环境微生物监测标准操作规程

环境微生物监测标准操作规程外三科：吴苏千

(一)检测指征1. 感染爆发或感染流行时，环境因素在感染传播 中有流行病学意义。 2. 监测潜在的危险环境状况，证明有危险的病原 体存在或证明危险的病原体已被成功清除。 3 当某项感染控制措施改变时，评估其效果；或 者根据规范要求，仪器设备或系统启用时进行 检测。 4. 目标性监测的需要。 5. 循证医学证据支持。

二、空气监测(沉降法)

(一)采样时间 消毒处理后与进行医疗活动之前。 (二)采样高度 距地面垂直高度80~150cm。

(三)采样点设置 1. 非洁净房间：室内面积≤30m2,在对角线上 设里、中、外3点。里、外两点位置各距墙 1m;室内面积>30m2,设东、西、南、北 四点均距墙1m。9cm直径普通营养琼脂平板 在采样点暴露5min后送检培养。 2. 洁净房间：清洁房间在空态或静态条件下， 根据房间的不同级别进行布点，9cm直径普 通营养琼脂平板在采样点暴露30min后送检 培养。

(四)采样注意事项

1.采样人员做好手部卫生，佩戴口罩、帽子 等个人防护装备。进入清洁房间采样必须 穿洁净服。 2.皿盖打开顺序应先内后外；手臂及头不可 越过培养皿上方；行走及放置动作要轻， 尽量减少对空气流动状态的影响；皿盖应 扣放，以防污染。 3.采样结束后，由外向内合上皿盖。 4. 采样完毕的培养皿应在6h内培养。

(五 )实验室检验

1.培养皿在37℃培养48H后，进行菌落计数和 致病菌检验，普通营养琼脂培养基的配置 按照gb/t4789.11-2003;菌落计数方法 gb/t7918.2-1987;致病菌检验；溶血性链 球菌检验按照gb/t4789.11-2003,沙门菌按 照检验gb/t4789.4-2003,铜绿单胞检验按 照gb/t7981.4-1987,金黄色葡萄球菌检验 按照gb/7981.5-1987.

2.计算结果：非洁净房间以100c㎡的平皿在 空气中暴露5min即相当于10L空气中的细 菌数，计算公式为：细菌数(cfu/m³ ) =1000÷ (A/100×t×10/5)×n=50000n/at t-平皿暴露空气中的时间(min);n-培养后平皿 上的菌落数(cfu/平皿);a-所用平皿的面积 (c㎡)

(六)结果判断 参照GB15982-1995(医院消毒卫生标准) 三、物体表面监测 (一)采样时间 消毒处理后4H内。 (二)采样方法 被采样本面积<100c㎡取全部表面;如采样 面积≥100c㎡,连续采样4个置(不可有重 叠),每个位置才5㎝×5㎝的大小，用浸有 无菌生理盐水的棉拭子1支，在规格板内横 竖往返均匀涂擦各五次，并随之转动棉拭子， 剪去手接触部位后，将棉拭子投入10ml无菌 生理盐水试管内。不规则的物体表面，用棉 拭子直接涂擦，采样面积≥30c㎡。

(三)采样注意事项 1. 送检时间不得超过6h,若样品保存于4℃, 则不得超过24h. 2. 消毒后采

样一定要采用中和剂，不同消毒 剂所用中和剂不同。 (四)实验室注意事项 1. 取1毫升倒在培养，平行双份。37℃培养 48h,进行菌落计数和致病菌检验，普通营 养琼脂培养基的配置按照gb/t4789.282003;菌落技术方法按照gb/t7981.2-1987; 致病菌检验与空气监测相同。 2.计算公式； 细菌总数(cfu/c㎡)=(平板菌落数×稀 释倍数)/采样面积(c㎡)

(五)结果判断 参照gb15982-1995《医院消毒卫生标准》