染色,常与过碘酸(也称高碘酸)配合使用,过碘酸是一种强氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛与Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。配制好的Schiff试剂接近于无色。
Schiff试剂(雪夫/希夫试剂)
产品简介:
Schiff试剂又称为雪夫试剂或希夫试剂等,是Schiff于1866年发现的一种有效的醛试剂,用于检测醛基(—CHO)。制备Schiff试剂所用原料为碱性品红,其主要成分是副品红碱,为三氨基三苯甲烷的氯化物,其中的醌基正是品红显色的原因。在酸化的品红液中加入亚硫酸或者亚硫酸盐,品红被还原为品红-亚硫酸(或称白亚磺酸),即Schiff试剂。
Leagene Schiff试剂主要用于糖原、黏液物质等染色,常与过碘酸(也称高碘酸)配合使用,过碘酸是一种强氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛与Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。配制好的Schiff试剂接近于无色。
主要成分:主要由碱性品红、偏重亚硫酸钠、双蒸水等组成,过滤并且无色处理。
自备材料:
1、10%的福尔马林,亦可采购Leagene的福尔马林试剂(10%)(DF0110)
2、蒸馏水或去离子水
3、过碘酸溶液,亦可采购Leagene的过碘酸/高碘酸溶液(0.5%)(DG0001)
4、苏木素染色液,亦可采购Leagene的改良Lillie-Mayer苏木素染色液(DH0001)
5、酸性乙醇分化液,亦可采购Leagene的盐酸乙醇分化液(1%)(DZ0136)
6、95%乙醇
7、无水乙醇
8、封片剂
操作步骤(仅供参考):
1、常规固定,常采用10%的福尔马林,常规脱水包埋。
2、石蜡切片脱蜡入蒸馏水;冰冻切片直接入蒸馏水。
3、自来水冲洗2~3min,再用蒸馏水浸洗2次。
4、置于过碘酸溶液中,室温放置5~8min,一般不宜超过10min。
Schiff试剂又称为雪夫试剂或希夫试剂等,是Schiff于1866年发现的一种有效的醛试剂,用于检测醛基(—CHO)。Leagene Schiff试剂主要用于糖原、黏液物质等染色,常与过碘酸(也称高碘酸)配合使用,过碘酸是一种强氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛与Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。配制好的Schiff试剂接近于无色。
5、自来水冲洗1次,再用蒸馏水浸洗2次。
6、样本放入Leagene Schiff Reagent,置于室温阴暗处,浸染10~20min。
7、自来水冲洗10min。
8、样本置于苏木素染色液中,染细胞核1~2min。
9、酸性乙醇分化液分化。
10、自来水冲洗10~15min后,更换双蒸水清洗,使其返蓝。
11、逐级常规乙醇脱水。
12、二甲苯透明。
13、中性树胶封固。
染色结果:
PAS反应阳性物质(糖原或多糖)呈红色或紫红色
阴性对照(可选):
1、对照切片可以用唾液,取唾液片(过滤后用)处理30~60min后,与其他切片共同入过碘酸溶液。
2、对照片可以淀粉酶,取淀粉酶1g于双蒸水或PBS(pH5.3) 100ml,处理30~60min后,与其他切片共同入过碘酸溶液。
3、如果对照片采用其自身样本,对照片不经过碘酸溶液这一步,直接入Schiff Reagent。染色结果:对照片呈阴性反应,无紫红色颗粒。
注意事项:
1、 Schiff Reagent应置于4℃密闭保存,使用时避免接触过多的阳光和空气。
2、 leagene Schiff Reagent在室温过低(小于15℃)情况下反应缓慢,可以置于适宜温水(小于30℃)中恢复后再使用。
3、 理想的Schiff Reagent接近于无色,如果试剂颜色呈极轻微粉红色亦可考虑使用。如试剂颜色呈明显的红色,应弃用。
4、 颜色深浅很大程度上取决于样品在过碘酸溶液和Schiff Reagent中作用时间的长短。
5、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 6个月有效。
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