水中大肠菌群总数的测定
环境微生物学实验水中大肠菌群( group) --水中大肠菌群(Collform group) 总数的测定Microbiology Department College Of Resource & Environment SWU Liyong Tel:023-68250426 E-mail: liyongwf@http://
实验内 实验 实验 实验 实验 业
、实验内大肠菌群总数的测定; 大肠菌群总数的测定; 大肠菌群的鉴定; 大肠菌群的鉴定; 水质的评价; 水质的评价;
、实验大肠菌群是以E.coli为主的需氧性及兼 性厌氧的菌群; 性厌氧的菌群; 包括艾希氏菌属;柠檬酸菌属, 包括艾希氏菌属;柠檬酸菌属,肠杆菌 属;克雷伯氏菌属 是肠道中最普遍,数量最多的细菌, 是肠道中最普遍,数量最多的细菌,与 肠道致病菌呈一定相关性; 肠道致病菌呈一定相关性; 抗逆行稍强; 抗逆行稍强; 大肠菌群数: 大肠菌群数: 饮用水<3个/L; 个饮用水水源< 饮用水水源<1000个/L 个
革兰氏阴性,无芽孢杆菌; 能发酵乳糖产酸,产气(CO2);容易检 测; 在伊红美兰培养基成典型菌落特征:深 紫黑色,具有金属光泽;中心颜色较深 的菌落; 多管发酵法(MPN)
、实验培养基:三倍乳糖蛋白胨发酵培养液; 单倍乳糖蛋白胨发酵培养液; 伊红美兰培养基(EMB) 其它器材: 待测水样,发酵管,染色液,相关染色 液,显微镜等;
、实验水样的采集: 无菌操作采集水样; 采集后4hour内测定;同时冰箱保藏; 水样的稀释: 污染严重的水体稀释; 初发酵实验(假设性实验): 5支三倍发酵液,各加 支三倍发酵液, 待测水样混匀; 支三倍发酵液 各加10ml待测水样混匀; 待测水样混匀 5支单倍发酵液,各加 支单倍发酵液, 待测水样混匀; 支单倍发酵液 各加1.0ml待测水样混匀; 待测水样混匀 5支单倍发酵液,各加 支单倍发酵液, 待测水样混匀; 支单倍发酵液 各加0.1ml待测水样混匀; 待测水样混匀 同时作不加水样的对照, ℃培养24hour; 同时作不加水样的对照,37℃培养
平板分离(证实性实验): 1.24hour后,计数各浓度发生反应的管数; 2.接种发生反应的样液(产酸、产气)于 伊红美兰培养基平板,划线分离,37℃ 培养24hour; 3.观察菌落特征; 4.挑起典型菌落作革兰氏染色,镜检;
复发酵实验 挑起典型菌落( 挑起典型菌落(证实为革兰氏阴性无芽孢 杆菌)接种于单倍乳糖发酵液中, ℃ 杆菌)接种于单倍乳糖发酵液中,37℃ 培养24hour,产酸产气,证实为大肠菌 培养 ,产酸产气, 群阳性; 群阳性;
、实验
业
根据发酵管数计算水中大肠菌群数; 对水质进行评价; 绘出革兰氏染色的视野图,及实验结果。
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