免疫亲和层析及其在真菌毒素检测中应用_肖付刚
掖食与油脂
200 7
年第
8
期
免疫亲和层析及其在真菌毒素检测中应用肖付刚赵晓联汤坚顾小红 (江南大学食品科学与技术国家重点实验室江苏无锡 2 l 1 4 1 2 2江苏省微生物研究所有限公司江苏无锡 1 4 2 6 ) 0 3‘.
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:要该文简介免疫亲和层析工作原理载体要求与选择免疫亲和柱制备与使用重点综述免疫亲和层析在黄曲霉毒素储曲霉毒素玉米赤霉烯酮脱氧雪腐镰刀菌烯醇伏马毒素 T一 2毒素等真菌毒素检测中应用最新进展:关键词免疫亲和层析;真菌毒素;黄曲霉毒素;储曲霉毒素
摘
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中图分类号: 01.
658 1
文献标识码: A
文章编号: 10 0 8一 9 5 7 8 (2 0 0 7 ) 0 8一 0 0 4 0一 0 4
免疫亲和层析原理
球商品名为别称为,
S e p h a ro4B 6B、
se
,
含糖浓度为e p h a ro s e,
2% 4%、
、
6%
时分疏
1 1.
ZB
、
;
因为 S
4B
结构比〔’一,’。
6B
亲和层析是利用生物活性物质之间特异亲和力、、、
如静电作用疏水作用金属配位作用氢键和弱共价键作用及结构互补效应等使目标物得到分离纯化,
松而吸附容量比 1 3免疫亲和柱.
,
ZB
大所以u n o a
4B
应用最广co
,
液相层析法,
。
免疫亲和层析是以抗原抗体中一方作为。
i f m n r利用免疫亲和层析原理制
免疫亲和柱 (x
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lu
配基亲和吸附另一方的亲和层析分离系统由于抗体与抗原作用具有高度专一性且它们亲和力极强,
抗原的亲和层析柱
。
成用以分析检测抗体或〔’〕其工作原理如下图:
i n
,
IA C )
就是
(结合常数 K
在 1护一,
10 9
之间)所以许多典型亲和层,
析纯化蛋白质过程已使用单克隆抗体 (简称单抗 )作为亲和配基.
。
目前利用抗体一抗原模式有可能得到,,。
每一种目标蛋白单抗然后以单抗为配基通过亲和〔’〕层析技术分离纯化目标蛋白质1 2.
载体基本要求和选择理想载体应具有下列条件,:
ao〔“〕:
o0 a
(l )不溶于水但高,
)惰性物质非特异性吸附少; ( 3 )具有相当度亲水洲2)机械性能量化学基团可供活化; (4 )理化性质稳定; (5; )通透性好好具有一定颗粒形式以保持一定流速 (6,,
K‘ 0口
抗沐分析物一抗原干扰物
最好为多孔网状结构使大分子能自由通过。、
,
;
( )能抵 7 a )样品提取液过柱; ( ( )杂质淋洗; (c )目标物洗脱 b、
抗微生物和醇的作用可作为固相载体的有皂土玻璃微球氧化铝聚、
图IA C
1
免疫亲和柱工作原理,
丙烯酸胺凝胶葡聚糖凝胶纤维素和琼脂糖凝胶等在这些载体中皂土玻璃微球等吸附能力弱且不能,、
、
、
。
,
制备和使用一般包括如下步骤 l )免疫吸附剂制备 (偶联 )即目标物 (如抗原 ) (,
〔’〕:
防止非特异性吸附;纤维素非特异性吸附强;聚丙烯酸胺凝胶是目前优良载体琼脂糖凝胶极易被澳化氰。
配基 (如抗体 )与载体结合; (2 )装柱;(3 )
活化活化后性质稳定能经受层析各种条件处理不引起性质改变易于再生和反复使用:,。
,
,
,
琼脂糖凝胶微
亲和吸附; 4 )杂质淋洗: (
收稿日期 2 0 0 7 0 6 2 4:〕 6一2一扣 )基金项目卫生部科研基金 (w均 2 )‘ (:一 1 9 7 8 )男博士研究生研究方向:食品安全作者简介肖付刚 (一一,
,
,
200 7
年第
8
期
粮食与油脂土壤动植物各种坚果中特别是花生和核桃在大‘“’豆玉米奶制品食用油等制品中也经常发现 A F、、、
5 )目标物洗脱; ( 6 )免疫亲和柱再生与保存 (2。
、
、
,
,
。
真菌毒素,,,,
各国大多制定相关法律限定其在食品中含量欧盟国家规定能超过量标准、。
,
例如
,
Ft真菌 ( m g i )是一类有细胞壁不含叶绿素无根叶茎以腐生或寄生方式生存能进行有性或无性繁 …… 此处隐藏:15186字,全部文档内容请下载后查看。喜欢就下载吧 ……
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